本文關(guān)鍵詞：雙內(nèi)參基因用于大鼠挫傷肌肉TAB2 mRNA表達(dá)量檢測(cè)

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【摘要】：目的比較和分析Rpl32和Rpl13作為單內(nèi)參基因與兩者作為雙內(nèi)參基因,用于檢測(cè)大鼠挫傷肌肉組織中TAB2 m RNA表達(dá)量的結(jié)果。方法 78只SD大鼠,隨機(jī)分為正常對(duì)照組(1組)和肌肉損傷組(12組)。采用自由落體法制作大鼠肌肉挫傷模型,分別于4h~48h之間12個(gè)時(shí)間點(diǎn)取肌肉組織,提取總RNA、合成c DNA、采用real-time q PCR法,以Rpl32和Rpl13作為單獨(dú)內(nèi)參基因和二者作為雙內(nèi)參基因檢測(cè)大鼠肌肉挫傷組織中TAB2 m RNA相對(duì)表達(dá)量,并計(jì)算檢測(cè)結(jié)果的變異系數(shù)。結(jié)果以Rpl32或Rpl13單獨(dú)作為內(nèi)參基因或作為雙內(nèi)參基因,TAB2 m RNA表達(dá)隨損傷時(shí)間總體均呈現(xiàn)降低的變化規(guī)律,但使用單內(nèi)參基因在24h和32h出現(xiàn)極高值,而用雙內(nèi)參基因計(jì)算未出現(xiàn)極值,且各結(jié)果的變異系數(shù)均較小。結(jié)論 Rpl32和Rpl13作為雙內(nèi)參基因用于計(jì)算TAB2 m RNA相對(duì)表達(dá)量,可提高分析結(jié)果的準(zhǔn)確性,在相關(guān)實(shí)驗(yàn)中建議選擇使用。
【作者單位】： 山西醫(yī)科大學(xué)法醫(yī)學(xué)院;朔州市公安局朔城分局;
【關(guān)鍵詞】： 法醫(yī)病理學(xué) 損傷時(shí)間推斷 TAB mRNA 內(nèi)參基因 real-time qPCR
【基金】：國(guó)家自然基金委面上基金資助項(xiàng)目(8157185 2) 山西省青年科技研究基金(2015021179)
【分類號(hào)】：D919
【正文快照】： RT-q PCR(real-time q PCR)技術(shù)因其檢測(cè)靈敏度高和商業(yè)化的優(yōu)勢(shì),對(duì)法醫(yī)學(xué)實(shí)踐尤為重要。利用RT-q PCR進(jìn)行基因表達(dá)分析時(shí)一般使用相對(duì)定量分析法,以去除不同樣本在RNA產(chǎn)量、質(zhì)量和反轉(zhuǎn)錄效率上可能存在的差別。實(shí)驗(yàn)中需要選擇內(nèi)參基因(reference gene)對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行校正[1-2]。

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【共引文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

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