本文關(guān)鍵詞：三維回轉(zhuǎn)骨細胞條件培養(yǎng)基對成骨細胞功能的調(diào)節(jié)作用

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【摘要】：骨細胞是骨組織中主要的力學(xué)感受器.研究失重條件下骨細胞對效應(yīng)細胞的調(diào)控作用對于揭示失重引起的骨丟失機制具有重要意義.本研究擬采用三維回轉(zhuǎn)器模擬失重,探討模擬失重骨細胞條件培養(yǎng)基(RCM)對成骨功能的調(diào)節(jié)作用.小鼠骨細胞系MLO-Y4三維回轉(zhuǎn)培養(yǎng)72h后,收集回轉(zhuǎn)條件培養(yǎng)基(RCM)和未回轉(zhuǎn)對照組的條件培養(yǎng)基(CCM),用四甲基偶氮唑鹽比色(MTT)法、對硝基苯磷酸(pNPP)法和流式細胞術(shù)(FCM)分別檢測RCM對小鼠成骨樣細胞系MC3T3-E1增殖、周期及細胞分泌堿性磷酸酶(ALP)活性的影響.采用RT-PCR方法檢測RCM對MC3T3-E1成骨相關(guān)基因表達的影響.結(jié)果顯示,三維隨機回轉(zhuǎn)72h后的MLO-Y4RCM可促進MC3T3-E1增殖:條件培養(yǎng)基培養(yǎng)MC3T3-E124h和48h后,50%RCM組比CCM組分別增加了1.62和1.60倍,差異顯著(*P0.05),培養(yǎng)72h后,100%RCM組比CCM組增加了1.69倍,差異顯著(*P0.05);細胞周期檢測結(jié)果表明,條件培養(yǎng)基培養(yǎng)24、48和72h后,RCM組部分恢復(fù)CCM引起的MC3T3-E1細胞周期阻滯;MC3T3-E1的ALP活性在RCM組和CCM組之間無差異;RT-PCR檢測結(jié)果表明,100%MLO-Y4條件培養(yǎng)基培養(yǎng)MC3T3-E148h后,降低了成骨相關(guān)基因ALP、Runx2、OPN、OC的表達.差異顯著(*P0.05,**P0.01,***P0.001).實驗結(jié)果表明,三維隨機回轉(zhuǎn)模擬失重培養(yǎng)骨細胞72h后的條件培養(yǎng)基促進了成骨細胞增殖,抑制了成骨相關(guān)基因表達.
【作者單位】： 空間生物實驗?zāi)M技術(shù)重點實驗室西北工業(yè)大學(xué)特殊環(huán)境生物物理學(xué)研究所 西北工業(yè)大學(xué)生命科學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 骨細胞條件培養(yǎng)基 成骨細胞 三維回轉(zhuǎn) 成骨功能
【基金】：國家自然科學(xué)基金面上項目(No.30970689)~~
【分類號】：R85
【正文快照】： 空間失重引起的骨丟失是航天員長期空間飛行面臨的最主要的健康威脅之一.已有研究[1,2]表明,空間失重性骨丟失主要是由于成骨細胞功能下降引起骨形成減少所致.骨重建是一個多細胞之間相互協(xié)調(diào)以維持骨的正常形態(tài)和功能的動態(tài)過程,其中骨細胞在調(diào)節(jié)骨重建中起了關(guān)鍵作用[3].骨

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本文編號：1066094