目的在核事故和輻射事故下采取準確、快速的生物分析技術估算暴露人群的受照劑量,在臨床治療中起著十分重要的作用。輻射生物劑量估算的“金標準”-分析“雙著絲粒+環(huán)”,存在實驗周期長、對分析人員技術要求高等特點,無法滿足上述高通量、快速的要求。近年來,能實現(xiàn)快速、高通量篩選的蛋白質組學技術己在輻射研究中廣泛應用,為發(fā)現(xiàn)輻射敏感生物標志物提供了有效方法。其中,應用最多的定量蛋白質組學方法是體外標記定量技術-串聯(lián)質譜標簽(Tandem Mass Tags,TMT)等,這些方法可以篩選分析不同劑量照射后大鼠血漿中的差異表達蛋白質。目前國內(nèi)外應用蛋白質組學方法對輻射后生物差異表達蛋白質的研究中,所選擇的輻射劑量點少、觀察時間短、缺乏驗證實驗。本研究的目的是在現(xiàn)有研究基礎上,應用TMT定量蛋白質組學方法研究0 Gy、1 Gy、3 Gy和5 Gy照射劑量后1 d、3d、5 d和7 d大鼠血漿蛋白質組學的變化,進行生物信息學分析,同時驗證血漿·中的具有良好輻射劑量-效應關系的差異表達蛋白質,為進一■步開發(fā)應用提供實驗依據(jù)。方法1.實驗動物、分組及照射:SPF級SD雄性大鼠,體重(2000)g。將觀察生長健康...

【文章頁數(shù)】：76 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２?ＴＢＩ?Ｙ射線照射后大鼠血漿中所有上調和下調差異表達蛋白質的ＧＯ分析

??胞外空間蛋白，１３．８％位于血液微粒中（圖２．ａ）。分子功能分析顯示差異表達蛋??白質的首要功能是抗原結合活性（１８．５％），其次是免疫球蛋白受體結合活性??（１７．３％）、絲氨酸型內(nèi)肽酶抑制劑活性（１４．３％）和ＡＴＰ結合活性（１０．１％）（圖??２．ｂ）。在生物學過程分類....

圖３篩選中２４９上調表達蛋白質中１８９種蛋白質之間相互作用網(wǎng)絡??３．蛋白質的ＥＬＩＳＡ定量分析??

大劑量時蛋白質表達較低，難以檢測到，所以本研究重點關注表達增高的差異蛋??白質，所以將表達増高的２４９種蛋白質錄入系統(tǒng)，查找到１８９種蛋白質，并對其??相互關系進行分析。根據(jù)ＳＴＲＩＮＧ分析結果（圖３?），上述中有量效趨勢的Ａ２ｍ、??Ｃｌｕ和Ｃｐ蛋白質被確定位于蛋白質相互作用網(wǎng)....

圖４?６（）Ｃｏ?Ｙ射線全身照射ＳＤ大鼠后不同時間點血漿中Ａ２ｍ蛋白表達變化??注：與ＯＧｙ組比較，“＊”，尸＜０．０５；?戶＜０．０１；后面結果中的意義同前

３?Ｇｙ組在照后３?ｄ濃度最高３０．３５±５．２６呢／ｍｌ。實驗組中，同一劑量點Ａ２ｍ蛋白??的表達量均在照射后Ｉｄ或者３ｄ達到最高值后，隨著照射后時間的延長，表達??量降低，逐漸回歸到對照水平（圖４）。??照射后１?ｄ，各劑量組血漿中Ａ２ｍ蛋白表達量高于對照組，但只有５?Ｇｙ組....

圖5‘ocoy射線全身照射sD大鼠后不同時間點血漿中cHGA蛋白表達變化

?７?－?－?－???注：ａｙ為蛋白質在血漿中的表達水平（ｐｇ／ｍｌ），?ｘ為吸收劑量（Ｇｙ），尸＜０．０５。??３．１．２?ＣＨＧＡ蛋白表達變化??照射后３?ｄ和５?ｄ，大鼠血漿中ＣＨＧＡ蛋白的表達量隨著照射劑量的增加而??升高。與對照組比較，１?Ｇｙ和３?Ｇｙ組的ＣＨＧＡ蛋白....

本文編號：3986209