第一部分慢性阻塞性肺疾病大鼠動物模型的建立與評價目的使用煙熏、蛋白酶滴注及兩者相結(jié)合的方法成功構(gòu)建大鼠COPD模型,并從炎癥水平,影像及病理多方面對模型進行評價。方法使用煙熏、蛋白酶滴注及兩者相結(jié)合的方法進行COPD大鼠造模,每組大鼠分別為60只、30只、30只。同時設(shè)置對照組20只。每周對大鼠進行體重測量。煙熏組及對照組于造模24h,1、2、4、8、12、16、20、24周各處理大鼠5只及2只,蛋白酶組及蛋白酶+煙熏組于造模24h,1、2、4、8、12周處理大鼠各5只。所處理大鼠分別接受細胞因子檢測、Micro-CT檢查及病理檢查。結(jié)果第7周起煙熏組大鼠及蛋白酶+煙熏組大鼠體重增長較對照組明顯減緩（P<0.05）。蛋白酶組及蛋白酶+煙熏組大鼠24h、1、2、4周IL-10水平顯著低于對照組（P<0.05）。蛋白酶組及蛋白酶+煙熏組第24h的MMP-9濃度顯著大于對照組（P<0.05）。蛋白酶組、蛋白酶+煙熏組第4周及煙熏組第8周在Micro-CT圖像及病理圖像上均可觀察到肺氣腫改變。結(jié)論使用煙熏、蛋白酶及蛋白酶+煙熏的方法均可成功構(gòu)建大鼠COPD模型。Micro-C... 

【文章來源】：中國人民解放軍海軍軍醫(yī)大學(xué)上海市 211工程院校

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【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

煙熏箱

圖 1 煙熏箱采取 煙熏組于煙熏 24h，1、2、4、8、12、16、20、組于對應(yīng)時間處理大鼠各 2 只，蛋白酶+煙熏組于煙熏 大鼠各 5 只，蛋白酶組于相應(yīng)時間處理大鼠各 5 只。具比妥鈉液，以 40mg/kg 劑量腹腔麻醉。麻醉完全后，切并于吸氣末結(jié)扎。打開大鼠腹腔，在不損傷肺的情況下氣管并分離肺臟。經(jīng)氣管向兩側(cè)肺內(nèi)反復(fù)緩慢注入并抽進行支氣管肺泡灌洗。經(jīng)氣管向兩側(cè)肺緩慢注入 4％多聚主支氣管。取出的肺標本用 4％多聚甲醛溶液固定 48h甲醛固定后，分別置于 35%（2.5 小時），50%（2 小時2 小時），90%（1.5 小時），95%（1 小時次，共 2 次）， 2 次 12 小時，共 2 次）酒精中進行梯度脫水。

圖 3 脫水后的干燥肺標本標本處理 標本脫水后自然風(fēng)干，行 Micro-CT 檢查。采用 Micro-CT（ 瑞士），掃描參數(shù)為管電壓 70kV,管電流 144μA,分辨率 18μm。未包埋后，每個肺葉選取 3 張切片，行 HE 染色鏡下觀察。灌洗液 1500r/min 離心 10min，留取上清液。上清液-80℃凍存，采 MMP-9 ELISA 試劑盒（深圳欣博盛生物科技有限公司）檢測細胞因水平。體重測量 每周測量大鼠體重，監(jiān)測各組大鼠體重動態(tài)變化規(guī)律。五）統(tǒng)計方法 SPSS 21.0 軟件。比較組間體重及細胞因子差異時，若數(shù)據(jù)分布符用方差分析；否則采用 Kruskal-Wallis H 檢驗。以 P<0．05 為差異

【參考文獻】：
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