本文關(guān)鍵詞：低劑量輻射對多柔比星所致小鼠心肌細胞線粒體損傷的保護作用及機制研究

  更多相關(guān)文章： 低劑量輻射 多柔比星 心臟毒性 線粒體損傷 預適應

【摘要】：研究背景及目的:多柔比星(DOX)屬于蒽環(huán)類抗生素,因其抗腫瘤作用強、抗瘤譜廣,已成為臨床上多種惡性腫瘤的核心化療藥物。但由于其嚴重的心臟毒性限制了該藥的臨床應用。如何在抗腫瘤的同時預防或降低DOX的心臟毒性是目前國內(nèi)外臨床工作的研究熱點。有研究報道,低劑量輻射(LDR)對正常組織及器官(肺、腎臟、骨關(guān)節(jié)、神經(jīng)和肌肉等)產(chǎn)生的興奮效應和適應性反應,可能對機體后續(xù)的放化療損傷具有一定的保護作用。但對于心肌細胞的保護作用及相關(guān)機制的研究國內(nèi)外少有報道。本項目組前期研究發(fā)現(xiàn),LDR可通過誘導細胞的預適應對抗后續(xù)DOX引起的心肌細胞損傷。其機制可能是LDR預處理可對抗DOX誘導的氧化應激損傷,保護線粒體功能,抑制線粒體依賴的細胞凋亡信號傳導,減少DOX的心肌細胞凋亡。本研究旨在前期工作的基礎(chǔ)上,通過觀察LDR對DOX所致心肌線粒體形態(tài)學的改變,分析研究線粒體相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄、蛋白表達、復合體(Complex)活性及ATP含量,探討LDR對DOX所致心肌損傷保護作用及分子機制,為LDR用于腫瘤治療提供理論及實驗依據(jù)。實驗材料及方法選取8周齡雌性Balb/c小鼠40只,分為四組:Control組(0m Gy)、DOX組、LDR組(75m Gy)及LDR-72h-DOX組(LDR照射72h后予以DOX腹腔注射)。電鏡觀察各組小鼠心肌的線粒體形態(tài);全基因組表達譜芯片技術(shù)分析心肌細胞全基因簇差異表達情況;q PCR array檢測技術(shù)分析線粒體相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄水平;Western Blot法研究線粒體復合體相關(guān)蛋白表達的變化;復合體和ATP檢測試劑盒檢測線粒體復合體活性及ATP含量。實驗結(jié)果:電鏡結(jié)果顯示,DOX組小鼠心肌組織肌絲紊亂,線粒體腫脹,線粒體嵴減少甚至消失;予以LDR預處理后,小鼠心肌線粒體損傷程度有所減輕。全基因組表達譜芯片技術(shù)結(jié)果提示,DOX對心肌細胞基因差異表達,其中線粒體相關(guān)基因差異表達較為明顯。q PCR array結(jié)果顯示,DOX組多個(Atp P6v0d2、Co X8c等)線粒體相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄水平下調(diào);LDR預處理可上調(diào)多個(Atp6v0d2、Atp4a、Atp6v1c2、Atp6v1e2、Atp6v1g3、Cox5b、Cox7a2、Cox8c等)線粒體相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄水平。Western Blot結(jié)果提示,DOX組線粒體復合體相關(guān)蛋白表達下調(diào);LDR預處理后,線粒體復合體相關(guān)蛋白表達上調(diào)。復合體及ATP檢測結(jié)果提示,DOX組線粒體復合體活性減弱,ATP含量減少;而LDR預處理后線粒體復合體的活性有所增強,ATP含量明顯增加。結(jié)論:LDR可通過誘導細胞的預適應對抗后續(xù)DOX引起的心肌細胞線粒體損傷。其機制可能是LDR預處理可影響線粒體相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄及相關(guān)蛋白的表達,提高線粒體復合體活性,增加線粒體ATP含量,改善線粒體功能。LDR有望成為DOX抗腫瘤治療過程中心肌保護的一個輔助治療手段。
【關(guān)鍵詞】：低劑量輻射 多柔比星 心臟毒性 線粒體損傷 預適應
【學位授予單位】：吉林大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R818
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-8
• 英文縮略詞表8-11
• 第1章 緒論11-12
• 第2章 文獻綜述12-19
• 2.1 DOX的心臟毒性12-17
• 2.1.1 心臟毒性的臨床表現(xiàn)12-13
• 2.1.2 心臟毒性的危險因素13
• 2.1.3 心臟毒性機制13-16
• 2.1.4 DOX心臟毒性的防治對策16-17
• 2.2 低劑量輻射的生物學效應17-18
• 2.3 小結(jié)18-19
• 第3章 材料與方法19-31
• 3.1 實驗材料19-20
• 3.1.1 實驗動物19
• 3.1.2 實驗器材19-20
• 3.1.3 主要試劑20
• 3.2 實驗方法20-30
• 3.2.1 實驗動物分組與處理20
• 3.2.2 電鏡觀察線粒體形態(tài)20-21
• 3.2.3 心肌細胞全基因簇轉(zhuǎn)錄水平的檢測（全基因組表達譜芯片）21-23
• 3.2.4 線粒體PCR array檢測23-24
• 3.2.5 心肌組織線粒體分離24
• 3.2.6 線粒體復合體相關(guān)蛋白表達水平的檢測（Western blot）24-26
• 3.2.7 線粒體復合體活性的檢測26-29
• 3.2.8 心肌組織線粒體ATP含量的檢測29-30
• 3.3 統(tǒng)計分析30-31
• 第4章 實驗結(jié)果31-44
• 4.1 各實驗組小鼠心肌組織電鏡結(jié)果31-32
• 4.2 各實驗組小鼠全基因組表達譜芯片分析結(jié)果32-39
• 4.3 各實驗組小鼠qPCR array分析結(jié)果39-40
• 4.4 各實驗組小鼠western blot檢測結(jié)果40-41
• 4.5 各實驗組小鼠心肌細胞線粒體復合體活性檢測結(jié)果41-43
• 4.6 各實驗組小鼠心肌細胞線粒體ATP含量檢測結(jié)果43-44
• 第5章 討論44-47
• 結(jié)論47-48
• 參考文獻48-55
• 作者簡介及在學期間科研成果55-56
• 致謝56

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

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本文編號：979682