發(fā)布時間：2017-05-26 10:00

  本文關(guān)鍵詞：有氧運動對心肌肥大過程中心肌細胞增殖的促進及調(diào)控機制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究目的： 通過在體和離體實驗,探討運動對心肌肥大過程中心肌細胞增殖的激活和cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白綁定蛋白(cyclic-AMP-responsive element binding protein binding protein,CBP)在其中的調(diào)控作用。 研究方法： 采用游泳訓(xùn)練構(gòu)建運動性心肌肥大模型,用主動脈弓縮窄術(shù)(transverse aortic constriction, TAC)構(gòu)建病理性心肌肥大模型。12周齡雄性C57B1/6J小鼠隨機分為4組：對照組(Control),運動組(Swim),假手術(shù)組(Sham),手術(shù)組(TAC),每組10只。實驗結(jié)束,采用二維超聲心動圖檢測室間隔厚度(Interventricular septum dimension, IVS)、左室后壁厚度(LV posterior wall dimension, LVPW)和心功能,計算心重/體重比值(heart weight/body weight ratio, HW/BW)、左心室重量/脛骨長度比值(left ventricular weight/tibial length ratio, LVW/TL),采用蘇木素-伊紅(Hematoxylin-eosin, HE)和Masson三色染色法,衡量兩種模型心肌細胞肥大程度和心肌間質(zhì)膠原纖維增生情況。對心肌組織蛋白采用Western Blot檢測增殖細胞核抗原(proliferating cell nuclear autigen, PCNA)的表達水平,鑒定心肌細胞增殖能力。運用實時定量PCR (Real-time PCR,RT-PCR)檢測心肌細胞中原癌基因心鈉素(atrial natriuretic peptide, ANP)和腦尿鈉肽(brain natriuretic peptide, BNP)的mRNA水平。采用RT-PCR、Western Blot和免疫組化的方法檢測心肌細胞中CBP的表達水平。為驗證CBP對心肌細胞增殖能力的激活作用,在離體實驗中,以去氧腎上腺素(phenylephrine, PE)誘導(dǎo)原代心肌細胞產(chǎn)生肥大,采用CBP抑制劑C646抑制CBP的表達,對心肌細胞爬片進行α-肌動蛋白(α-actin)的免疫熒光檢測心肌細胞肥大程度,RT-PCR檢測CBP的mRNA水平,免疫熒光檢測增殖細胞核抗原Ki67的表達,檢測CBP表達受抑制后對心肌細胞肥大程度和增殖水平的影響。 研究結(jié)果： 1.運動性和病理性心肌肥大模型的IVS和LVPW之和與相應(yīng)的對照組相比,都發(fā)生了明顯的增大(p0.05),HW/BW和LVW/TL與相應(yīng)對照組相比也有明顯升高(p0.05)；兩種心肌肥大模型的心肌細胞面積與相應(yīng)對照組相比都有顯著增大(p0.01)。 2.TAC組心肌組織纖維化程度比Swim組明顯加重；病理性心肌肥大組小鼠心肌細胞ANP和BNP的mRNA水平均比Sham組明顯升高(p0.01),Swim組ANP的mRNA水平比Control組明顯升高(p0.05),而BNP的mRNA水平升高不明顯。 3. Swim組小鼠心肌細胞PCNA蛋白表達水平明顯高于Control組(p0.05)和TAC組(p0.01)。 4.運動性心肌肥大組小鼠心肌細胞CBP的mRNA水平比Control組明顯升高(p0.01),且明顯高于TAC組(p0.05)。Western blot檢測CBP蛋白水平,TAC組比Sham組明顯降低(p0.05),Swim組與Control組相比有明顯升高(p0.05),且顯著高于TAC組(p0.01)。心肌組織切片CBP的免疫組化結(jié)果顯示,Swim組CBP陽性細胞顯著多于Control組(p0.01)與TAC組(p0.01)。 5.體外實驗PE組心肌細胞面積顯著高于Control組(p0.05)和PE+C646組(p0.05)。PE能使CBP的mRNA表達水平比Control組明顯升高(p0.01),PE+C646組CBP的mRNA水平比PE組明顯降低(p0.01)。PE組Ki67陽性細胞與Control組相比明顯增多(p0.01), PE+C646組Ki67陽性細胞與PE組相比明顯減少(p0.05),提示C646抑制CBP的表達后,能明顯抑制心肌細胞的肥大和增殖。 研究結(jié)論： 1.有氧運動對缺血心肌細胞的增殖功能具有促進作用。 2.有氧運動促進心肌細胞增殖可能是通過激活CBP來進行調(diào)控的,抑制CBP的表達后可以抑制心肌細胞的增殖。
【關(guān)鍵詞】：有氧運動 心肌肥大 心肌細胞增殖 CBP
【學(xué)位授予單位】：揚州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R87
【目錄】：

