本文關(guān)鍵詞：慢性間歇性低壓低氧減輕大鼠放射性心臟損傷的機制研究

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【摘要】：目的:建立動物實驗?zāi)Ｐ陀^察放射性心臟損傷(radiation induced heart damage,RIHD)的早期表現(xiàn)及其發(fā)生機制,以及慢性間歇性低壓低氧(chronic intermittent hypobaric hypoxia,CIHH)對其影響和作用機制。方法:成年雄性Sprague-Dawlay(SD)大鼠48只隨機分為四組(n=12):空白對照組、單純慢性間歇性低壓低氧組、單純照射組和慢性間歇性低壓低氧+照射組。1照射處理:直線加速器下給予大鼠心前區(qū)局部6 MV-X線照射,射野2.0 x 2.0 cm,深度1.5 cm,照射劑量為單次20.0 Gy,劑量率1.8 Gy/min;2 CIHH處理:動物在接受照射前置于低壓氧倉,模擬海拔5000米高原(PB=404 mm Hg,PO2=84 mm Hg,6小時/天,28天)低壓低氧預(yù)處理。3心功能評定:應(yīng)用Langendroff離體心臟灌流技術(shù)檢測大鼠左心室功能,給予30分鐘全心缺血和120分鐘再灌注處理,連續(xù)記錄左室發(fā)展壓(left ventricular developing pressure,LVDP)、左室舒張末壓(left ventricular end-diastolic pressure,LVEDP)、左室壓力上升和下降的最大變化速率(maximal differentials of left ventricular pressure,±LVdp/dtmax)和冠狀動脈流量(coronary flow,CF)等心功能參數(shù),實驗結(jié)束后心臟立即置于-20℃保存,24小時后2,3,5-氯化三苯基四氮唑(2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride,TTC)染色測定其心梗面積。4形態(tài)學(xué)觀察:蘇木精-伊紅(Hematoxylin-eosin,HE)染色后觀察心肌細(xì)胞及細(xì)胞間質(zhì)形態(tài)學(xué)改變。Masson染色后觀察膠原纖維分布情況并定量分析。5生物化學(xué)檢測:Western blot法檢測纖維化標(biāo)志物Ⅰ型膠原(Collagen TypeⅠ,COL-1),內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白GRP78和CHOP的表達情況。酶聯(lián)免疫吸附法(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)檢測心肌組織勻漿總超氧化物歧化酶(total superoxide dismutase,T-SOD)活力和脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物丙二醛(mylondialdehyde,MDA)含量。結(jié)果:1心功能實驗結(jié)果:基礎(chǔ)狀態(tài)下,放射線引起大鼠CF下降(12.56±0.52ml/min vs 8.90±0.81ml/min,P0.01),照射前給予CIHH預(yù)處理可抑制照射引起的CF減少(12.96±1.26 ml/min vs 8.90±0.81 ml/min,P0.01),其余心功能參數(shù)與對照組大鼠比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(均為P0.05)。缺血/再灌注處理導(dǎo)致大鼠心功能受損,根據(jù)LVDP,±LVdp/dtmax和LVEDP參數(shù)的改變,照射組大鼠缺血/再灌注后心功能恢復(fù)程度較對照組減弱,CIHH預(yù)處理在一定程度上改善放射線所致的大鼠心功能損傷。此外放射線引起缺血/再灌注后心臟的心肌梗死面積增大(P0.01),CIHH預(yù)處理再照射可減小心肌梗死面積(P0.05)。2形態(tài)學(xué)結(jié)果:(1)石蠟切片HE染色:照射組較對照組心肌細(xì)胞明顯變性;心肌細(xì)胞核輕度固縮;心肌間質(zhì)較多炎性細(xì)胞滲出。CIHH預(yù)處理后再照射改善了上述損傷變化。(2)Masson染色及定量分析:Masson染色,所有膠原纖維被染為綠色,膠原纖維主要見于小血管周圍及心肌細(xì)胞間質(zhì)。定量分析結(jié)果顯示照射組心肌膠原容積分?jǐn)?shù)(collagen volume fraction,CVF)明顯高于對照組(P0.05);CIHH預(yù)處理后再照射較單純照射組CVF下降(P0.05)。3 ELISA和Western blot結(jié)果:(1)心肌組織T-SOD活力和MDA濃度:ELISA法檢測結(jié)果顯示,照射組T-SOD活力和MDA濃度較對照組均升高(二者均P0.05);CIHH+照射組T-SOD活力較照射組明顯升高(P0.05),MDA濃度較照射組下降(P0.05);(2)心肌組織GRP78和CHOP的蛋白定量結(jié)果:Western blot顯示照射組與對照組比較,GRP78和CHOP蛋白水平均升高(二者均P0.05),CIHH+照射組與照射組比較,GRP78和CHOP蛋白水平均降低,(二者均為P0.05)。(3)心肌組織COL-1蛋白定量結(jié)果:Western blot結(jié)果顯示照射組與對照組比較,COL-1表達水平升高(P0.05),CIHH+照射組與照射組比較,COL-1表達水平降低(P0.05)。結(jié)論:1放射線照射引起大鼠心臟冠狀動脈損傷,雖然并未影響心臟的基礎(chǔ)功能,但是降低了心臟對缺血/再灌注損傷的耐受性,增加了缺血/再灌注后心肌梗死面積。2放射性心臟損傷急性期組織病理學(xué)表現(xiàn)為心肌細(xì)胞變性,心肌間質(zhì)炎性滲出,小血管周圍和心肌間質(zhì)膠原增多。3放射線引起的氧化應(yīng)激、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激和纖維化可能為急性放射性心臟損傷的機制之一。4 CIHH預(yù)處理在一定程度上能改善放射線引起的冠狀動脈損傷,增強心臟對缺血/再灌注損傷的耐受性同時減小缺血/再灌注后心肌梗死面積。在形態(tài)學(xué)上可改善心肌細(xì)胞變性,減輕心肌間質(zhì)炎性滲出,減少小血管周圍和心肌間質(zhì)膠原沉積,提示動物模型在急性期的放射性心臟損傷,在一定程度上是可以改善的。它可能通過抑制氧化應(yīng)激、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激、纖維化而發(fā)揮心肌保護作用。
【關(guān)鍵詞】：放射性心臟損傷 慢性間歇性低壓低氧 Langendroff灌流 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激 氧化應(yīng)激
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R818
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-10
• 英文縮寫10-11
• 前言11-12
• 材料與方法12-18
• 結(jié)果18-22
• 附圖22-28
• 附表28-29
• 討論29-32
• 結(jié)論32-33
• 參考文獻33-37
• 綜述 放射性心臟損傷的細(xì)胞及分子生物學(xué)機制研究進展37-46
• 參考文獻42-46
• 致謝46-47
• 個人簡歷47

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

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本文編號：809639