本文關(guān)鍵詞：運動對生長期小鼠骨密度及骨免疫相關(guān)因子的影響研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景：骨骼作為機體的支撐和保護器官,其健康水平是機體正常生活的重要保障。骨組織在整個生命過程均處于不斷更新和重建狀態(tài)。其內(nèi)在原因是成骨細胞和破骨細胞的相互調(diào)節(jié)使骨不斷更新；外在原因則包括許多因素,如運動、生活方式等。另外,免疫系統(tǒng)也參與骨骼系統(tǒng)代謝調(diào)控過程：免疫相關(guān)因子如IL-1、TNF-a等,在骨代謝中能直接或間接的調(diào)控RANKL/RANK信號通路來調(diào)節(jié)骨代謝；骨代謝相關(guān)因子如OPG等,在免疫系統(tǒng)中同樣具有重要的調(diào)控作用。因此,骨骼系統(tǒng)和免疫系統(tǒng)之間的這些相互作用又被稱作“骨免疫系統(tǒng)”。運動刺激在骨的生長發(fā)育過程具有重要的調(diào)節(jié)作用。長期規(guī)律性運動不僅能夠增加骨密度,提高峰值骨量,還能預防骨質(zhì)疏松的發(fā)生,降低骨折風險率。而且在生長期運動的作用效果更明顯。運動影響骨代謝的機制有很多,是否能通過影響免疫系統(tǒng)中IL-IL-6, TNF-a等表達水平,進而影響骨吸收信號通路RANKL/RANK來實現(xiàn)的,目前國內(nèi)外有關(guān)運動對骨免疫系統(tǒng)的研究及報道甚少,這尚不清楚。目的：本研究通過對4周齡雄性C57BL/6小鼠進行8周下坡跑、平坡跑和游泳運動干預后,旨在從骨免疫系統(tǒng)相關(guān)因子著手,探究運動對骨免疫系統(tǒng)免疫細胞、相關(guān)因子的影響及其骨骼系統(tǒng)RANKL/TRAF 6信號通路的調(diào)節(jié)作用,以期為骨免疫因子對骨代謝的調(diào)控及運動抑制骨吸收的作用機制提供理論依據(jù)。方法：將4周齡清潔級雄性C57BL/6小鼠隨機分為平坡跑運動組(T組)、下坡跑運動組(DT組)、游泳運動組(S組)和安靜對照組(C組),分籠飼養(yǎng),每組6只,遵循12h的明暗周期,自由飲水,飲食,并于每天下午6點左右進行運動干預。其中,T組和DT組均以0.8 km/h的速度進行40 min運動,且DT組坡度設(shè)置為-9。；S組運動時間為40 min,并用毛刷驅(qū)趕以防小鼠漂浮于水面不游泳,每次游泳結(jié)束后立即用電吹風將小鼠吹干放回籠子里。8周訓練結(jié)束后,將小鼠進行斷頸椎處死,分離四肢,進行指標測試。用雙能X射線測量左前腿(保留軟組織)骨密度；采用qRT-PCR測骨組織基因和骨免疫相關(guān)因子IL-l, IL-6, TNF-a, IFN-y, RANKL , TRAF 6的mRNA表達含量；并用石蠟切片免疫組化化檢測CD4+ T細胞含量變化。結(jié)果：(1)雙能X射線檢測骨密度結(jié)果表明：8周運動干預后,S組、T組、DT組小鼠骨密度均較對照組小鼠明顯增加；且與C組相比,S組和T組均呈現(xiàn)顯著增加(P0.05),DT組呈極其顯著性增加狀態(tài)(P0.01)；而S組、T組和DT組之間則沒有統(tǒng)計學差異。(2)運用qRT-PCR對RANKL, TRAF 6 mRNA進行檢測后發(fā)現(xiàn),與C組相比,T組和DT組RANKL表達下調(diào),且與S組相比,T組RANKLmRNA表達顯著下調(diào)(P0.05)；與C組相比較,T組TRAF 6表達出現(xiàn)顯著下降(P0.05),S組和DT組則沒有明顯變化。