• 中文摘要2-4
• Abstract4-8
• 符號說明8-10
• 第一部分 文獻綜述10-18
• 前言10
• 1 心肌肥大概述10-11
• 1.1 運動性心肌肥大10-11
• 1.2 病理性心肌肥大11
• 2 心肌肥大的生物學(xué)機制11-17
• 2.1 心肌成纖維細胞增殖11-12
• 2.2 心肌細胞增12-13
• 2.3 心臟血管增生13-14
• 2.4 心臟能量代謝重構(gòu)14-15
• 2.5 氧自由基損傷15-16
• 2.6 鈣超載16-17
• 2.7 炎癥反應(yīng)17
• 3 小結(jié)17-18
• 第二部分 實驗部分18-43
• 前言18
• 1 材料和方法18-24
• 1.1 材料18-19
• 1.1.1 主要試劑和藥品18-19
• 1.1.2 主要儀器19
• 1.2 方法19-24
• 1.2.1 實驗動物19
• 1.2.2 實驗動物分組及訓(xùn)練方案19-20
• 1.2.3 實驗取材20
• 1.2.4 實驗方法20-24
• 1.2.4.1 二維超聲心動圖檢測20
• 1.2.4.2 心臟形態(tài)學(xué)分析20-21
• 1.2.4.3 Real time-PCR分析基因表達21-22
• 1.2.4.4 心肌組織胞漿、胞核蛋白抽提22
• 1.2.4.5 Western blot蛋白印跡法檢測蛋白表達水平22-23
• 1.2.4.6 乳鼠心肌細胞培養(yǎng)23-24
• 1.2.4.7 心肌細胞免疫熒光24
• 1.2.5 統(tǒng)計學(xué)分析24
• 2 結(jié)果24-39
• 2.1 各組小鼠心肌肥大程度和表型差異24-31
• 2.1.1 各組小鼠心室壁厚度和心功能的結(jié)果比較24-26
• 2.1.2 各組小鼠HW/BW、LVW/TL結(jié)果26-27
• 2.1.3 各組小鼠心肌細胞面積統(tǒng)計結(jié)果27-28
• 2.1.4 各組小鼠心肌纖維化程度28-29
• 2.1.5 ANP、BNP的結(jié)果29-30
• 2.1.6 各組小鼠心肌細胞增殖程度30-31
• 2.2 各組小鼠心肌組織CBP的表達差異31-35
• 2.2.1 各組小鼠心肌組織CBP的mRNA水平31-32
• 2.2.2 各組小鼠CBP的蛋白表達水平32-35
• 2.2.2.1 CBP的Western blot結(jié)果比較32-33
• 2.2.2.2 CBP的免疫組化結(jié)果33-35
• 2.3 體外實驗結(jié)果35-39
• 2.3.1 各組心肌細胞面積比較35-36
• 2.3.2 各組心肌細胞CBP的mRNA水平36-37
• 2.3.3 各組心肌細胞增殖程度37-39
• 3 討論39-42
• 3.1 運動性和病理性心肌肥大在表型方面的差異分析39-40
• 3.2 運動性和病理性心肌肥大在心肌細胞增殖方面的差異分析40-41
• 3.3 CBP在運動促進心肌細胞增殖能力中的作用分析41-42
• 4 結(jié)論42-43
• 主要參考文獻43-48
• 致謝48-49

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王詠;肖穎彬;;過氧化體增殖物激活型受體-γ對肥厚心肌炎癥反應(yīng)調(diào)控作用的初步研究[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2006年08期

2 曾婭莉;黃文芳;盧賢瑜;;細胞凋亡時線粒體鈣離子信號調(diào)節(jié)因素研究進展[J];國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志;2006年06期

3 魏曉峰;魏偉;史嬌嬌;賈斯媛;周丹丹;;運動性和高血壓性心臟肥大心肌間質(zhì)膠原網(wǎng)絡(luò)重塑及其對左心室功能的影響[J];廣州體育學(xué)院學(xué)報;2013年03期

4 陳志勇;王玲;潘振偉;孫麗華;張高小;潘國聘;呂延杰;楊寶峰;;三氧化二砷對海馬神經(jīng)元細胞內(nèi)鈣離子濃度的影響[J];哈爾濱醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2007年01期

5 周小艷;韓金祥;高雪芹;朱波;;腦鈉素與心血管疾病[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;2009年02期

6 劉子泉,李海英,佟長青,齊莉,吳勝吉;高血壓性心肌肥大逆轉(zhuǎn)過程心肌膠原的變化[J];解放軍預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志;2003年02期

7 張潤峰;李霞;胡大一;高文根;魏毅東;邢燕;;小腦頂核電刺激對心肌梗死大鼠心肌細胞內(nèi)鈣超載的影響[J];科技導(dǎo)報;2011年27期

8 顧玉梅,吳揚;氧化應(yīng)激在心肌肥厚中的作用及其機制[J];南通大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2005年03期

9 姚震;陳林;;我國心血管疾病現(xiàn)狀與展望[J];海南醫(yī)學(xué);2013年13期

10 張勇,劉健,李紅艷,田振軍;運動性心肌肥大的生物學(xué)機制[J];四川體育科學(xué);2005年01期

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 邢藝凡;西洋參通過調(diào)節(jié)Nrf2抑制主動脈弓縮窄術(shù)誘導(dǎo)的小鼠心室重構(gòu)的研究[D];山東大學(xué);2012年

2 常亮;內(nèi)脂素在心肌細胞肥厚和炎癥反應(yīng)中的作用及其機制[D];河北醫(yī)科大學(xué);2012年

3 鄭德志;大鼠心肌缺血再灌注損傷心室重構(gòu)及芒果苷對其作用和機制的研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2012年

4 李奕;不同強度運動誘導(dǎo)mTOR信號對心肌肥大的作用研究[D];北京體育大學(xué);2013年

  本文關(guān)鍵詞：有氧運動對心肌肥大過程中心肌細胞增殖的促進及調(diào)控機制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號：396421