發(fā)布時(shí)間：2023-05-10 03:44

　　目的:通過(guò)設(shè)立相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組探索比格犬成肌細(xì)胞在轉(zhuǎn)染了hCDMP—2基因后對(duì)比格犬半月板纖維軟骨組織損傷修復(fù)的作用。方法:在PubMed上檢索hCDMP—2 CDS序列,進(jìn)行CDS序列合成,hCDMP—2基因PCR產(chǎn)物的克隆,陽(yáng)性克隆的篩選與鑒定,序列測(cè)定與BLAST分析。用慢病毒載體系統(tǒng)將hCDMP—2基因轉(zhuǎn)染至體外分離純化后的比格犬成肌細(xì)胞,采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Real-time Fluorescence Quantitative PCR)方法進(jìn)行轉(zhuǎn)染成功率及轉(zhuǎn)染后細(xì)胞hCDMP—2基因表達(dá)的鑒定,同時(shí)采用westernblot方法鑒定轉(zhuǎn)染后細(xì)胞hCDMP—2蛋白的表達(dá)。使用進(jìn)口PGA支架材料,通過(guò)特定的模具成形,滴加PLA,進(jìn)行PLA/PGA支架的制作。制作比格犬半月板損傷模型:半月板前角距離前緣0.5cm處橫貫整個(gè)半月板橫徑不保留基底部、寬2mm、關(guān)節(jié)囊緣厚2mm、關(guān)節(jié)腔緣厚1.5mm的缺損,損傷區(qū)涉及紅—紅區(qū)、紅—白區(qū)與白—白區(qū)。進(jìn)行比格犬半月板損傷修復(fù)體內(nèi)分組動(dòng)物實(shí)驗(yàn):設(shè)立單純縫合組(A組)、加有hCDMP—2細(xì)胞因子的PLA/PGA支架縫合組(B組)、單純轉(zhuǎn)染慢...

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