大鼠血管組織血管緊張素原基因表達(dá)的實(shí)時(shí)PCR定量分析
本文選題:模擬失重 切入點(diǎn):血管 出處:《中國(guó)應(yīng)用生理學(xué)雜志》2005年02期
【摘要】:目的:探討大鼠血管組織血管緊張素原(angiotensinogen,AGT)低豐度mRNA表達(dá)的實(shí)時(shí)PCR定量分析方法,并將其用于檢測(cè)模擬失重大鼠基底和股動(dòng)脈血管組織AGTmRNA的表達(dá)。方法:提取8周模擬失重(SUS)與對(duì)照組(CON)大鼠血管組織的總RNA,進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄后,對(duì)目的基因AGT與內(nèi)參照基因GAPDH的mRNA進(jìn)行實(shí)時(shí)PCR分析。應(yīng)用TaqMan MGB探針,測(cè)出上述mRNA實(shí)時(shí)PCR反應(yīng)的放大效率(E)及閾循環(huán)數(shù)Ct,再依據(jù)一定數(shù)學(xué)模型由E與Ct得出經(jīng)GAPDH歸一化的AGTmRNA表達(dá)變化。結(jié)果:與CON相比,SUS大鼠基底動(dòng)脈組織AGTmRNA表達(dá)增加240%,而股動(dòng)脈組織則
[Abstract]:Objective: to explore a real-time PCR quantitative analysis method for the low abundance mRNA expression of angiotensin angiotensin A (AGT) in rat vascular tissue. The expression of AGTmRNA in vascular tissues of basal and femoral arteries in rats with simulated weightlessness was detected. Methods: the total RNAs in vascular tissues of rats with simulated weightlessness at 8 weeks and those in control group were extracted and reversed. The mRNA of target gene AGT and internal reference gene GAPDH were analyzed by real-time PCR. TaqMan MGB probe was used. The amplification efficiency and threshold circulatory number of the mRNA real-time PCR reaction were measured. Then, according to a certain mathematical model, the GAPDH normalized AGTmRNA expression was obtained from E and Ct. Results: compared with CON, the expression of AGTmRNA in basilar artery of rats was increased. And the femoral artery tissue
【作者單位】: 第四軍醫(yī)大學(xué)航空航天生理學(xué)教研室 第四軍醫(yī)大學(xué)基因診斷研究所 第四軍醫(yī)大學(xué)基因診斷研究所 第四軍醫(yī)大學(xué)航空航天生理學(xué)教研室
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(30171032) 全軍醫(yī)藥衛(wèi)生科研基金資助課題(01MB122)
【分類(lèi)號(hào)】:R85
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,本文編號(hào):1653129
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