本文關(guān)鍵詞：FGF2對創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙模型大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞和突觸可塑性的作用

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【摘要】：【背景】 創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙（Posttraumatic stress disorder, PTSD）是一種嚴(yán)重的災(zāi)難性事件或威脅如戰(zhàn)爭及自然災(zāi)害等所引發(fā)，其主要癥狀為反復(fù)發(fā)生的闖入性記憶再體驗、回避及持續(xù)的警覺性增高癥候群。前期許多研究表明，星形膠質(zhì)細(xì)胞在病理性心境障礙的發(fā)病中發(fā)揮重要作用，目前對于星形膠質(zhì)細(xì)胞是否參與PTSD發(fā)病的機(jī)制仍然不清楚，還有很多問題亟待解決。最新文獻(xiàn)報道FGF2可以作為一種新型的抗焦慮分子，其對PTSD是否具有治療作用目前尚無報道。 【目的】 本研究使用SPS作為PTSD的大鼠動物模型，綜合利用神經(jīng)行為學(xué)、分子神經(jīng)生物學(xué)和形態(tài)學(xué)等方法，研究了星形膠質(zhì)細(xì)胞如何參與PTSD的發(fā)病機(jī)制以及FGF2對PTSD海馬區(qū)突觸可塑性的調(diào)控作用及可能的治療機(jī)制。 【方法】 （1）本實驗采用單次延長應(yīng)激（Single-prolonged stress，SPS）建立大鼠PTSD模型；（2）運(yùn)用曠場實驗和高架十字實驗檢測SPS大鼠焦慮行為；（3）利用GFAP蛋白表達(dá)作為星形膠質(zhì)細(xì)胞活化的指標(biāo)，采用免疫熒光組織化學(xué)方法觀察海馬區(qū)和前扣帶回（Anterior cingulated cortex, ACC）中星形膠質(zhì)細(xì)胞GFAP和神經(jīng)元標(biāo)記物NeuN的表達(dá)變化；（4）采用雙重?zé)晒釽estern blot方法觀察海馬區(qū)和前扣帶回星形膠質(zhì)細(xì)胞GFAP和神經(jīng)元標(biāo)記物NeuN的表達(dá)變化；（5）采用Morris水迷宮實驗檢測SPS大鼠及FGF2給藥后學(xué)習(xí)記憶能力變化；（6）采用條件性恐懼實驗檢測SPS大鼠恐懼記憶的改變情況；（7）采用國際先進(jìn)的靜態(tài)場結(jié)構(gòu)照明光明視野顯微拍攝技術(shù)和三維立體高爾基成像分析技術(shù)觀察分析了SPS大鼠及FGF2給藥后神經(jīng)元樹突分布及其具體變化；（8）采用DiI染色技術(shù)觀察SPS大鼠及FGF2給藥后樹突棘的形態(tài)，使用三維立體技術(shù)分析樹突棘密度及相關(guān)參數(shù)的變化；（9）采用ELISA方法分析了SPS大鼠及FGF2給藥后血清中FGF2、皮質(zhì)酮、BDNF、5-HT、DA和NE的含量變化。 【結(jié)果】 （1）行為學(xué)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，SPS大鼠在造模第7天后出現(xiàn)明顯的焦慮樣行為，而且此時大鼠產(chǎn)生明顯條件性恐懼反應(yīng)以及明顯的學(xué)習(xí)記憶功能障礙；（2）海馬區(qū)域和前扣帶回皮質(zhì)（ACC）均觀察到星形膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)記物GFAP含量明顯下調(diào)，而神經(jīng)元標(biāo)記物NeuN的表達(dá)含量無明顯變化；（3）SPS大鼠血清中FGF2、皮質(zhì)酮、BDNF、5-HT、DA和NE的含量比對照組明顯減少，而FGF2給藥后發(fā)現(xiàn)這些分子在血清的含量明顯上升（4）腹腔注射FGF2可明顯減輕SPS大鼠的焦慮情緒及條件恐懼反應(yīng)，而且增強(qiáng)了SPS大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力；（5）SPS大鼠在第7天出現(xiàn)樹突分支、平均長度和直徑明顯比對照組減少，而且樹突棘密度明顯減少，平均樹突棘的面積和體積也明顯減少,而FGF2給藥后發(fā)現(xiàn)其能逆轉(zhuǎn)上述樹突萎縮的現(xiàn)象，并且樹突棘的密度較SPS組明顯升高，，與正常組海馬區(qū)樹突棘密度無明顯差異；（6）腹腔給予FGF2可明顯提高海馬及ACC區(qū)域星形膠質(zhì)細(xì)胞的活性。 【結(jié)論】 （1）SPS后，海馬及ACC區(qū)星形膠質(zhì)細(xì)胞GFAP的表達(dá)變化與PTSD發(fā)病密切相關(guān)。 （2）FGF2高劑量腹腔給藥后明顯減輕SPS大鼠的焦慮以及條件性恐懼行為，且通過增強(qiáng)海馬星形膠質(zhì)細(xì)胞GFAP的表達(dá)的途徑來實現(xiàn)，而不是神經(jīng)元途徑。FGF2可能成為一種新型的治療PTSD的藥物。 （3）SPS組動物出現(xiàn)明顯的焦慮癥狀，伴隨血清中多種分子如皮質(zhì)酮、BDNF、FGF2、5-HT的含量明顯減少，說明PTSD出現(xiàn)的焦慮情緒可能與這些分子的含量減低有關(guān)。 （4）SPS動物海馬區(qū)的樹突萎縮及樹突棘的密度減低，可能與創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙導(dǎo)致的學(xué)習(xí)記憶能力下降明顯相關(guān)。而FGF2外周注射能明顯改善PTSD的癥狀，與其改變突觸可塑性的作用是明顯相關(guān)的。
【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R85

【參考文獻(xiàn)】

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1 劉俊麗;夏亮;王莉穎;田菲;翟明珠;魯亞成;李云慶;朱霞;王文;;單次延長應(yīng)激導(dǎo)致的創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙行為伴隨乳頭體神經(jīng)元活化[J];神經(jīng)解剖學(xué)雜志;2012年04期

本文編號：1302921