本文關(guān)鍵詞：羥基喜樹堿磁性熱敏脂質(zhì)體腫瘤局部藥動學(xué)研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《廣州中醫(yī)藥大學(xué)》 2012年

羥基喜樹堿磁性熱敏脂質(zhì)體腫瘤局部藥動學(xué)研究

謝毅  

【摘要】：1目的 課題建立昆明鼠H22肝癌皮下腫瘤動物模型,以微透析技術(shù)為采樣方法,對自行研制的羥基喜樹堿磁性熱敏脂質(zhì)體制劑進(jìn)行腫瘤局部藥動學(xué)研究,以評價自制]HCPT磁性熱敏脂質(zhì)體在腫瘤局部的靶向聚集性和釋藥性,為今后進(jìn)一步開展高強(qiáng)度聚焦超聲(HIFU)與熱敏脂質(zhì)體聯(lián)用的腫瘤治療及制劑技術(shù)研究奠定理論基礎(chǔ)。本課題通過系統(tǒng)、全面的研究,建立了以微透析技術(shù)為核心的腫瘤局部藥動學(xué)研究方法,彌補(bǔ)了經(jīng)典藥動學(xué)在腫瘤靶向制劑研究方面的不足,為今后該領(lǐng)域的研究奠定基礎(chǔ)。 2方法 本課題研究主要分為以下四大部分： 2.1HCPT分析方法的建立 采用HPLC-UV同時測定開環(huán)和閉環(huán)羥基喜樹堿的含量,對色譜條件進(jìn)行了考察,包括流動相優(yōu)化、標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制、線性范圍考察、精密度試驗、定量限及檢測限測定等。 2.2HCPT微透析取樣方法建立 分別考察了灌流流速、媒介濃度、溫度等因素對開環(huán)、閉環(huán)HCPT回收率測定的影響；進(jìn)行了HCPT回收率變化特性研究,包括回收率的體內(nèi)外日內(nèi)穩(wěn)定性,開、閉環(huán)HCPT混合回收率變化情況等研究；內(nèi)標(biāo)法測定HCPT體內(nèi)回收率的可行性研究 2.3羥基喜樹堿體內(nèi)整體藥動學(xué)研究 采用微透析技術(shù)進(jìn)行HCPT體外血漿蛋白結(jié)合率測定；比較了市售羥基喜樹堿注射液尾靜脈和腹腔注射給藥的藥動學(xué)過程；研究了自制HCPT磁性熱敏脂質(zhì)體大鼠體內(nèi)藥動學(xué)過程；反透析法測定體內(nèi)回收率,繪制相關(guān)藥時曲線,采用DAS2.1.1統(tǒng)計軟件處理藥時數(shù)據(jù)。 2.4自制羥基喜樹堿磁性熱敏脂質(zhì)體腫瘤局部藥動學(xué)研究 建立昆明小鼠H22肝癌細(xì)胞皮下腫瘤模型；同心圓探針植入皮下腫瘤模型進(jìn)行腫瘤局部藥動學(xué)過程,藥動學(xué)實驗分三組：A組為自制HCPT磁性熱敏脂質(zhì)體外加磁場組,B組為自制HCPT磁性熱敏脂質(zhì)體不加磁場組,C組為市售HCPT注射液外加磁場組,灌流流速2μL·min-1,反透析法測定體內(nèi)回收率,繪制相關(guān)藥時曲線,采用DAS2.1.1和SPASS18.0統(tǒng)計軟件處理藥時數(shù)據(jù)。 3結(jié)果 3.1HCPT檢測方法建立課題建立了以HPLC-UV同時檢測開環(huán)、閉環(huán)HCPT的方法。分析方法如下：Waters高效液相色譜系統(tǒng)：Waters515泵,2487雙波長紫外檢測器,浙大N3000色譜工作站；色譜柱：Phenomenex Luna C18(2)(4.6mm×250mm,5μm)柱;保護(hù)柱:Phenomenex保護(hù)柱；流動相：乙腈-甲醇-0.05mol·L-1KH2PO4(NaOH調(diào)pH6.4)(60：490：450)；流速：0.8mL-min-1;檢測波長：384nm；柱溫：25℃；柱壓：120bar。 在此色譜條件下,HCPT開、閉環(huán)峰形對稱,出峰時間分別為4.48、7.62min,且雜質(zhì)分離度良好,線性范圍及定量限、檢測限等符合實驗要求。 3.2HCPT微透析取樣方法建立 確定了HCPT體內(nèi)微透析取樣參數(shù)：灌流流速2μL·min-1,取樣量12μL,取樣間隔6min,反透析法測定回收率。 HCPT開環(huán)、閉環(huán)混合回收率變化情況研究結(jié)果：增量法和減量法下開環(huán)、閉環(huán)HCPT回收率在各流速下保持一致,這為反透析法測定體內(nèi)回收率可行性提供了實驗依據(jù)；開環(huán)、閉環(huán)HCPT探針回收率不隨濃度變化；在同一流速下閉環(huán)HCPT回收率比單純閉環(huán)HCPT時下降明顯,開環(huán)HCPT回收率比單純開環(huán)HCPT時未見明顯下降,說明開、閉環(huán)HCPT同時存在時,閉環(huán)HCPT會受開環(huán)HCPT影響導(dǎo)致回收率下降。 