MMP-9、TIMP-1在孕鼠羊水栓塞發(fā)病機(jī)制的實(shí)驗(yàn)性研究
本文關(guān)鍵詞:MMP-9、TIMP-1在孕鼠羊水栓塞發(fā)病機(jī)制的實(shí)驗(yàn)性研究,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的:本課題擬使用孕鼠模擬產(chǎn)婦羊水栓塞的過(guò)程,通過(guò)免疫組化檢測(cè)孕鼠羊水栓塞后肺組織中基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)及基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑1(TIMP-1)的表達(dá),ELISA法檢測(cè)血清及羊水中的MMP-9和TIMP-1前后的變化,探討其與羊水栓塞的關(guān)系,為法醫(yī)學(xué)死因鑒定和臨床診斷提供參考。方法:30只健康SD孕晚期大鼠,體重300±50g(第三軍醫(yī)大實(shí)驗(yàn)動(dòng)物部提供),隨機(jī)分為生理鹽水組(NS組,n=10)、羊水原液組(AF組,n=10)、羊水-胎糞液組(MAF組,n=10);麻醉生效后先予眼眶取血1ml,子宮次全切除術(shù)取下子宮并破膜取羊水5ml,部分用于配成羊水原液;另用胎鼠取胎糞,配成羊水-胎糞液;從腹主靜脈注入NS、羊水原液、羊水-胎糞液后,觀察1h,再取血2ml,標(biāo)本離心(3000r/min,10min)、分離,-80℃保存待檢。處死大鼠取右肺組織及相連的支氣管用于石蠟包埋、切片、HE染色和免疫組化。實(shí)驗(yàn)定量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,采用軟件SPSS 17.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,各組數(shù)據(jù)先進(jìn)行正態(tài)分布檢驗(yàn),符合者組內(nèi)進(jìn)行t檢驗(yàn),組間進(jìn)行方差分析,以α=0.05作為檢驗(yàn)水準(zhǔn);不符合者選擇秩和檢驗(yàn),以α=0.05作為檢驗(yàn)水準(zhǔn)。結(jié)果:1.臨床表現(xiàn):NS組孕鼠從腹主靜脈注入生理鹽水后出現(xiàn)短暫性呼吸加快,嘴唇稍發(fā)紺,心率增快,1~2min后逐漸恢復(fù),穿刺腹主動(dòng)脈抽血后止血時(shí)間為1~3 min;AF組較NS組出現(xiàn)心率增快早,并伴有呼吸頻率加快,然后變慢,且持續(xù)時(shí)間更長(zhǎng),期間出現(xiàn)局部抽搐、嘴唇發(fā)紺、大小便失禁等癥狀,穿刺后止血時(shí)間為3~6 min;MAF組出現(xiàn)類(lèi)似癥狀時(shí)間更早且更嚴(yán)重,并且伴有凝血功能障礙表現(xiàn),穿刺后止血時(shí)間10~15 min;3組中未見(jiàn)死亡案例。2.病理學(xué)檢查:肉眼觀:NS組肺組織表面光滑,呈暗紅色,AF組表面粗糙、淡紅色,MAF組表面粗糙、粉紅色。HE染色顯示:NS組未見(jiàn)明顯異常;AF組及MAF組的大鼠肺組織均可見(jiàn)炎性細(xì)胞浸潤(rùn),以MAF組更為明顯,部分肺血管內(nèi)可見(jiàn)到染成淡粉色的不定形物質(zhì)及絲狀物。3.CK16 IHC染色顯示:NS組未見(jiàn)明顯異常;AF組和MAF組在大鼠肺血管可見(jiàn)呈棕黃色、細(xì)絲狀角化鱗狀上皮。4.大鼠羊水和羊水-胎糞液中MMP-9、TIMP-1 ELISA法檢測(cè)結(jié)果示:MMP-9羊水原液濃度約為(3.105±0.345)μg/L,羊水-胎糞液濃度約為(6.125±0.543)μg/L;TIMP-1的羊水原液濃度約為(99.105±3.145)pg/m L,羊水-胎糞液濃度約為(55.335±2.543)pg/m L。5.大鼠血清MMP-9 ELISA法檢測(cè)結(jié)果示:NS組實(shí)驗(yàn)前、后,三組實(shí)驗(yàn)前兩兩比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05),AF組及MAF組實(shí)驗(yàn)前后比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05),MAF組與AF組及NS組、AF組與NS組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。6.大鼠血清TIMP-1 ELISA法檢測(cè)結(jié)果示:NS組實(shí)驗(yàn)前、后,三組實(shí)驗(yàn)前兩兩比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05),AF組及MAF組實(shí)驗(yàn)前后比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05),MAF組與AF組及NS組、AF組與NS組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。7.MMP-9/TIMP-1血清實(shí)驗(yàn)前后動(dòng)態(tài)平衡情況:NS組實(shí)驗(yàn)前(5.856±0.105);注入生理鹽水后(6.246±0.135);AF組實(shí)驗(yàn)前(5.759±0.128),注入羊水原液后(7.278±0.095);MAF組實(shí)驗(yàn)前(5.657±0.123),注入羊水-胎糞液后(10.552±0.996)。8.MMP-9、TIMP-1 IHC結(jié)果示:NS組肺泡內(nèi)組織細(xì)胞、漿細(xì)胞及中心粒細(xì)胞中見(jiàn)MMP-9少量表達(dá),顏色較淺,而TIMP-1大量表達(dá),顏色較深;AF組、MAF組肺泡內(nèi)組織細(xì)胞、漿細(xì)胞及中心粒細(xì)胞中可見(jiàn)MMP-9中到大量表達(dá),顏色較深,其中MAF組更加明顯;以及見(jiàn)TIMP-1一定量表達(dá),顏色較淺。結(jié)論:1.通過(guò)HE染色、IHC方法證實(shí)大鼠羊水栓塞模型建立成功。2.MMP-9和TIMP-1異?赡軈⑴c羊水栓塞肺損傷的過(guò)程,并加劇了肺損傷發(fā)生發(fā)展。3.MMP-9/TIMP-1失衡可能參與羊水栓塞的病理生理過(guò)程。
【關(guān)鍵詞】:羊水栓塞 CK16 MMP-9 TIMP-1 ECM 平衡
【學(xué)位授予單位】:遵義醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類(lèi)號(hào)】:D919
【目錄】:
- 英漢縮略詞對(duì)照表4-5
- 中文摘要5-7
- 英文摘要7-10
- 前言10-13
- 第一部分 實(shí)驗(yàn)性孕鼠羊水栓塞模型的制備13-21
- 材料與方法13-17
- 結(jié)果17-18
- 討論18-20
- 結(jié)論20-21
- 第二部分 MMP-9、TIMP-1 在孕鼠羊水栓塞發(fā)病機(jī)制的實(shí)驗(yàn)性研究21-31
- 材料與方法21-23
- 結(jié)果23-27
- 討論27-30
- 結(jié)論30-31
- 參考文獻(xiàn)31-34
- 綜述34-41
- 參考文獻(xiàn)39-41
- 致謝41-42
- 作者簡(jiǎn)介42
【參考文獻(xiàn)】
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本文關(guān)鍵詞:MMP-9、TIMP-1在孕鼠羊水栓塞發(fā)病機(jī)制的實(shí)驗(yàn)性研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
本文編號(hào):411579
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