目的:聯(lián)合應(yīng)用重組人白介素11(rhIL-11)和重組人粒細(xì)胞集落刺激因子(rhG-CSF)治療輻射引起的急性放射病動(dòng)物模型,觀察其療效。應(yīng)用轉(zhuǎn)hOSM(人抑瘤M)基因細(xì)胞作為飼養(yǎng)層,觀察其體外促進(jìn)造血干/祖細(xì)胞(HSPC)增殖、抑制HSPC分化和維持HSPC歸巢能力的作用。 方法:(1)建立⁶⁰Coγ射線急性放射病比格狗動(dòng)物模型,在對(duì)癥治療的基礎(chǔ)上,聯(lián)合應(yīng)用rhIL-11和rhG-CSF,觀察動(dòng)物的一般情況、外周血象、外周血有核細(xì)胞早期凋亡和壞死率、血漿中細(xì)胞因子濃度及組織病理學(xué)變化。(2)用分子生物學(xué)技術(shù)建立轉(zhuǎn)hOSM基因細(xì)胞系,免疫磁珠法分離臍帶血CD34⁺HSPC,以轉(zhuǎn)基因細(xì)胞作為飼養(yǎng)層對(duì)其進(jìn)行擴(kuò)增,觀察其抑制HSPC分化的作用;將擴(kuò)增后的CD34⁺HSPC移植入急性放射病SCID小鼠體內(nèi),應(yīng)用熒光顯微鏡和RT-PCR法檢測(cè)移植效果。 結(jié)果:(1)急性放射病比格狗經(jīng)細(xì)胞因子治療后,45天存活率升高,外周血象也明顯改善;外周血有核細(xì)胞早期凋亡和壞死率明顯降低;外周血血漿中IL-2和IFN-γ濃度在早期均升高,隨后I...

【文章頁(yè)數(shù)】：46 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖3比格狗胸骨骨髓腔病理學(xué)檢查（HE，×100）

對(duì)照組比格狗胸骨骨髓腔內(nèi)幾乎全被脂肪組織所填充，僅見很少的造血細(xì)胞，對(duì)癥治療組胸骨骨髓腔內(nèi)有較多的造血細(xì)胞，CK治療組動(dòng)物胸骨骨髓腔內(nèi)造血細(xì)胞增生活躍，可見各系髓細(xì)胞，有大量的造血細(xì)胞(圖3)。

圖1轉(zhuǎn)基因293T細(xì)胞照片（×200）

應(yīng)用Zeocin對(duì)正常293T細(xì)胞進(jìn)行篩選，確定最佳篩選濃度為25μg/ml。經(jīng)反復(fù)感染的293T細(xì)胞在Zeocin加壓篩選后，部分細(xì)胞能夠存活，長(zhǎng)出克隆。熒光顯微鏡下可見這些細(xì)胞均有GFP的表達(dá)（圖1）。

圖1實(shí)驗(yàn)組SCID小鼠的骨髓細(xì)胞照片

普通光鏡熒光顯微鏡圖1實(shí)驗(yàn)組SCID小鼠的骨髓細(xì)胞照片M123圖2RT-PCR法鑒定ALU基因內(nèi)皮，隨時(shí)間增長(zhǎng)，移植細(xì)胞增殖，但含量最多的是在骨髓、脾和究中，我們利用2.5Gy60COγ射線破壞小鼠體內(nèi)的造血干細(xì)胞，以建動(dòng)物模型，在照射后的4h內(nèi)....

本文編號(hào)：3900952