失重／模擬失重可導(dǎo)致肺組織形態(tài)學(xué)的改變,肺動脈高壓,肺微血管的變化,同時可引起內(nèi)皮細胞的凋亡。但是,失重／模擬失重所致的肺微血管內(nèi)皮細胞(HPMVEC)凋亡情況已有報導(dǎo),其時間效應(yīng)和發(fā)生機制仍不清楚。因此,本課題的目的如下： 1.觀察回轉(zhuǎn)模擬失重對人肺微血管內(nèi)皮細胞凋亡時間效應(yīng)的影響； 2.研究線粒體信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在回轉(zhuǎn)模擬失重所致的人肺微血管內(nèi)皮細胞凋亡中的作用； 3.觀察PI3K/Akt、NF-κB在回轉(zhuǎn)模擬失重所致的人肺微血管內(nèi)皮細胞凋亡中的變化情況,進一步探討與細胞凋亡的關(guān)系； 4.觀察回轉(zhuǎn)模擬失重條件下,人肺微血管內(nèi)皮細胞的細胞骨架的變化與細胞凋亡的關(guān)系。 方法 為達到以上研究目的,本課題采用以下實驗方法進行研究： 1.將人肺微血管內(nèi)皮細胞進行培養(yǎng)和傳代,內(nèi)皮細胞貼壁覆蓋率達到80%時,收集細胞,并用于回轉(zhuǎn)模擬失重實驗。回轉(zhuǎn)模擬失重時間設(shè)為4個時間點,12h、24h、48h和72h,同時每個時間點設(shè)立同步1g對照。采用流式細胞儀檢測細胞凋亡和透射電鏡觀察模擬失重細胞超微結(jié)構(gòu)的變化,觀察模擬失重對人肺微血管內(nèi)皮細胞凋亡時間效應(yīng)的影響； 2.找出細胞凋亡最顯著的時間點后，選擇與線粒...

【文章頁數(shù)】：82 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖1:流式細胞儀對模擬失重12hHPMVEC凋亡的定量分析

檢驗進行實驗組和對照組比較。以p<0.05為差異顯著。結(jié)果1.流式細胞儀檢測細胞凋亡，見圖1一圖6。1.1如圖1一圖4所示，回轉(zhuǎn)模擬失重12小時和24小時，人肺微血管內(nèi)皮細胞凋亡略有增加，但回轉(zhuǎn)組和對照組比較，無顯著差異。兩組細胞的凋亡率分別為:C12:2.29士0.78(n=....

圖2:回轉(zhuǎn)模擬失重12hHpMVEC凋亡率的變化(p>0.05)

ClinostatlZ:3.89士1.24(n=3)，P=0.13;士1.48(n=3)，Clinostat24:4.08士0.72(n=3)，P=0.14。肖肖擠擠‘‘J嗯...內(nèi)附冷到認丫干ITc}}}}}}}}}}·亥扮扮‘，···、:::rop，O禪.0一。O戶，01，.....

圖3:流式細胞儀對模擬失重24hHPMVEC凋亡的定量分析

圖3:流式細胞儀對模擬失重24hHPMVEC凋亡的定量分析歲s川的。側(cè)d。VdCollClinostat圖4:回轉(zhuǎn)模擬失重24hHPMVEC凋亡率的變化(p>0.05)

圖4:回轉(zhuǎn)模擬失重24hHPMVEC凋亡率的變化(p>0.05)

結(jié)果1.流式細胞儀檢測細胞凋亡，見圖1一圖6。1.1如圖1一圖4所示，回轉(zhuǎn)模擬失重12小時和24小時，人肺微血管內(nèi)皮細胞凋亡略有增加，但回轉(zhuǎn)組和對照組比較，無顯著差異。兩組細胞的凋亡率分別為:C12:2.29士0.78(n=3)，ClinostatlZ:3.89士1.24(n=....

本文編號：3984987