開環(huán)、閉環(huán)HCPT體外回收率在8小時內(nèi)保持穩(wěn)定,RSD分別為5.12%、5.99%；體內(nèi)回收率在8小時內(nèi)基本保持穩(wěn)定,RSD分別為7.88%、8.68%。通過體外和體內(nèi)研究表明,內(nèi)標(biāo)物與HCPT回收率比值P具有不穩(wěn)定性,從而不能準(zhǔn)確地求出探針周圍藥物濃度的變化,內(nèi)標(biāo)法測定回收率可行性不高。 3.3羥基喜樹堿體內(nèi)整體藥動學(xué)研究 反透析法測定HCPT體外血漿蛋白結(jié)合率達(dá)72%; 血液微透析研究表明：以10mg/kg給藥劑量,市售羥基喜樹堿注射液尾靜脈和腹腔給藥后藥動學(xué)參數(shù)均符合二房室開放模型,腹腔給藥有一個短暫的吸收過程;尾靜脈給藥的α、β相半衰期、Tmax、MRT(0-∞)值遠(yuǎn)小于腹腔給藥途徑,說明尾靜脈給藥后HCPT快速地分布消除,腹腔途徑相對較慢,藥物滯留時間相對較長；尾靜脈組的Cmax值是腹腔組的13.3倍,AUC(0-∞)值前者是后者的4.3倍,說明尾靜脈給藥途徑能顯著提高HCPT血藥濃度和生物利用度。 自制羥基喜樹堿磁性熱敏脂質(zhì)體尾靜脈給藥后,大大增加閉環(huán)血藥濃度；和市售羥基喜樹堿注射液相比,二者的藥動學(xué)參數(shù)均符合二房室開放模型,自制劑型的α、β相半衰期、Tmax、MRT(0-∞)值分別是市售劑型的11.1、2.2、4、3.5倍,說明自制磁性熱敏脂質(zhì)體尾靜脈給藥后,HCPT分布消除速度慢,滯留時間比市售劑型長；自制劑型的Cmax值是市售劑型的0.6倍,AUC(0-∞)值前者是后者的1.4倍,說明與市售劑型相比,自制劑型尾靜脈給藥能提高藥物的生物利用度,同時降低藥物血液達(dá)峰濃度,降低藥物的毒性。 3.4自制羥基喜樹堿磁性熱敏脂質(zhì)體腫瘤局部藥動學(xué)研究 A、B、C三組HCPT在腫瘤局部藥動學(xué)分布過程均符合二房室開放模型,三組Tmax依次為6,12,18min,與B、C兩組相比自制HCPT磁性脂質(zhì)體在外加磁場引導(dǎo)下能在短時間內(nèi)快速地聚集到腫瘤局部釋放藥物；A、B、C三組AUC(0-∞)值兩兩之間均有統(tǒng)計學(xué)差異(Sig.0.05),三組Cmax值兩兩之間均有統(tǒng)計學(xué)差異(Sig.0.05),說明自制磁性熱敏脂質(zhì)體在外加磁場的引導(dǎo)下,能顯著地提高腫瘤局部的藥物濃度,靶向聚集性和釋藥性高。 4結(jié)論 4.1采用HPLC-UV能分離開環(huán)、閉環(huán)HCPT,系統(tǒng)的最低檢測限量能夠滿足本研究中可能達(dá)到的最低濃度。 4.2HCPT開環(huán)、閉環(huán)混合時,閉環(huán)HCPT回收率會下降,開環(huán)回收率變化不大,但兩者透析特性均不發(fā)生改變。 4.3HCPT內(nèi)酯環(huán)結(jié)構(gòu)特殊,未尋找到合適內(nèi)標(biāo)物使二者回收率比值P穩(wěn)定,內(nèi)標(biāo)法測定回收率可行性不高。 4.4用反透析法測定的HCPT大鼠血漿蛋白結(jié)合率與傳統(tǒng)法研究的結(jié)果吻合,驗證了微透析進(jìn)行HCPT體內(nèi)藥動學(xué)研究的可行性。 4.5自制HCPT磁性熱敏脂質(zhì)體血液藥動學(xué)研究結(jié)果表明,自制劑型能很好地保護(hù)HCPT內(nèi)酯結(jié)構(gòu),提高血液閉環(huán)比例。 4.6昆明小鼠H22肝癌細(xì)胞皮下腫瘤模型成模周期短,成瘤率高,適合微透析研究進(jìn)行腫瘤局部藥動學(xué)研究。 4.7自制的HCPT磁性熱敏脂質(zhì)體在外加磁場和腫瘤局部高溫(≥43℃)的條件下,能迅速地聚集到靶部位,快速地釋放包封的藥物,腫瘤靶向性高。 4.8本課題建立了以微透析技術(shù)為基礎(chǔ)的抗腫瘤藥物靶向給藥系統(tǒng)腫瘤局部藥動學(xué)研究的一般研究方法,為今后腫瘤局部藥動學(xué)研究奠定基礎(chǔ)。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：廣州中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號】：R96
【目錄】：

