本文關(guān)鍵詞：DNA依賴性蛋白激酶催化亞基在電離輻射誘發(fā)HeLa細(xì)胞自噬中的作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的了解DNA依賴性蛋白激酶催化亞基(DNA-PKcs)在電離輻射誘發(fā)細(xì)胞自噬中的作用。方法通過(guò)慢病毒載體(p SicoR)構(gòu)建DNA-PKcs短發(fā)夾RNA(shRNA)表達(dá)載體,并轉(zhuǎn)染HeLa細(xì)胞敲低DNA-PKcs表達(dá)。CCK-8實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞增殖活性及細(xì)胞放射敏感性,免疫印跡檢測(cè)自噬相關(guān)蛋白表達(dá),免疫熒光實(shí)驗(yàn)檢測(cè)自噬標(biāo)志物GFP-LC3的表達(dá)。結(jié)果成功構(gòu)建shRNA敲低DNA-PKcs表達(dá)的HeLa細(xì)胞模型,通過(guò)該細(xì)胞模型觀察到抑制DNA-PKcs蛋白表達(dá)導(dǎo)致細(xì)胞增殖能力降低、放射敏感性增高。P62和LC3蛋白表達(dá)變化,以及細(xì)胞內(nèi)綠色熒光蛋白(GFP)-LC3免疫熒光斑檢測(cè)結(jié)果顯示,DNA-PKcs基因敲低后,明顯增加X(jué)射線誘發(fā)細(xì)胞自噬。抑制DNA-PKcs導(dǎo)致哺乳動(dòng)物西羅莫司(雷帕霉素)靶蛋白(mTOR)第2481位絲氨酸磷酸化水平降低。結(jié)論抑制DNA-PKcs增強(qiáng)受照射宮頸癌HeLa細(xì)胞的自噬及放射敏感性,mTOR信號(hào)通路可能參與DNA-PKcs對(duì)自噬的調(diào)節(jié)作用。
【作者單位】： 軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院放射與輻射醫(yī)學(xué)研究所 北京市放射生物學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： DNA依賴性蛋白激酶催化亞基 電離輻射 H La細(xì)胞 細(xì)胞增殖 自噬 西羅莫司 哺乳動(dòng)物西羅莫司靶蛋白(mTOR)
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(31370843)
【分類號(hào)】：R818
【正文快照】：

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1 賈永峰;王德文;;電離輻射和非電離輻射復(fù)合作用的生物學(xué)效應(yīng)[J];中華勞動(dòng)衛(wèi)生職業(yè)病雜志;2006年12期

2 王小玲;;術(shù)中使用C型臂X線機(jī)電離輻射的防護(hù)[J];河南外科學(xué)雜志;2008年06期

3 王家富;;醫(yī)學(xué)中電離輻射對(duì)人體的危害[J];吉林醫(yī)學(xué);2010年12期

4 于雯淼;李t煴，

本文編號(hào)：454743