炎癥激活骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞條件培養(yǎng)基對體外輻射損傷小腸上皮細(xì)胞的修復(fù)作用和機(jī)制研究
發(fā)布時(shí)間:2021-11-11 23:44
背景輻射性小腸損傷多發(fā)生于腹腔、盆腔惡性腫瘤放射治療后,臨床表現(xiàn)為腹痛、腹瀉、血便、營養(yǎng)不良,嚴(yán)重可出現(xiàn)膿毒血癥、感染性休克等危及生命的并發(fā)癥,嚴(yán)重影響腫瘤患者的生存質(zhì)量。然而,對于輻射性小腸損傷,目前仍無理想的治療方法。間充質(zhì)干細(xì)胞具有強(qiáng)大的自身分化及旁分泌能力,廣泛用于組織損傷修復(fù)。間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基(conditioned medium from mesenchymal stem cells,MSC-CM)富含間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells,MSCs)旁分泌的生物活性因子,且無干細(xì)胞移植的風(fēng)險(xiǎn),是干細(xì)胞移植的理想替代方案。課題組前期研究表明炎癥預(yù)激活的間充質(zhì)干細(xì)胞條件培養(yǎng)基能促進(jìn)輻射損傷小腸組織學(xué)結(jié)構(gòu)和功能的修復(fù),改善急性輻射損傷大鼠生存狀態(tài),但其潛在的細(xì)胞機(jī)制未進(jìn)一步探討。目的明確不同狀態(tài)MSC-CM對小腸上皮細(xì)胞(IEC-6)增殖、凋亡的影響及探討相關(guān)旁分泌機(jī)制,為優(yōu)化MSC-CM的臨床應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)和實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。方法1.小腸隱窩IEC-6細(xì)胞分為對照組、輻射損傷組、輻射損傷+MSC-CMIEC-6(NOR)組和輻射損傷+MSC-CMIEC-6(...
【文章來源】:南方醫(yī)科大學(xué)廣東省
【文章頁數(shù)】:68 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
圖1各實(shí)驗(yàn)組IEC-6細(xì)胞在輻射處理后不同時(shí)間段活細(xì)胞計(jì)數(shù)情況??
IEC-6細(xì)胞的PCNA陽性細(xì)胞數(shù)明顯增加,差異有顯著性意義(P<?0.05);??而輻射損傷+MSC-CMiec%6(nqr>組PCNA陽性細(xì)胞數(shù)比輻射損傷組雖然有所增加,??但未達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,見圖2。??A?PCNA?DAPI?Merge??i?:?|?-V'.'"'.?;?I;?;:.^?I?I對照結(jié)??對照組?翻員傷組??[;5;"1-,_-?;;?|?j[?「iM|?_德1?輻射損傷+MSC-CMIEI^_■組??B?^■福射損傷+MSC-CMIEC-?<iR>m??BK|HhH?■??|?;.?.?賴)|?I?二顏擊顏11.,?f?翻爾:。?■?i〇〇??MSC-??';'n>,r>^h??MBMMiBMBjM?20?|??¥i^^+MSC-P:?i??圖2:?MSC-CMIEe_6(IR)促進(jìn)輻射損傷IEC-6增殖??Fig?2?MSC-CMiec?_6(IR)?increases?the?proliferation?of?intestinal?epithelial?cells?after?radiation??injury??圖注.?圖2?(A)為輻射損傷后第三天各組IEC-6細(xì)胞PCNA染色情況,標(biāo)尺為50網(wǎng)。??圖2(B)為PCNA陽性細(xì)胞數(shù)目,每個(gè)孔隨機(jī)觀察10個(gè)視野,每一組重復(fù)3個(gè)孔。統(tǒng)計(jì)平均??每個(gè)視野的陽性細(xì)胞數(shù),與輻射損傷組比,><〇.〇5;與輻射損傷+MSC-CM1Ee_6(NC)R>組比,??1,尸<0.05〇??2.3原位末端標(biāo)記法(Tunel)及Western?Blot法檢測細(xì)胞凋亡??2
未見統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(戶>0.05)。\\^沉1181〇1;檢測顯不,福射損傷組#Γ悼冢常常叮常?車鞍祝崳?表達(dá)水平較對照組顯著升高(P<〇.〇5),輻射損傷+MSC-CMIEe'6(IR>S,而非輻射??損傷+MSC-CMIEe■6(INGR>組,Caspases-3蛋白表達(dá)較輻射損傷組顯著降低,差異??有顯著性意義(F<?0.05),見圖3。??A?Tunel?DAPI?Merge??■■■??■■?■腳;+Msc-cM__m??,■:?j?。??S?^?I'?'?;?v.?(?J?j|?B??f>?-MSC-CM1?'??|j|^E^^QJ|?|?15??*??MSC-CM'"?'?*?I?■?|?^?:E?;?^"'j|?I?’.’If?I?_??-*??MSC-CM1?丨,■丨丨■?1?r-?|?r?;?jj???V??i;,?fi..?H?¥MW^:^+MSC-CMiec'6<nor,?1I??C?CMiec?丄,CMlfci,、IK::?D?■?■?1?’?’SCCM??T??Caspase-3?^?一州‘彳????。辏撸欤欤??圖3?MSC-CMIEe_6(IR_制輻射損傷IEC-6細(xì)胞凋亡??Fig3?MSC-CMiec"6(IR)?reduces?the?
