本文關鍵詞：14-3-3σ與TPD52L1在低劑量中波紫外線誘導HaCaT細胞輻射損傷中作用研究

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【摘要】：目的探討14-3-3σ與TPD52L1在低劑量中波紫外線(UVB)誘導的HaCaT細胞凋亡、增殖和細胞周期中的作用。方法 1取對數(shù)生長期HaCaT細胞,予低劑量UVB(累計照射劑量為2.97×10~(-2)J/cm~2)照射后培養(yǎng)6~48h收獲細胞,另設不予UVB照射(予假照射)的對照,采用流式細胞分析法檢測細胞凋亡率;將HaCaT細胞分為對照組和UVB組,于相應照射處理后0~72 h收獲細胞,采用噻唑藍法檢測細胞增殖能力。2取HaCaT細胞隨機分為對照組(予假照射)和UVB組,于相應照射處理后0~24 h收獲細胞,采用流式細胞術檢測G2/M期細胞比例。3予低劑量UVB照射HaCaT細胞后培養(yǎng)3~24 h或3~30 h,收獲細胞,另設予假照射的對照,采用實時熒光定量聚合酶鏈式反應檢測細胞中14-3-3σ與TPD52L1的mRNA的相對表達水平,采用蛋白質印跡法檢測細胞中14-3-3σ與TPD52L1的蛋白相對水平表達。結果 1 UVB照射后24 h,HaCaT細胞凋亡率上升至最高值(P0.05),增殖能力下降至最低值(P0.05)。2對照組HaCaT細胞G2/M期比例呈現(xiàn)在假照射后6~12 h維持在最高值,至假照射后18 h下降至最低值的周期性改變特征;UVB組HaCaT細胞G2/M期比例在照射后6、12和18 h均較對照組上升(P0.05),并持續(xù)在最高值,發(fā)生較明顯的G2/M期阻滯。3UVB照射后HaCaT細胞中14-3-3σ的mRNA和蛋白相對表達水平均呈現(xiàn)先上升后下降現(xiàn)象。其中,14-3-3σmRNA相對表達水平于照射后3 h上升至峰值(P0.05),于照射后3~12 h維持峰值水平(P0.05),其后逐漸下降,于照射后24 h恢復正常水平;14-3-3σ蛋白相對表達水平于照射后6 h開始上升(P0.05),于照射后18 h上升至峰值(P0.05),其后逐漸下降,但于照射后30 h仍未恢復正常水平。TPD52L1 mRNA相對表達水平則呈現(xiàn)先下降后上升現(xiàn)象,于照射后12 h下降至最低水平(P0.05),其后逐漸升高,于照射后24 h上升至峰值(P0.05);TPD52L1蛋白相對表達水平呈先上升后下降現(xiàn)象,于照射后24 h上升至峰值(P0.05),于照射后30 h下降至正常水平(P0.05)。結論 14-3-3σ和TPD52L1在低劑量UVB誘導HaCaT細胞發(fā)生凋亡、增殖和G2/M期阻滯中可能共同發(fā)揮重要作用。
【作者單位】： 南方醫(yī)科大學公共衛(wèi)生學院放射醫(yī)學系;廣州市第十二人民醫(yī)院;
【關鍵詞】： --σ TPDL 中波紫外線 HaCaT細胞 細胞凋亡 細胞增殖 細胞周期
【基金】：國家自然科學基金(81202152,81472922,81573076) 廣州市衛(wèi)生局醫(yī)藥衛(wèi)生科技項目(20161A011042)
【分類號】：R818
【正文快照】： 近年來,在工業(yè)和醫(yī)療上紫外線的職業(yè)性接觸人群逐年增加,如從事工業(yè)弧焊、印刷、飛行和紫外線療法等的作業(yè)人員,均可受到過度紫外線照射[1-3]。中波紫外線(Ultraviolet B,UVB)極大部分被皮膚表皮所吸收,對皮膚可產(chǎn)生強烈的光損傷,嚴重者可引起皮膚癌[4-5]。UVB輻射損傷可以通

【相似文獻】

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1 王寶勤,牛增民,楊甲祥;裂變中子照射對小鼠空腸隱窩細胞增殖周期的影響[J];軍事醫(yī)學科學院院刊;1986年01期

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本文編號：655963