目的:聯(lián)合應用重組人白介素11(rhIL-11)和重組人粒細胞集落刺激因子(rhG-CSF)治療輻射引起的急性放射病動物模型,觀察其療效。應用轉hOSM(人抑瘤M)基因細胞作為飼養(yǎng)層,觀察其體外促進造血干/祖細胞(HSPC)增殖、抑制HSPC分化和維持HSPC歸巢能力的作用。 方法:(1)建立⁶⁰Coγ射線急性放射病比格狗動物模型,在對癥治療的基礎上,聯(lián)合應用rhIL-11和rhG-CSF,觀察動物的一般情況、外周血象、外周血有核細胞早期凋亡和壞死率、血漿中細胞因子濃度及組織病理學變化。(2)用分子生物學技術建立轉hOSM基因細胞系,免疫磁珠法分離臍帶血CD34⁺HSPC,以轉基因細胞作為飼養(yǎng)層對其進行擴增,觀察其抑制HSPC分化的作用;將擴增后的CD34⁺HSPC移植入急性放射病SCID小鼠體內(nèi),應用熒光顯微鏡和RT-PCR法檢測移植效果。 結果:(1)急性放射病比格狗經(jīng)細胞因子治療后,45天存活率升高,外周血象也明顯改善;外周血有核細胞早期凋亡和壞死率明顯降低;外周血血漿中IL-2和IFN-γ濃度在早期均升高,隨后I...

【文章頁數(shù)】：46 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖3比格狗胸骨骨髓腔病理學檢查（HE，×100）

對照組比格狗胸骨骨髓腔內(nèi)幾乎全被脂肪組織所填充，僅見很少的造血細胞，對癥治療組胸骨骨髓腔內(nèi)有較多的造血細胞，CK治療組動物胸骨骨髓腔內(nèi)造血細胞增生活躍，可見各系髓細胞，有大量的造血細胞(圖3)。

圖1轉基因293T細胞照片（×200）

應用Zeocin對正常293T細胞進行篩選，確定最佳篩選濃度為25μg/ml。經(jīng)反復感染的293T細胞在Zeocin加壓篩選后，部分細胞能夠存活，長出克隆。熒光顯微鏡下可見這些細胞均有GFP的表達（圖1）。

圖1實驗組SCID小鼠的骨髓細胞照片

普通光鏡熒光顯微鏡圖1實驗組SCID小鼠的骨髓細胞照片M123圖2RT-PCR法鑒定ALU基因內(nèi)皮，隨時間增長，移植細胞增殖，但含量最多的是在骨髓、脾和究中，我們利用2.5Gy60COγ射線破壞小鼠體內(nèi)的造血干細胞，以建動物模型，在照射后的4h內(nèi)....

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