【摘要】：目的探討地塞米松對(duì)海水浸泡的人肺泡上皮細(xì)胞(A549)鈉通道的影響。方法將常規(guī)培養(yǎng)的A549細(xì)胞分為海水處理組(SG)、陰性對(duì)照組(NG)和地塞米松處理組(DG)。SG組經(jīng)滅菌配方海水常規(guī)孵育,DG組在經(jīng)海水處理后,加入地塞米松(終濃度1μmol/L)處理,NG組常規(guī)培養(yǎng)至實(shí)驗(yàn)終點(diǎn)。配方海水滲透壓1300mmol/L,pH8.2,相對(duì)密度1.05。采用MTT法檢測(cè)細(xì)胞存活率,流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞的凋亡和壞死情況,Western blotting法檢測(cè)鈉鉀泵α1亞單位(NKA-α1)、鈉通道α亞單位(α-ENaC)的表達(dá),水解比色法檢測(cè)NKA活性。結(jié)果流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)結(jié)果顯示,海水孵育30min后A549細(xì)胞的存活率為90.60%±2.11%,地塞米松(1μmol/L孵育6h)處理對(duì)海水孵育后細(xì)胞的存活率無(wú)影響。NG組的NKA-α1和α-ENaC蛋白表達(dá)(0.113±0.041、0.396±0.124)顯著高于SG組(0.038±0.009、0.093±0.038;P0.01)或DG組(0.067±0.015、0.165±0.078;P0.01),但DG組顯著高于SG組(P0.05)。與NG組[31.298±5.779μmol/(mg·h)]比較,SG組NKA酶活性[14.211±3.885μmol/(mg·h)]明顯降低(P0.05);DG組的NKA酶活性[18.641±1.921μmol/(mg·)]較SG組有升高(P0.05)。結(jié)論在不影響人肺泡上皮細(xì)胞存活狀況的情況下,地塞米松可以抑制海水孵育導(dǎo)致的α-ENaC、NKA-α1含量及NKA活性的下降。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of dexamethasone on sodium channel in human alveolar epithelial cells (A549) after seawater immersion. Methods A549 cells were divided into two groups: seawater treatment group (SG),-negative control group, (NG) and dexamethasone treatment group (DG). SG group) were incubated with sterilized formula seawater. DG group was treated with seawater. After treatment with dexamethasone (1 渭 mol / L), the NG group was cultured to the end of the experiment. The osmotic pressure of the formulated seawater is 1300 mmol / L, pH 8.2, and the relative density is 1.05. Cell viability was detected by MTT method, apoptosis and necrosis were detected by flow cytometry., Western blotting assay was used to detect the expression of sodium potassium pump 偽 1 subunit (NKA- 偽 1) and sodium channel 偽 subunit (偽-ENaC). The activity of NKA was detected by hydrolysis colorimetry. Results the results of flow cytometry showed that the survival rate of A549 cells incubated with seawater was 90.60% 鹵2.11%, and the survival rate of A549 cells was 90.60% 鹵2.11%. The expression of NKA- 偽 1 and 偽-ENaC protein in NG group (0.113 鹵0.041, 0.396 鹵0.124) was significantly higher than that in SG group (0.038 鹵0.009, 0.093 鹵0.038). P0.01) or DG group (0.067 鹵0.015,0.165 鹵0.078), but DG group was significantly higher than SG group (P0.05). Compared with NG group [31.298 鹵5.779 渭 mol / (mg 路h)], NKA activity in SG group [14.211 鹵3.885 渭 mol / (mg 路h)] was significantly decreased (P0.05). The activity of NKA in DG group [18.641 鹵1.921 渭 mol / (mg)] was higher than that in SG group (P0.05). Conclusion Dexamethasone can inhibit the decrease of 偽-ENaC,NKA- 偽 1 content and NKA activity induced by seawater incubation without affecting the survival of human alveolar epithelial cells.
【作者單位】： 海軍總醫(yī)院呼吸內(nèi)科;解放軍總醫(yī)院胸外科;
【基金】：全軍“十一五”后勤科研計(jì)劃課題(06-3305)
【分類號(hào)】：R96;R83

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