發(fā)布時(shí)間：2023-02-23 18:32

　　目的:精神分裂癥是一種十分復(fù)雜的腦功能障礙性疾病,研究顯示其發(fā)生受到遺傳和環(huán)境的共同作用。目前,在法醫(yī)司法精神病鑒定中,對(duì)被鑒定人是否患有精神疾病仍缺乏有效的客觀指標(biāo)。它的病因涉及到多種神經(jīng)遞質(zhì)和假說,而大量的病理學(xué)和生理學(xué)證據(jù)都支持了精神分裂癥的多巴胺系統(tǒng)功能失調(diào)假說。而多巴胺受體5基因的突變可能會(huì)導(dǎo)致其與DA結(jié)合能力或表達(dá)量的改變而與許多精神疾病相關(guān)。目前為止,對(duì)DRD5基因在精神分裂癥發(fā)病機(jī)制中的作用機(jī)制仍然不明確,相關(guān)多態(tài)性在轉(zhuǎn)錄水平的研究不多。在課題組的前期研究中曾對(duì)DRD5基因中的4個(gè)SNPs與偏執(zhí)型精神分裂癥的相關(guān)性進(jìn)行了研究,發(fā)現(xiàn)rs77434921的A等位基因以及rs2076907的等位基因G可能是偏執(zhí)型精神分裂癥的危險(xiǎn)因子。為了進(jìn)一步探討DRD5基因在偏執(zhí)型精神分裂癥發(fā)病機(jī)制中的作用,本研究根據(jù)課題組前期研究成果提供的信息,分析DRD5基因5`端序列的rs77434921和rs2076907位點(diǎn)以及5`端序列對(duì)基因表達(dá)的影響,進(jìn)而探究多巴胺受體5基因與精神分裂癥的關(guān)聯(lián)。方法:1.設(shè)計(jì)帶有酶切位點(diǎn)的引物擴(kuò)增DRD5基因,包含5`端非翻譯區(qū)以及兩個(gè)SNPs在內(nèi)的-159...

【文章頁(yè)數(shù)】：46 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語(yǔ)
1 前言
2 材料和方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)樣品
        2.1.2 主要試劑
        2.1.3 主要儀器
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 目的片段擴(kuò)增
        2.2.2 PCR產(chǎn)物回收
        2.2.3 構(gòu)建PGM-T重組載體
        2.2.4 大腸桿菌的轉(zhuǎn)化及擴(kuò)大培養(yǎng)
        2.2.5 質(zhì)粒小型提取
        2.2.6 DNA序列分析
        2.2.7 構(gòu)建PGL3重組表達(dá)載體
        2.2.8 大量提取質(zhì)粒并測(cè)定濃度純度
        2.2.9 細(xì)胞培養(yǎng)及轉(zhuǎn)染
        2.2.10 雙熒光素酶報(bào)告分析
        2.2.11 單個(gè)SNP的分析
        2.2.12 DRD5基因5'端序列截短
        2.2.13 提取RNA及實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析
        2.2.14 統(tǒng)計(jì)分析
3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.1 重組載體驗(yàn)證
    3.2 雙熒光素酶報(bào)告分析
        3.2.1 兩個(gè)SNPs組成單倍型的分析
        3.2.2 單個(gè)SNP單倍型分析
        3.2.3 DRD5基因5'端序列截短片段分析
    3.3 實(shí)時(shí)定量PCR進(jìn)行mRNA水平分析
4 討論
    4.1 DRD5基因5'端序列SNP的研究
    4.2 截短載體在不同細(xì)胞系中的調(diào)控作用
    4.3 DRD5基因mRNA水平檢測(cè)
    4.4 法醫(yī)學(xué)意義
5 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評(píng)價(jià)
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷



本文編號(hào)：3748520