本文關(guān)鍵詞：模擬微重力對(duì)人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的影響

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【摘要】：目的探討模擬微重力對(duì)人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞(HPMEC)凋亡的誘導(dǎo)作用。方法采用回轉(zhuǎn)器模擬微重力環(huán)境,將HPMEC分為回轉(zhuǎn)48h組和1g同步對(duì)照組。將盛有回轉(zhuǎn)48h組細(xì)胞的培養(yǎng)瓶排除氣泡后放入細(xì)胞回轉(zhuǎn)器,調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速為30r/min,37℃回轉(zhuǎn)培養(yǎng);1g同步對(duì)照組細(xì)胞靜置培養(yǎng)相同時(shí)間。培養(yǎng)48h后收集兩組細(xì)胞進(jìn)行后續(xù)檢測(cè)。在透射電鏡下觀察細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的變化;采用AnnexinV標(biāo)記的異硫氰酸熒光素(AnnexinV-FITC)對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色,在流式細(xì)胞儀上檢測(cè)細(xì)胞凋亡率;采用FITC標(biāo)記的鬼筆環(huán)肽(FITC-phalloidin)對(duì)纖維狀肌動(dòng)蛋白(F-action)進(jìn)行標(biāo)記,在激光共聚焦顯微鏡下觀察細(xì)胞內(nèi)F-actin的變化。結(jié)果透射電鏡下可見(jiàn),回轉(zhuǎn)48h組HPMEC呈典型凋亡改變,染色質(zhì)固縮凝結(jié)、邊聚于核膜處,細(xì)胞器破壞并可見(jiàn)凋亡小體。流式細(xì)胞儀檢測(cè)可見(jiàn),回轉(zhuǎn)48h組HPMEC的凋亡率(4.04%±0.32%)高于1g同步對(duì)照組(1.68%±0.51%,P0.01)。激光共聚顯微鏡下可見(jiàn),1g同步對(duì)照組HPMEC內(nèi)F-actin表達(dá)豐富,呈束狀,位于胞質(zhì)內(nèi);回轉(zhuǎn)48h組HPMEC的胞質(zhì)內(nèi)F-actin的表達(dá)明顯減少,分布不均,排列紊亂,且細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)濃縮凝聚。結(jié)論模擬微重力可誘導(dǎo)HPMEC發(fā)生凋亡,細(xì)胞骨架的破壞可能是模擬微重力誘導(dǎo)其發(fā)生凋亡的機(jī)制之一。
【作者單位】： 解放軍總醫(yī)院南樓呼吸科;中國(guó)航天員科研訓(xùn)練中心航天醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)與應(yīng)用國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：軍隊(duì)醫(yī)藥衛(wèi)生“十一五”計(jì)劃專(zhuān)項(xiàng)滾動(dòng)課題(06Z048) 武器裝備預(yù)研基金(9140A1704009JB1002) 民用航天科研預(yù)先研究項(xiàng)目(科工技[2007]302) 國(guó)家高技術(shù)研究發(fā)展計(jì)劃(2008AA12A220)
【分類(lèi)號(hào)】：R852.22
【正文快照】： 現(xiàn)有研究表明,失重或模擬微重力條件可對(duì)肺組織造成一定程度的損傷[1-2],其機(jī)制與肺微血管通透性增加有關(guān)[3],但導(dǎo)致其通透性增加的機(jī)制尚不明確。黏附連接使微血管內(nèi)皮細(xì)胞緊密相連,構(gòu)成微血管通透性的主要物理屏障,當(dāng)內(nèi)皮細(xì)胞連接處開(kāi)放,結(jié)構(gòu)松散,可使得屏障通透性異常增加

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本文編號(hào)：1180076