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巴戟天粗提取物對微波輻射后雄性大鼠下丘腦調控生精功能的影響

發(fā)布時間:2017-01-03 14:02

  本文關鍵詞:巴戟天粗提取物對微波輻射后雄性大鼠下丘腦調控生精功能的影響,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


《福建醫(yī)科大學》 2013年

巴戟天粗提取物對微波輻射后雄性大鼠下丘腦調控生精功能的影響

王鳳娟  

【摘要】:【目的】 通過微波輻射構建雄性SD大鼠生殖系統(tǒng)損傷模型,觀察不同巴戟天粗提取物對生殖系統(tǒng)的功效及對下丘腦調控大鼠生精功能的影響,為以后巴戟天有效成分的篩選及單體的研究提供依據(jù)。 【方法】 75只健康成年雄性SD大鼠首先隨機分為空白對照組(5只)、實驗對照組(35只)和輻射組(35只)。輻射組應用微波信號發(fā)生器(900MHz1.0W),功率密度為218μm/cm2,12h/d,持續(xù)輻射2周。實驗對照組生活環(huán)境與輻射組相同但不輻射。輻射后,每組各取材5只。隨之,輻射組隨機分成輻射模型組、巴戟天水提物治療組和巴戟天醇提物治療組,每組10只。實驗對照組也隨機平均分成對照組、未輻射巴戟天水提物給藥組和未輻射巴戟天醇提物給藥組。巴戟天給藥組和治療組分別給予相應的巴戟天提取物20g/kg.d-1持續(xù)灌胃2周。觀察各組大鼠生長發(fā)育和神經行為學變化,相關的性行為、精子參數(shù)及血清激素水平差異,睪丸和附睪指數(shù)及形態(tài)學改變,下丘腦形態(tài)學及下丘腦弓狀核和正中隆起GnRH-mRNA的表達。 【結果】 1.微波輻射后,輻射組大鼠體重(255±27)g略低于實驗對照組(265±20)g,但差異無統(tǒng)計學意義。輻射組大鼠體毛發(fā)黃、干燥、無光澤,特別是近尾部1/3處顯著。以上改變?yōu)闈u進過程即隨輻射時間的延長逐漸加重。大鼠在輻射過程中神經行為學上表現(xiàn)為晝睡夜醒、行動敏捷、防御攻擊能力強→躁動不安,易激惹。巴戟天提取物灌胃治療后大鼠增重顯著低于對照組,但體毛恢復光澤,躁動減輕,變得相對安靜嗜睡。巴戟天水提物治療組較巴戟天醇提物治療組體表特征恢復快且明顯。巴戟天水提物給藥組和巴戟天醇提物給藥組在灌胃過程中體重略低于對照組外,大鼠體毛及精神狀態(tài)無明顯改變。 2.與實驗對照組相比,輻射組大鼠撲捉潛伏期(CIP)顯著延長(P<0.05),撲捉次數(shù)(CT)顯著減少(P<0.05)。 3.與其他組相比(巴戟天醇提物治療組除外),輻射模型組睪丸和附睪指數(shù)均顯著降低(P<0.05)。 4.睪丸和附睪形態(tài)學 光學顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn),對照組睪丸生精上皮細胞排列整齊,各級生精細胞層次分布明顯,生精小管和附睪管內均可見大量精子。輻射模型組睪丸生精小管上皮損傷,結構疏松,生精細胞排列紊亂,,脫落、壞死,有的生精小管管腔內充滿壞死脫落的生精細胞及細胞碎片,有的管腔空虛,生精小管內見少量精子或未見精子,生精小管間有時可見游離的紅細胞,少量間質細胞散在分布。輻射模型組大鼠附睪管內可見三種現(xiàn)象:①附睪管內充滿脫落的細胞及細胞碎片,②附睪管內除見脫落的細胞及細胞碎片外,還可見少量精子,③附睪管內空虛。巴戟天水提物治療組表現(xiàn)為睪丸生精小管細胞層次增多,脫落細胞及細胞碎片少見,新生精子(即由基底部伸向管腔內的精子)增多,大部分附睪管內均充滿精子,偶見1~2個空虛管腔。巴戟天醇提物治療組睪丸仍可見多數(shù)生精小管內生精細胞壞死脫落,精子少見,附睪管內脫落細胞及細胞碎片稀疏分布,空虛官腔仍可見。 透射顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn),對照組生精細胞排列緊密,可見大量精子,輻射模型組睪丸可見大片壞死區(qū)域,支持細胞及生精細胞內線粒體腫脹、空泡化,細胞核分裂異常呈中央空虛的環(huán)狀并可見細胞核溶解,可見極少量的精子,巴戟天水提物治療組睪丸生精小管內精子顯著增多,巴戟天醇提物治療組生精細胞恢復顯著但僅見少量精子。 5.與其他組相比(醇提物治療組除外),輻射模型組精子密度顯著降低(P<0.05),精子畸形率顯著升高(P<0.05)。 6.與對照組相比輻射模型組血清睪酮(T)水平降低,GnRH及LH水平升高,醇提物治療組GnRH、FSH、LH、T水平與輻射模型組相比無顯著差異。 7.下丘腦形態(tài)學透射顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)輻射模型組下丘腦神經元內線粒體腫脹、空泡化,內質網(wǎng)擴張,可見有髓神經纖維脫髓鞘樣變,突起腫脹。巴戟天水提物治療組和巴戟天醇提物治療組均有所恢復。 8.免疫組化及免疫熒光技術標記可見GnRH主要表達在弓狀核,輻射模型組表達增強。 9.Real-time PCR結果顯示,輻射模型組下丘腦GnRH-mRNA表達水平增高。 【結論】 1、通過低功率微波持續(xù)輻射2周可成功構建成年雄性SD大鼠生殖系統(tǒng)損傷模型。 2、巴戟天水提物可促進微波輻射大鼠睪丸的修復和促進精子生成,巴戟天醇提物可改善損傷的大鼠睪丸生精細胞的形態(tài),而對精子的生成作用不明顯。 3、微波輻射對下丘腦有一定的損傷影響,巴戟天用藥后下丘腦GnRH的表達降低。 4、巴戟天水提物治療效果優(yōu)于巴戟天醇提物。

【關鍵詞】:
【學位授予單位】:福建醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2013
【分類號】:R965
【目錄】:

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