本文關(guān)鍵詞：雙內(nèi)參基因用于大鼠挫傷肌肉TAB2 mRNA表達量檢測

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【摘要】：目的比較和分析Rpl32和Rpl13作為單內(nèi)參基因與兩者作為雙內(nèi)參基因,用于檢測大鼠挫傷肌肉組織中TAB2 m RNA表達量的結(jié)果。方法 78只SD大鼠,隨機分為正常對照組(1組)和肌肉損傷組(12組)。采用自由落體法制作大鼠肌肉挫傷模型,分別于4h~48h之間12個時間點取肌肉組織,提取總RNA、合成c DNA、采用real-time q PCR法,以Rpl32和Rpl13作為單獨內(nèi)參基因和二者作為雙內(nèi)參基因檢測大鼠肌肉挫傷組織中TAB2 m RNA相對表達量,并計算檢測結(jié)果的變異系數(shù)。結(jié)果以Rpl32或Rpl13單獨作為內(nèi)參基因或作為雙內(nèi)參基因,TAB2 m RNA表達隨損傷時間總體均呈現(xiàn)降低的變化規(guī)律,但使用單內(nèi)參基因在24h和32h出現(xiàn)極高值,而用雙內(nèi)參基因計算未出現(xiàn)極值,且各結(jié)果的變異系數(shù)均較小。結(jié)論 Rpl32和Rpl13作為雙內(nèi)參基因用于計算TAB2 m RNA相對表達量,可提高分析結(jié)果的準確性,在相關(guān)實驗中建議選擇使用。
【作者單位】： 山西醫(yī)科大學(xué)法醫(yī)學(xué)院;朔州市公安局朔城分局;
【關(guān)鍵詞】： 法醫(yī)病理學(xué) 損傷時間推斷 TAB mRNA 內(nèi)參基因 real-time qPCR
【基金】：國家自然基金委面上基金資助項目(8157185 2) 山西省青年科技研究基金(2015021179)
【分類號】：D919
【正文快照】： RT-q PCR(real-time q PCR)技術(shù)因其檢測靈敏度高和商業(yè)化的優(yōu)勢,對法醫(yī)學(xué)實踐尤為重要。利用RT-q PCR進行基因表達分析時一般使用相對定量分析法,以去除不同樣本在RNA產(chǎn)量、質(zhì)量和反轉(zhuǎn)錄效率上可能存在的差別。實驗中需要選擇內(nèi)參基因(reference gene)對數(shù)據(jù)進行校正[1-2]。

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本文編號：881620