在對骨免疫相關(guān)因子進行qRT-PCR檢測后發(fā)現(xiàn)：與C組相比,S組和DT組IL-6出現(xiàn)顯著下調(diào)(P0.05),T組沒有明顯變化,與S組相比,T組IL-6水平則出現(xiàn)顯著性的提高(P0.05)；與C組相比,TNF-a的表達在S組、T組和DT組中均出現(xiàn)極顯著性下調(diào)(P0.01),各運動組之間不存在明顯差異；與C組相比,IL-1β在S組和T組出現(xiàn)顯著上調(diào)(P0.05),DT組沒有明顯變化,而S組和T組相比,DT組則出現(xiàn)顯著下調(diào)(P0.05)。與C組相比,S組、T組和DT組中IFN-y表達出現(xiàn)極顯著上調(diào)(P0.01),而與S組相比,T組和DT組也出現(xiàn)極顯著下降(P0.01),T組和DT組之間沒有統(tǒng)計學變化。(3)運用石蠟包埋免疫組化方法檢測骨髓中T淋巴細胞后發(fā)現(xiàn)：與C組相比,S組、T組、DT組T細胞數(shù)目有增加趨勢,但各組之間沒有明顯變化。結(jié)論：(1)運動對促進骨密度增加具有積極的作用。(2)運動能夠上調(diào)骨髓中T淋巴細胞數(shù)目,增強機體免疫功能。(3)運動能夠下調(diào)免疫相關(guān)因子TNF-a并上調(diào)IFN-y的表達,且游泳運動和下坡跑能下調(diào)IL-6,運動下調(diào)TNF-a, IL-6并上調(diào)IFN-y因子的作用均能夠抑制RANKL/RANK/TRAF 6信號通路,抑制骨吸收。
【關(guān)鍵詞】：生長期 運動 骨密度 免疫系統(tǒng) RANKL TRAF6 T細胞 骨免疫因子
【學位授予單位】：華東師范大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R87
【目錄】：

• 摘要6-8
• Abstract8-13
• 1 前言13-15
• 2 文獻綜述15-35
• 2.1 骨免疫系統(tǒng)概述15-16
• 2.2 免疫系統(tǒng)對骨代謝的調(diào)控16-28
• 2.2.1 免疫細胞對骨代謝的調(diào)控16-21
• 2.2.2 免疫因子對骨代謝的調(diào)控21-28
• 2.3. 運動與骨免疫系統(tǒng)28-34
• 2.3.1 運動與骨代謝28-30
• 2.3.2 運動與免疫細胞30-32
• 2.3.3 運動與骨免疫相關(guān)因子32-34
• 2.3.4 運動、骨免疫因子和骨代謝34
• 2.4 小結(jié)34-35
• 3 實驗部分35-56
• 3.1 實驗?zāi)康?/span>35
• 3.2 實驗對象和方法35-43
• 3.2.1 實驗對象35
• 3.2.2 實驗方案35-36
• 3.2.3 實驗方法36-43
• 3.3 統(tǒng)計方法43
• 3.4 實驗結(jié)果和分析43-54
• 3.4.1 實驗結(jié)果43-48
• 1) 不同方式運動對小鼠骨密度的影響43-44
• 2) 不同方式運動對骨組織RANKL和TRAF 6 mRNA表達量的影響44-46
• 3) 不同方式運動對骨免疫相關(guān)因子mRNA表達量的影響46-47
• 4) 不同方式運動對骨組織免疫細胞的影響47-48
• 3.4.2 分析與討論48-54
• 1) 不同方式運動對生長期小鼠BMD的影響48-50
• 2) 不同方式運動對骨免疫相關(guān)因子mRNA表達量的影響50-52
• 3) 不同方式運動對骨組織RANKL和TRAF 6 mRNA表達量的影響52-53
• 4) 不同方式運動對CD4+ T細胞數(shù)量的影響53-54
• 3.5 結(jié)論54
• 3.6 小結(jié)54-56
• 3.6.1 主要不足之處54
• 3.6.2 展望54-56
• 附錄56-58
• 參考文獻58-68
• 后記68

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