第一部分慢性阻塞性肺疾病大鼠動(dòng)物模型的建立與評(píng)價(jià)目的使用煙熏、蛋白酶滴注及兩者相結(jié)合的方法成功構(gòu)建大鼠COPD模型,并從炎癥水平,影像及病理多方面對(duì)模型進(jìn)行評(píng)價(jià)。方法使用煙熏、蛋白酶滴注及兩者相結(jié)合的方法進(jìn)行COPD大鼠造模,每組大鼠分別為60只、30只、30只。同時(shí)設(shè)置對(duì)照組20只。每周對(duì)大鼠進(jìn)行體重測(cè)量。煙熏組及對(duì)照組于造模24h,1、2、4、8、12、16、20、24周各處理大鼠5只及2只,蛋白酶組及蛋白酶+煙熏組于造模24h,1、2、4、8、12周處理大鼠各5只。所處理大鼠分別接受細(xì)胞因子檢測(cè)、Micro-CT檢查及病理檢查。結(jié)果第7周起煙熏組大鼠及蛋白酶+煙熏組大鼠體重增長(zhǎng)較對(duì)照組明顯減緩（P<0.05）。蛋白酶組及蛋白酶+煙熏組大鼠24h、1、2、4周IL-10水平顯著低于對(duì)照組（P<0.05）。蛋白酶組及蛋白酶+煙熏組第24h的MMP-9濃度顯著大于對(duì)照組（P<0.05）。蛋白酶組、蛋白酶+煙熏組第4周及煙熏組第8周在Micro-CT圖像及病理圖像上均可觀察到肺氣腫改變。結(jié)論使用煙熏、蛋白酶及蛋白酶+煙熏的方法均可成功構(gòu)建大鼠COPD模型。Micro-C... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)人民解放軍海軍軍醫(yī)大學(xué)上海市 211工程院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

煙熏箱

圖 1 煙熏箱采取 煙熏組于煙熏 24h，1、2、4、8、12、16、20、組于對(duì)應(yīng)時(shí)間處理大鼠各 2 只，蛋白酶+煙熏組于煙熏 大鼠各 5 只，蛋白酶組于相應(yīng)時(shí)間處理大鼠各 5 只。具比妥鈉液，以 40mg/kg 劑量腹腔麻醉。麻醉完全后，切并于吸氣末結(jié)扎。打開(kāi)大鼠腹腔，在不損傷肺的情況下氣管并分離肺臟。經(jīng)氣管向兩側(cè)肺內(nèi)反復(fù)緩慢注入并抽進(jìn)行支氣管肺泡灌洗。經(jīng)氣管向兩側(cè)肺緩慢注入 4％多聚主支氣管。取出的肺標(biāo)本用 4％多聚甲醛溶液固定 48h甲醛固定后，分別置于 35%（2.5 小時(shí)），50%（2 小時(shí)2 小時(shí)），90%（1.5 小時(shí)），95%（1 小時(shí)次，共 2 次）， 2 次 12 小時(shí)，共 2 次）酒精中進(jìn)行梯度脫水。

圖 3 脫水后的干燥肺標(biāo)本標(biāo)本處理 標(biāo)本脫水后自然風(fēng)干，行 Micro-CT 檢查。采用 Micro-CT（ 瑞士），掃描參數(shù)為管電壓 70kV,管電流 144μA,分辨率 18μm。未包埋后，每個(gè)肺葉選取 3 張切片，行 HE 染色鏡下觀察。灌洗液 1500r/min 離心 10min，留取上清液。上清液-80℃凍存，采 MMP-9 ELISA 試劑盒（深圳欣博盛生物科技有限公司）檢測(cè)細(xì)胞因水平。體重測(cè)量 每周測(cè)量大鼠體重，監(jiān)測(cè)各組大鼠體重動(dòng)態(tài)變化規(guī)律。五）統(tǒng)計(jì)方法 SPSS 21.0 軟件。比較組間體重及細(xì)胞因子差異時(shí)，若數(shù)據(jù)分布符用方差分析；否則采用 Kruskal-Wallis H 檢驗(yàn)。以 P<0．05 為差異

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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