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【參考文獻(xiàn)】

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10 馮怡;黃羽;曾星;鄧遠(yuǎn)輝;歐潤妹;劉奕明;;LC/MS/MS法測定兔灌胃美敏偽麻溶液后血漿中的鹽酸偽麻黃堿及其藥動學(xué)研究[A];2008第十一次全國臨床藥理學(xué)學(xué)術(shù)大會論文集[C];2008年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 朱峰;周新騰;[N];中國醫(yī)藥報;2002年

2 ;[N];中國醫(yī)藥報;2003年

3 勞英堅 譯;[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報;2001年

4 ;[N];中國醫(yī)藥報;2003年

5 平安醫(yī)院副主任醫(yī)師 唐愛武;[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報;2006年

6 曾蘇;[N];中國醫(yī)藥報;2003年

7 ;[N];中國醫(yī)藥報;2001年

8 記者 顧玲　見習(xí)記者 董捷;[N];蘇州日報;2011年

9 閆素英;[N];健康報;2006年

10 謝明霞;[N];中國醫(yī)藥報;2006年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 董怡民;納米活性炭載藥制劑的藥動學(xué)和抑瘤效應(yīng)的觀察[D];中國醫(yī)科大學(xué);2003年

2 邱銀生;喹賽多在豬體內(nèi)的藥動學(xué)和殘留研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2003年

3 寇惠娟;三種抗病毒藥物在中國艾滋病患者的臨床藥效學(xué)和藥動學(xué)研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2012年

4 莊寶雄;奧沙利鉑脂質(zhì)體的生物學(xué)研究[D];中南大學(xué);2011年

5 丁志英;穿心蓮內(nèi)酯體內(nèi)轉(zhuǎn)運與藥動學(xué)研究[D];吉林大學(xué);2009年

6 曾曉會;胡椒堿對姜黃素代謝和調(diào)脂效應(yīng)的影響[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2009年

7 許玉杰;新型紫杉醇脂質(zhì)納米粒的臨床前實驗研究[D];蘇州大學(xué);2008年

8 王春梅;甲磺酸達(dá)氟沙星明膠微球的制備及藥動學(xué)和肺靶向性研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

9 盧彤巖;達(dá)氟沙星防治史氏鱘Ah感染的應(yīng)用評價[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2005年

10 張秀英;單諾沙星在健康和支原體-大腸桿菌感染雞的藥動學(xué)與藥效學(xué)研究[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2001年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 謝毅;羥基喜樹堿磁性熱敏脂質(zhì)體腫瘤局部藥動學(xué)研究[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2012年

2 古錦輝;羥基喜樹堿磁性熱敏脂質(zhì)體的制備及藥效學(xué)評價[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2012年

3 陳召紅;鹽酸阿霉素磁性熱敏脂質(zhì)體研究[D];河北北方學(xué)院;2011年

4 陳香;靈芝酸單體T片劑的制備及其藥動學(xué)研究[D];華東理工大學(xué);2011年

5 朱昆;葛根總黃酮固體脂質(zhì)納米粒的研制[D];吉林大學(xué);2009年

6 暢敏;奧沙利鉑長循環(huán)熱敏脂質(zhì)體的研究[D];鄭州大學(xué);2010年

7 王婧;銀杏葉提取物對人體華法林藥動學(xué)和藥效學(xué)的影響[D];湖南中醫(yī)藥大學(xué);2010年

8 隋曉璠;丁香葉中丁香苦苷的藥物動力學(xué)的初步研究[D];黑龍江中醫(yī)藥大學(xué);2005年

9 杜會強(qiáng);加替沙星對多索茶堿藥動學(xué)的影響[D];鄭州大學(xué);2005年

10 劉昌發(fā);替米沙坦在健康國人體內(nèi)的藥代動力學(xué)[D];鄭州大學(xué);2005年

  本文關(guān)鍵詞：羥基喜樹堿磁性熱敏脂質(zhì)體腫瘤局部藥動學(xué)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：205870