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]炎癥誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞條件培養(yǎng)基修復(fù)急性輻射引起的小腸上皮干細(xì)胞損傷[J]. 馬發(fā)鑫,沙衛(wèi)紅,王啟儀,李金亮,盧銓,駱昱均. 中國組織工程研究. 2019(09)
[2]炎癥激活骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞條件培養(yǎng)基對輻射損傷IEC-6細(xì)胞的修復(fù)[J]. 李金亮,駱昱均,馬發(fā)鑫,鄭躍,盧銓,周偉杰,張宸,沙衛(wèi)紅,陳浩. 中國組織工程研究. 2019(05)
[3]間充質(zhì)干細(xì)胞在器官移植中的應(yīng)用研究進(jìn)展[J]. 曲澤澎,賈兆鋒,黃曦,蔡志明,牟麗莎. 器官移植. 2018(05)
[4]間充質(zhì)干細(xì)胞移植促進(jìn)放射性腸損傷腸絨毛的結(jié)構(gòu)修復(fù)[J]. 王彥,郭夢征,徐暢,杜利清,龔偉,劉強(qiáng). 重慶醫(yī)學(xué). 2018(17)
[5]缺氧誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞條件培養(yǎng)基體外修復(fù)輻射損傷小腸上皮細(xì)胞變化[J]. 鄭躍,陳浩,沙衛(wèi)紅,王啟儀,劉婉薇. 中國組織工程研究. 2015(45)
[6]谷氨酰胺對新生鼠壞死性小腸結(jié)腸炎增殖細(xì)胞核抗原的影響[J]. 鄧慶先,賀湘英,黃永坤,文革生,袁新華,林梅芳,富琴琴,蔣琦. 臨床兒科雜志. 2015(03)
[7]炎癥預(yù)激活骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞條件培養(yǎng)基修復(fù)小腸黏膜急性輻射損傷[J]. 劉婉薇,陳韻,鄭躍,沙衛(wèi)紅,王啟儀,葉山亮,陳浩. 中國組織工程研究. 2015(10)
[8]New insights for pelvic radiation disease treatment:Multipotent stromal cell is a promise mainstay treatment for the restoration of abdominopelvic severe chronic damages induced by radiotherapy[J]. Alain Chapel,Sabine Francois,Marc Benderitter,Luc Douay,Jan Voswinkel. World Journal of Stem Cells. 2013(04)
[9]放射性腸炎發(fā)生機(jī)制的研究進(jìn)展[J]. 李榮富,孫濤. 醫(yī)學(xué)綜述. 2011(02)
[10]IL-2對輻射損傷后小腸上皮細(xì)胞生長影響的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 付凱飛,彭瑞云,高亞兵,王德文,羅慶良,楊怡,董波. 細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2005(02)
本文編號:3489771
【文章來源】:南方醫(yī)科大學(xué)廣東省
【文章頁數(shù)】:68 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
圖1各實(shí)驗(yàn)組IEC-6細(xì)胞在輻射處理后不同時(shí)間段活細(xì)胞計(jì)數(shù)情況??
