目的:研究IL-37對(duì)A549細(xì)胞的生長(zhǎng)及放射敏感性的影響,并初步研究相關(guān)作用機(jī)制,探討IL-37作為新型放射增敏劑的可能性。方法:選用人肺腺癌A549作為研究對(duì)象,通過應(yīng)用重組人白介素-37（rh IL-37）及腺病毒介導(dǎo)IL-37（Ad-IL-37）研究IL-37對(duì)A549細(xì)胞生長(zhǎng)及其對(duì)放射敏感性影響的情況。（1）流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)不同放射劑量對(duì)A549細(xì)胞的影響,選擇合適放射劑量;（2）應(yīng)用Ad-IL-37轉(zhuǎn)染A549細(xì)胞,應(yīng)用Western Blot檢測(cè)其在A549細(xì)胞中的表達(dá);（3）四甲基偶氮唑鹽比色法（MTT）檢測(cè)IL-37（rh IL-37及Ad-IL-37）對(duì)人肺腺癌A549細(xì)胞及聯(lián)合照射組A549細(xì)胞生長(zhǎng)增殖情況的影響;（4）流式細(xì)胞術(shù)觀察IL-37（rh IL-37及Ad-IL-37）對(duì)A549細(xì)胞凋亡率及細(xì)胞周期的影響;（5）Western Blot檢測(cè)IL-37對(duì)細(xì)胞凋亡基因及蛋白的影響;（6）RT-PCR檢測(cè)IL-37對(duì)A549細(xì)胞凋亡相關(guān)基因表達(dá)的影響;（7）Western Blot檢測(cè)IL-37對(duì)A549細(xì)胞PI3K/AKT通路相關(guān)蛋白及基因的表達(dá)。結(jié)果:（1... 

【文章來源】：青島大學(xué)山東省

【文章頁(yè)數(shù)】：61 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

不同放射劑量下細(xì)胞凋亡情況（選擇4Gy為本實(shí)驗(yàn)的放射劑量）

青島大學(xué)碩士學(xué)位論文1624KD處呈現(xiàn)明顯的特異性條帶（P＜0.05），而其他兩組該條帶明顯較弱，證明IL-37在A549細(xì)胞中成功轉(zhuǎn)染并表達(dá)。ABC圖2A空病毒組熒光情況BIL-37組熒光情況CIL-37在A549細(xì)胞中的表達(dá)（*IL-37組IL-37蛋白表達(dá)較對(duì)照組差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05））。3MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖情況3.1應(yīng)用MTT法檢測(cè)不同濃度rhIL-37對(duì)A549細(xì)胞增殖的影響，結(jié)果顯示，rhIL-37在10ng/mL時(shí)對(duì)細(xì)胞的OD值無明顯影響，在該濃度下rhIL-37對(duì)A549細(xì)胞生長(zhǎng)增殖無明顯影響，但在100ng及200ng/mL時(shí)，rhIL-37組較對(duì)照組在24h時(shí)各組OD值差異無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＝0.84，0.60，均＞0.05），在48h，72h，96h，120h時(shí)較對(duì)照組OD值具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）（見表2），24h時(shí)各組細(xì)胞抑制率比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＝0.42，＞0.05），48h后各組細(xì)胞抑制率差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）（見表3），因此后續(xù)實(shí)驗(yàn)選擇100ng/mL為本實(shí)驗(yàn)的濃度。表2不同rh-IL37濃度下人A549細(xì)胞不同時(shí)間吸光度值變化情況（SX）

實(shí)驗(yàn)結(jié)果17組別樣本數(shù)24h48h72h96h120h對(duì)照組30.84±0.071.12±0.041.57±0.142.12±0.121.86±0.0610ng/mL組30.81±0.041.06±0.021.56±0.042.03±0.11.77±0.06100ng/mL組30.82±0.020.97±0.05*1.30±0.09*1.68±0.08*1.42±0.09*200ng/mL組30.84±0.080.86±0.07*1.14±0.05*1.46±0.11*1.32±0.05**較對(duì)照組差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.05圖3不同rhIL-37濃度下對(duì)A549細(xì)胞OD值影響表3不同rh-IL37濃度下人A549細(xì)胞不同時(shí)間細(xì)胞抑制率變化情況（SX，%）組別樣本數(shù)24h48h72h96h120h0ng/mL組30000010ng/mL組31.99±1.832.63±0.232.96±1.873.42±1.043.67±0.384100ng/mL組31.96±0.988.32±7.04*12.08±7.72*15.89±0.09*19.38±0.29*200ng/mL組31.32±0.4710.82±7.24*17.71±4.69*20.66±9.78*24.32±5.67*注：*較對(duì)照組差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.053.2應(yīng)用MTT法檢測(cè)rhIL-37對(duì)A549細(xì)胞生長(zhǎng)情況的影響，將細(xì)胞分為4組（對(duì)照組、rhIL-37組（100ng/mL）、單純照射組、rhIL-37+照射組），實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，在24h時(shí)各組OD值及抑制率各組間差異無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＝0.79，＞0.05），在48h，72h，96h，120h時(shí)rhIL-37組、照射組、rhIL-37+照射組的OD值及抑制率較對(duì)照組差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，同時(shí)，rhIL-37+照射組較照射組差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）（見表4，5）。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]IL-37抑制體外培養(yǎng)的SMMC-7721肝癌細(xì)胞的增殖、侵襲和遷移[J]. 張國(guó)慶,湯成泳,譚婧宇,劉銳,周密,吳忠均.  細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2015(10)



本文編號(hào)：3567778