本文關(guān)鍵詞：低氧對肌腱細胞增殖的影響及其機制的初探

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【摘要】：[目的]肌腱細胞是一種用于構(gòu)建組織工程化肌腱的種子細胞,其構(gòu)建的肌腱在形態(tài)、結(jié)構(gòu)、功能等方面與正常肌腱更加相近。但是由于供區(qū)的取材面積較小、肌腱細胞增殖相對緩慢、隨代次增加細胞表型功能逐漸喪失等原因,使得分離擴增得到的肌腱細胞在數(shù)量和質(zhì)量上無法良好地滿足構(gòu)建肌腱的需要。有研究表明低氧可以明顯促進細胞增殖,因此,本研究擬使用不同的低氧濃度(2%02,5%02,10%02)培養(yǎng)肌腱細胞,從而發(fā)現(xiàn)更適宜肌腱細胞增殖的氧濃度：同時還對這些氧濃度培養(yǎng)的肌腱細胞進行凋亡和細胞周期檢測,以初步探索低氧促進肌腱細胞增殖是否與調(diào)控細胞凋亡或細胞周期有關(guān)。在此基礎(chǔ)上,本研究還檢測了低氧濃度培養(yǎng)的肌腱細胞內(nèi)乳酸含量,并將肌腱細胞置于含有乳酸的培養(yǎng)液中在常規(guī)氧濃度下進行培養(yǎng),以觀察不同濃度的乳酸對肌腱細胞增殖的影響,驗證低氧是否可能通過介導乳酸產(chǎn)生從而促進細胞增殖,為今后研究低氧促進細胞增殖的分子機制打下基礎(chǔ)。[方法]1.取2%02、5%02、10%02(實驗組)和21%02(對照組)培養(yǎng)條件下的P1肌腱細胞接種96孔板,接種后培養(yǎng)8天,每天采用CCK8法檢測上述氧濃度對P2肌腱細胞增殖的影響。2.將上述氧濃度培養(yǎng)條件下的P2進行Annexin V FITC/PI雙標法染色,以檢測P2肌腱細胞凋亡情況。3.對上述氧濃度培養(yǎng)條件下的P2進行DAPI染色,以檢測肌腱細胞的細胞周期。4.取21%02培養(yǎng)條件下的P2肌腱細胞接種96孔板,添加不同濃度乳酸(5mmol/L、10mmol/L、15mmoUL、20mmol/L、25mmol/L)并培養(yǎng)7天,每天采用CCK8法檢測不同濃度乳酸對P2肌腱細胞增殖的影響。[結(jié)果]1.與21%02相比,2%02、5%02能促進P2肌腱細胞增殖,但是10%O2對P2肌腱細胞增殖能力的影響不顯著。2.2%O2、5%O2、10%O2、21%O2對P2肌腱細胞的細胞凋亡的影響無顯著差異。3.2%O2、5%O2、0%O2、21%O2對P2肌腱細胞的細胞周期的影響無顯著差異。4.與不添加乳酸相比,添加5-25mmol/L的L型乳酸對P3肌腱細胞增殖有輕微抑制作用,但該作用無統(tǒng)計學差異。[結(jié)論]在2%02-10%02范圍內(nèi),P2肌腱細胞的增殖能力會隨著氧濃度的降低而有所增強,即2%02是最利于肌腱細胞增殖的氧濃度。但是低氧促進肌腱細胞增殖并非通過調(diào)控細胞凋亡、細胞周期進行。無氧代謝產(chǎn)物L型乳酸對肌腱細胞增殖并無促進作用。
【關(guān)鍵詞】：低氧 肌腱細胞 體外擴增 細胞凋亡 細胞周期 乳酸
【學位授予單位】：昆明醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R873
【目錄】：

• 縮略詞表(以字母順序排列)6-7
• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-11
• 1 前言11-14
• 2 不同氧濃度對肌腱細胞體外培養(yǎng)的影響14-32
• 2.1 材料和方法14-18
• 2.2 結(jié)果18-27
• 2.2.1 不同氧濃度對肌腱細胞形態(tài)的影響18-20
• 2.2.2 不同氧濃度對P_2肌腱細胞增殖的影響20-23
• 2.2.3 不同氧濃度對P_2肌腱細胞凋亡的影響23-26
• 2.2.4 不同氧濃度對P_2肌腱細胞周期的影響26-27
• 2.3 結(jié)果討論與分析27-32
• 3 不同濃度乳酸對肌腱細胞增殖的影響32-40
• 3.1 材料與方法32-35
• 3.2 結(jié)果35-37
• 3.2.1 2%O_2培養(yǎng)的P_2肌腱細胞內(nèi)的乳酸含量35
• 3.2.2 不同濃度乳酸對常規(guī)氧濃度(21%O_2)培養(yǎng)的P_3肌腱細胞增殖的影響35-37
• 3.3 結(jié)果討論與分析37-40
• 4 參考文獻40-46
• 全文總結(jié)46-47
• 附錄47-48
• 綜述48-65
• 參考文獻(References)59-65
• 攻讀學位期間獲得的學術(shù)成果65-66
• 致謝66

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1 許銀峰;胡軍;肖良寶;易建華;江麗;劉小林;;去細胞與冷凍干燥人體肌腱特性的對比研究[J];中國矯形外科雜志;2013年23期

2 項舟,楊志明,黃富國,李濤,彭文珍;肌腱細胞體外轉(zhuǎn)化的實驗研究[J];現(xiàn)代康復(fù);2000年08期

3 張發(fā)惠,鄭和平,張朝春,陳日齊;冷凍溫度對大鼠肌腱超微結(jié)構(gòu)及力學性能的影響[J];解剖學雜志;2004年06期

4 胡成棟;張伯勛;魏民;陳華;郭義柱;黃靖香;趙斌;;雞肌腱的玻璃化冷凍保存[J];中國臨床康復(fù);2006年25期

5 宋德業(yè);倪江東;;堿性成纖維細胞生長因子在肌腱細胞增殖中的作用[J];醫(yī)學臨床研究;2007年08期

6 曹洪輝;唐康來;陳磊;常廷杰;董世武;鄭紅;陳前博;陶旭;James H-C Wang;;新型肌腱細胞循環(huán)牽伸載荷系統(tǒng)的研制及運行效果觀察[J];第三軍醫(yī)大學學報;2010年06期

7 韓冰;宋一平;王和洪;陳爍;童訊;趙日光;孫q諮，

本文編號：901536