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混合精斑不同免疫學(xué)檢驗(yàn)方法的聯(lián)用分析

發(fā)布時(shí)間:2024-04-01 03:11
  在法醫(yī)鑒定里,精斑是性犯罪中的重要證據(jù)之一,其作用不可替代,一般可以作為案件定性的主要依據(jù)。顯微鏡鏡檢精子細(xì)胞、免疫學(xué)方法以及組織化學(xué)等方法常用于檢驗(yàn)精斑,但每種檢測(cè)方法都存在一定的優(yōu)勢(shì)及不足。目前,在法醫(yī)鑒定中得以廣泛應(yīng)用的精斑分離方法是差異裂解法,然而在實(shí)際操作中,由于檢材的多樣性,存在精斑混合女性分泌物、精斑混合血斑、多人精斑、精子量過少等復(fù)雜情況,能否有效處理這些情況將直接影響到后期精斑檢測(cè)的準(zhǔn)確性,而差異裂解法只能解決部分問題,有時(shí)難以得到嫌疑人的單一DNA分型。因此,對(duì)混合精斑進(jìn)行分離確證是近年來研究的重點(diǎn)和物證檢驗(yàn)中的難點(diǎn)。研究表明,精斑試紙條法是檢測(cè)前列腺特異性抗原(PSA)的靈敏度較高的簡(jiǎn)便方法,可以用于確證精斑的存在,達(dá)到快速篩選的效果;免疫磁珠法采用磁性分離技術(shù),可以捕獲精斑中的精子核酸,用于純化、擴(kuò)增和檢測(cè);激光捕獲顯微分離技術(shù)則可以捕獲單一精子,以確保準(zhǔn)確獲得單一DNA分型。因此,針對(duì)傳統(tǒng)檢測(cè)方法所存在的不足,本文聯(lián)用精斑試紙條法、免疫磁珠法及激光捕獲顯微分離技術(shù)此三種技術(shù),配合低體積擴(kuò)增,必要時(shí)將獲得的所有分型進(jìn)行匯總、疊加,最后進(jìn)行分類,從而獲得每個(gè)精子供...

【文章頁(yè)數(shù)】:47 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

圖1免疫磁珠法提取核酸的原理及步驟[20]

圖1免疫磁珠法提取核酸的原理及步驟[20]

圖1免疫磁珠法提取核酸的原理及步驟[20]在免疫磁珠法提取核酸的原理的基礎(chǔ)上,本文使用的賽默飛公司的KingFisher核酸純化儀實(shí)現(xiàn)了全自動(dòng)化批量處理。其采用永久磁棒和一次性磁套,當(dāng)磁套套在磁棒尖端放入溶液中時(shí),磁棒通電時(shí)能產(chǎn)生磁場(chǎng),溶液中帶有磁性核心的的磁珠被吸引、收集....


圖2激光壓力彈射的過程

圖2激光壓力彈射的過程

13/45圖2激光壓力彈射的過程[46]1.3其他1.3.1短串聯(lián)重復(fù)序列短串聯(lián)重復(fù)序列(shorttandemrepeat,STR)是一種遺傳標(biāo)記,在當(dāng)前的法醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)工作中應(yīng)用較廣。短串聯(lián)重復(fù)序列,核心序列包括2-6bp,為長(zhǎng)度多態(tài)性序列,包含較大的信息量,遺傳多態(tài)性....


圖3-1自愿者C精斑經(jīng)一般DNA提取的Y-STR分型圖

圖3-1自愿者C精斑經(jīng)一般DNA提取的Y-STR分型圖

空白區(qū)域作為陰性對(duì)照只在控制區(qū)出現(xiàn)一條紫紅色線條,未見陽(yáng)性反應(yīng),見表1。表1抗前列腺特異性抗原膠體金免疫試紙條法檢測(cè)情況自愿者A自愿者B自愿者C混合精斑陰性對(duì)照檢測(cè)結(jié)果++++-注:“+”為陽(yáng)性,“-”為陰性3.1.2一般DNA提取和超....


圖3-2自愿者B精斑經(jīng)一般DNA提取的Y-STR分型圖

圖3-2自愿者B精斑經(jīng)一般DNA提取的Y-STR分型圖

圖3-2自愿者B精斑經(jīng)一般DNA提取的Y-STR分型圖經(jīng)磁珠法替代第二步消化步驟,用KingFisher核酸純化儀按儀器操作規(guī)程完成自動(dòng)提取純化的4份DNA檢材獲得的精斑STR分型結(jié)果中,3份單一精斑檢材均得到完整STR分型結(jié)果,RFU值在....



本文編號(hào):3944907

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