本文關(guān)鍵詞：模擬微重力影響人牙髓干細胞的礦化能力與RhoA-Rho激酶信號通路相關(guān)性研究

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【摘要】：目的初步研究Rho A-Rho激酶信號通路在模擬微重力(Simulated Microgravity,SMG)影響人牙髓干細胞(human dental pulp stem cells,h DPSCs)礦化過程中的作用。方法將經(jīng)酶消化法分離、純化后的人牙髓干細胞體外擴增培養(yǎng),以1×106細胞接種于PLGA支架上,分別于模擬微重力下及普通重力下礦化誘導(dǎo)液中培養(yǎng),72 h后收集細胞,采用Western Blot檢測Rho A蛋白表達;此外,在重力條件下采用Rho激酶抑制劑Y-27632,以礦化誘導(dǎo)液培養(yǎng)組作為對照組,檢測礦化誘導(dǎo)3、5、7、10d兩組堿性磷酸酶(Alkaline phosphatase,AKP)活性變化,采用Western Blot檢測礦化誘導(dǎo)10 d,成牙本質(zhì)相關(guān)蛋白牙本質(zhì)基質(zhì)蛋白(dentin matrix protein-1,DMP-1)、牙本質(zhì)涎蛋白(dentin sialoprotein,DSP)、牙本質(zhì)涎磷蛋白(dentin sialophosphoprotein,DSPP)的表達,采用茜素紅染色法檢測礦化誘導(dǎo)21 d,礦化結(jié)節(jié)形成水平。結(jié)果模擬微重力下,人牙髓干細胞中Rho A蛋白的表達下調(diào);在普通重力礦化誘導(dǎo)條件下,加入抑制劑Y-27632后,各時間點細胞AKP表達水平均較對照組有所降低;礦化誘導(dǎo)10 d,成牙本質(zhì)相關(guān)蛋白DSP、DSPP、DMP-1表達明顯下調(diào),礦化誘導(dǎo)21 d,礦化結(jié)節(jié)形成同樣有所減少。結(jié)論模擬微重力下,Rho A蛋白表達水平下調(diào);抑制Rho激酶的表達,可降低h DPSCs礦化能力,提示Rho A-Rho激酶信號通路可能參與模擬微重力對h DPSCs礦化能力的影響。
【作者單位】： 哈爾濱醫(yī)科大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院牙體牙髓科;
【關(guān)鍵詞】： 人牙髓干細胞 模擬微重力 RhoA-Rho激酶信號通路 礦化
【基金】：黑龍江省教育廳科學(xué)技術(shù)研究項目(12531234)
【分類號】：R852.22
【正文快照】： Stomatology,2016,36(5):399-402作者單位:哈爾濱醫(yī)科大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院牙體牙髓科,黑龍江哈爾濱(150001)隨著對空間生命科學(xué)認識的不斷加深,微重力環(huán)境對機體的影響研究已深入到細胞、分子水平,由于其能彌補常規(guī)重力條件下細胞無法實現(xiàn)真正意義的三維組織重建等優(yōu)勢,備受各國學(xué)

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本文編號：873078