目的在預(yù)測可能調(diào)控Runx2表達(dá)的miRNA中,篩選出具有重力敏感性的miRNA,為失重性骨丟失的在體靶向干預(yù)提供研究靶點(diǎn)。方法通過生物信息學(xué)分析方法預(yù)測出與Runx2結(jié)合的4條miRNA;利用2D回轉(zhuǎn)器對前成骨細(xì)胞MC3T3-E1進(jìn)行模擬失重處理;向MC3T3-E1細(xì)胞中轉(zhuǎn)染miR-135a-5p mimic或inhibitor;采用qRT-PCR方法檢測miRNA及Runx2 mRNA的表達(dá)變化;采用Western blot方法檢測Runx2蛋白的表達(dá)變化。結(jié)果生物信息學(xué)預(yù)測miR-135a-5p、miR-137-3p、miR-205-5p和miR-217-5p可與Runx2結(jié)合,其中模擬失重條件下miR-135a-5p的表達(dá)可發(fā)生顯著改變。與對照組相比,模擬失重48 h后miR-135a-5p的表達(dá)明顯上調(diào),且72 h內(nèi)呈現(xiàn)穩(wěn)定上調(diào)趨勢（P<0.05）;與對照組相比,模擬失重72 h內(nèi)Runx2的mRNA和蛋白表達(dá)明顯下調(diào)（P<0.05）;轉(zhuǎn)染miR-135a-5p mimic或inhibitor后,Runx2的mRNA表達(dá)無顯著改變,Runx2的蛋白表達(dá)則分別顯著下... 

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
材料與方法
    1 材料
    2 細(xì)胞培養(yǎng)
    3 模擬失重
    4 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
    5 實(shí)時(shí)熒光定量PCR
    6 Western blot檢測
    7 生物信息學(xué)方法
    8 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
結(jié) 果
    1 生物信息學(xué)預(yù)測與Runx2具有結(jié)合位點(diǎn)的4條miRNA
    2 模擬失重條件下MC3T3-E1細(xì)胞miRNA的表達(dá)變化
    3 模擬失重72 h內(nèi)MC3T3-E1細(xì)胞miR-135a-5p表達(dá)變化
    4 模擬失重72 h內(nèi)miR-135a-5p與Runx2的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)
    5 miR-135a-5p可調(diào)控Runx2的蛋白表達(dá)
    6 miR-135a-5p可部分緩解模擬失重條件Runx2的表達(dá)降低
討 論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]miR-132-3p靶向的重力敏感長鏈非編碼RNAs的篩選及調(diào)控探討[J]. 王可,胡澤兵,王藝璇,張麗君,曹新生,石菲,張舒.  解放軍醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2018(05)
[2]模擬微重力通過調(diào)節(jié)AKT磷酸化抑制前成骨細(xì)胞的增殖[J]. 周驊,曹新生,胡澤兵,王瀚,王藝璇,張舒.  現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2017(02)
[3]絲裂原活化蛋白激酶與骨重建平衡的研究進(jìn)展[J]. 方清清,李志忠,陳克明.  解放軍醫(yī)藥雜志. 2016(10)



本文編號：3652007