IEC-6細(xì)胞的PCNA陽性細(xì)胞數(shù)明顯增加,差異有顯著性意義(P<?0.05);??而輻射損傷+MSC-CMiec%6(nqr>組PCNA陽性細(xì)胞數(shù)比輻射損傷組雖然有所增加,??但未達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,見圖2。??A?PCNA?DAPI?Merge??i?:?|?-V'.'"'.?;?I;?;:.^?I?I對照結(jié)??對照組?翻員傷組??[;5;"1-,_-?;;?|?j[?「iM|?_德1?輻射損傷+MSC-CMIEI^_■組??B?^■福射損傷+MSC-CMIEC-?<iR>m??BK|HhH?■??|?;.?.?賴)|?I?二顏擊顏11.,?f?翻爾:。?■?i〇〇??MSC-??';'n>,r>^h??MBMMiBMBjM?20?|??¥i^^+MSC-P:?i??圖2:?MSC-CMIEe_6(IR)促進(jìn)輻射損傷IEC-6增殖??Fig?2?MSC-CMiec?_6(IR)?increases?the?proliferation?of?intestinal?epithelial?cells?after?radiation??injury??圖注.?圖2?(A)為輻射損傷后第三天各組IEC-6細(xì)胞PCNA染色情況,標(biāo)尺為50網(wǎng)。??圖2(B)為PCNA陽性細(xì)胞數(shù)目,每個(gè)孔隨機(jī)觀察10個(gè)視野,每一組重復(fù)3個(gè)孔。統(tǒng)計(jì)平均??每個(gè)視野的陽性細(xì)胞數(shù),與輻射損傷組比,><〇.〇5;與輻射損傷+MSC-CM1Ee_6(NC)R>組比,??1,尸<0.05〇??2.3原位末端標(biāo)記法(Tunel)及Western?Blot法檢測細(xì)胞凋亡??2
未見統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(戶>0.05)。\\^沉1181〇1;檢測顯不,福射損傷組#Γ悼冢常常叮常?車鞍祝崳?表達(dá)水平較對照組顯著升高(P<〇.〇5),輻射損傷+MSC-CMIEe'6(IR>S,而非輻射??損傷+MSC-CMIEe■6(INGR>組,Caspases-3蛋白表達(dá)較輻射損傷組顯著降低,差異??有顯著性意義(F<?0.05),見圖3。??A?Tunel?DAPI?Merge??■■■??■■?■腳;+Msc-cM__m??,■:?j?。??S?^?I'?'?;?v.?(?J?j|?B??f>?-MSC-CM1?'??|j|^E^^QJ|?|?15??*??MSC-CM'"?'?*?I?■?|?^?:E?;?^"'j|?I?’.’If?I?_??-*??MSC-CM1?丨,■丨丨■?1?r-?|?r?;?jj???V??i;,?fi..?H?¥MW^:^+MSC-CMiec'6<nor,?1I??C?CMiec?丄,CMlfci,、IK::?D?■?■?1?’?’SCCM??T??Caspase-3?^?一州‘彳????。辏撸欤欤??圖3?MSC-CMIEe_6(IR_制輻射損傷IEC-6細(xì)胞凋亡??Fig3?MSC-CMiec"6(IR)?reduces?the?
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]炎癥誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞條件培養(yǎng)基修復(fù)急性輻射引起的小腸上皮干細(xì)胞損傷[J]. 馬發(fā)鑫,沙衛(wèi)紅,王啟儀,李金亮,盧銓,駱昱均. 中國組織工程研究. 2019(09)
[2]炎癥激活骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞條件培養(yǎng)基對輻射損傷IEC-6細(xì)胞的修復(fù)[J]. 李金亮,駱昱均,馬發(fā)鑫,鄭躍,盧銓,周偉杰,張宸,沙衛(wèi)紅,陳浩. 中國組織工程研究. 2019(05)
[3]間充質(zhì)干細(xì)胞在器官移植中的應(yīng)用研究進(jìn)展[J]. 曲澤澎,賈兆鋒,黃曦,蔡志明,牟麗莎. 器官移植. 2018(05)
[4]間充質(zhì)干細(xì)胞移植促進(jìn)放射性腸損傷腸絨毛的結(jié)構(gòu)修復(fù)[J]. 王彥,郭夢征,徐暢,杜利清,龔偉,劉強(qiáng). 重慶醫(yī)學(xué). 2018(17)
[5]缺氧誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞條件培養(yǎng)基體外修復(fù)輻射損傷小腸上皮細(xì)胞變化[J]. 鄭躍,陳浩,沙衛(wèi)紅,王啟儀,劉婉薇. 中國組織工程研究. 2015(45)
[6]谷氨酰胺對新生鼠壞死性小腸結(jié)腸炎增殖細(xì)胞核抗原的影響[J]. 鄧慶先,賀湘英,黃永坤,文革生,袁新華,林梅芳,富琴琴,蔣琦. 臨床兒科雜志. 2015(03)
[7]炎癥預(yù)激活骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞條件培養(yǎng)基修復(fù)小腸黏膜急性輻射損傷[J]. 劉婉薇,陳韻,鄭躍,沙衛(wèi)紅,王啟儀,葉山亮,陳浩. 中國組織工程研究. 2015(10)
[8]New insights for pelvic radiation disease treatment:Multipotent stromal cell is a promise mainstay treatment for the restoration of abdominopelvic severe chronic damages induced by radiotherapy[J]. Alain Chapel,Sabine Francois,Marc Benderitter,Luc Douay,Jan Voswinkel. World Journal of Stem Cells. 2013(04)
[9]放射性腸炎發(fā)生機(jī)制的研究進(jìn)展[J]. 李榮富,孫濤. 醫(yī)學(xué)綜述. 2011(02)
[10]IL-2對輻射損傷后小腸上皮細(xì)胞生長影響的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 付凱飛,彭瑞云,高亞兵,王德文,羅慶良,楊怡,董波. 細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2005(02)
本文編號:3489771
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