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DNA/RNA同步提取方法學(xué)的建立及其法醫(yī)學(xué)應(yīng)用研究

發(fā)布時(shí)間:2024-03-08 06:07
  目的 為了更好的確定微量生物檢材的個(gè)體來(lái)源和組織來(lái)源,本課題旨在建立一種用Trizol試劑對(duì)法庭科學(xué)中同一生物檢材同步提取DNA/RNA的新方法;用建立的方法對(duì)五種法醫(yī)相關(guān)體液DNA進(jìn)行檢測(cè),以進(jìn)一步驗(yàn)證所建立方法的有效性;并探索建立這五種體液的特異性mRNA復(fù)合擴(kuò)增體系。 方法 制備同一個(gè)體的外周血FTA卡樣本20份,每份含10μL外周血。分為兩組:普通Trizol法組,按照Trizol試劑說(shuō)明書對(duì)樣本DNA進(jìn)行提;改良Trizol法組,通過(guò)改變普通Trizol法收集水相總RNA后余下的中間層和有機(jī)相的pH,用乙醇沉淀當(dāng)中的DNA,然后用Promega DNA IQTM試劑盒純化。檢測(cè)兩種方法提取DNA的純度和濃度,并以之為模板進(jìn)行終點(diǎn)PCR和STR檢測(cè),比較兩種方法提取DNA的純度、濃度及STR分型;兩種方法總RNA的提取均按照試劑說(shuō)明書進(jìn)行,使用本課題組成員前期所建立的方法檢測(cè)RNA的提取效果;利用所建立的改良Trizol法對(duì)外周血、唾液、精液、陰道分泌物、月經(jīng)血DNA/RNA進(jìn)行提取,檢測(cè)提取DNA的STR分型;選取擴(kuò)增條件相同的9對(duì)引物,包括7對(duì)以上五種體液的特異性mRNA...

【文章頁(yè)數(shù)】:57 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
目錄
摘要
Abstract
前言
第一部分 改良Trizol法同步提取外周血DNA/RNA方法學(xué)的建立
    1 材料
    2 方法
    3 結(jié)果
    4 討論
    5 小結(jié)
第二部分 改良Trizol法的法醫(yī)學(xué)應(yīng)用研究
    1 材料
    2 方法
    3 結(jié)果
    4 討論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文情況
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)介



本文編號(hào):3922122

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