本文關(guān)鍵詞：熒光法和分子對接研究4種黃酮與血清白蛋白的相互作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

色譜 分光光度計 光譜

第38卷2010年4月

DOI：10.3724/SP.J.1096.2010.00483

分析化學(xué)（FENXIHUAXUE）研究報告第4期483～487

ChineseJournalofAnalyticalChemistry

熒光法和分子對接研究4種黃酮與血清白蛋白的相互作用

徐倩

鄧丹丹

曹志娟

謝瓊

梁建英

盧建忠

*

（復(fù)旦大學(xué)藥學(xué)院，上海201203）

摘

要

結(jié)合分子對接理論和熒光法研究4種黃酮類天然產(chǎn)物與白蛋白的相互作用及作用機(jī)理。用FlexX

軟件研究了黃芩素、黃芩苷、漢黃芩素、燈盞乙素和白蛋白的分子對接，然后用熒光法研究這4種黃酮類天然產(chǎn)物與牛血清白蛋白的結(jié)合反應(yīng)，測定了結(jié)合常數(shù)KA、結(jié)合位點n等參數(shù)。研究表明：4種天然產(chǎn)物與牛血清白蛋白結(jié)合位點n≈1，溫度對結(jié)合位點影響不大；黃芩素和漢黃芩素主要通過疏水作用力與白蛋白結(jié)合，而黃芩苷和燈盞乙素主要通過氫鍵和范德華力與白蛋白結(jié)合。熒光實驗和分子對接理論研究結(jié)果一致，兩者相互補(bǔ)充，能夠從實驗和理論兩方面協(xié)同研究天然產(chǎn)物與蛋白之間的相互作用。關(guān)鍵詞

牛血清白蛋白；黃芩素；黃芩苷；漢黃芩素；燈盞乙素；熒光光譜法；分子對接

1引言

蛋白質(zhì)是藥物發(fā)揮藥效的重要載體和靶分子，探討具有藥理活性的天然產(chǎn)物與蛋白質(zhì)的相互作用及作用機(jī)理，對于了解藥物發(fā)揮藥效的作用機(jī)制，揭示藥物藥效的實質(zhì)內(nèi)涵具有重要意義。血清白蛋白是一種重要的蛋白質(zhì)，，能與許多內(nèi)源和外源性化合物結(jié)合，起到存儲與轉(zhuǎn)運作用。血清白蛋白有內(nèi)源性

［1］

熒光，近年來常用于研究與藥物的相互作用。楊曼曼等用熒光法研究喹諾酮類藥物與白蛋白的作用；楊冉等

用熒光法研究黃酮與溶菌酶的相互作用；畢淑云等用熒光法研究抗生素與人血清白蛋

［4］［5］

白的結(jié)合反應(yīng)；Wang等用熒光法研究橙皮苷類黃酮與牛血清白蛋白的相互作用；王敬政等用熒光

［6］

［2］

［3］

法研究中藥活性成分蘆薈大黃素與血清白蛋白的相互作用機(jī)制；薛永來等

子與腫瘤抑制蛋白的相互作用。

采用熒光法研究了金屬離

黃芩素、黃芩苷、漢黃芩素和燈盞乙素是常見的黃酮類天然產(chǎn)物，具有廣泛的藥理活性。深入研究這些黃酮類天然產(chǎn)物與牛血清白蛋白（BSA）的相互作用，對于闡述它們在體內(nèi)的運輸、分布和代謝等藥aideddrugdesign，CADD）是建立在理作用機(jī)理具有重要的意義。計算機(jī)輔助藥物分子設(shè)計（Computer-化學(xué)、生物學(xué)、數(shù)學(xué)、物理學(xué)和計算機(jī)科學(xué)基礎(chǔ)上的綜合學(xué)科，在藥物研發(fā)中起到日益重要的作用。分子

主要用于研究蛋白質(zhì)受體和藥物小分子之間通過幾何匹配和能對接技術(shù)作為一種重要的CADD手段，

量匹配從而相互識別的過程。其研究領(lǐng)域常涉及柔性受體處理、溶劑效應(yīng)、互變異構(gòu)體平衡轉(zhuǎn)換、構(gòu)造

評價函數(shù)等新問題。與其它計算機(jī)輔助藥物分子設(shè)計方法相比，分子對接技術(shù)從整體上考慮配體和受體的結(jié)合效果，能較好地避免局部作用較好、整體結(jié)合欠佳的情況，可為分子結(jié)合模式以及藥物分子結(jié)

［7］

構(gòu)改造提供重要信息。本研究采用FlexX軟件研究了黃芩素、黃芩苷、漢黃芩素和燈盞乙素與HSA之間的分子對接，以熒光光譜法研究這些天然產(chǎn)物與BSA的結(jié)合反應(yīng)，并測定了結(jié)合常數(shù)、結(jié)合位點數(shù)與結(jié)合力類型，探討了黃芩素、黃芩苷、漢黃芩素、燈盞乙素與白蛋白的作用機(jī)理。綜合而言，熒光實驗和分子對接理論研究結(jié)果一致，兩者相互補(bǔ)充，能夠協(xié)同從實驗和理論兩方面來研究天然產(chǎn)物與白蛋白之間的相互作用，對于研究藥物在體內(nèi)的運輸、分布、代謝具有重要意義。

2

2.1

實驗部分

儀器和試劑

PerkinElmerLS55熒光光度儀，實驗中采用循環(huán)水浴維持樣品溫度。天然產(chǎn)物黃芩素、黃芩苷、漢

2009-09-26收稿；2009-11-12接受

本文系國家自然科學(xué)基金（No.90409017）和上海市中藥現(xiàn)代化（No.08DZ1971201）資助項目*E-mail：jzlu@

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