目的研究大鼠骨骼肌損傷后BECN1、LC3和p62三種自噬相關(guān)蛋白的表達(dá),探討其在鑒別生前與死后損傷中的應(yīng)用。方法 72只健康成年Sprague-Dawley大鼠被隨機(jī)分為未損傷的對照組、生前損傷組（0.5、1、2、4、8、16和24 h）和死后損傷組（0.5、1、2和4 h）,制作大鼠右后肢損傷模型。運(yùn)用Western印跡法檢測對照組、生前損傷組以及死后損傷組骨骼肌中自噬蛋白BECN1、LC3-2/LC3-1和p62的表達(dá),分別將數(shù)據(jù)中心化和標(biāo)準(zhǔn)化處理,建立生前損傷和死后損傷正交偏最小二乘判別分析（orthogonal partial least square-discriminate analysis,OPLS-DA）鑒別模型。結(jié)果大鼠骨骼肌挫傷后BECN1、p62蛋白的表達(dá)以及LC3-2/LC3-1值在生前損傷和死后損傷組中雖有不同程度的變化,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。BECN1的表達(dá)量及LC3-2/LC3-1值經(jīng)中心化和標(biāo)準(zhǔn)化處理后,可區(qū)分生前損傷和死后損傷。生前損傷和死后損傷OPLSDA模型提取的主成分對模型的解釋程度較好（Rx2=0.563,Ry2=0.439）,但預(yù)測程度稍差（... 

【文章來源】：法醫(yī)學(xué)雜志. 2020,36(03)CSCD

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

大鼠骨骼肌生前損傷和死后損傷的OPLS-DA模型

Western印跡法分別檢測生前損傷組、對照組和死后損傷組大鼠骨骼肌中自噬相關(guān)蛋白的相對表達(dá)量（圖1、表1）。結(jié)果顯示，BECN1、p62蛋白表達(dá)量及LC3-2/LC3-1值在生前損傷和死后損傷的肌肉組織中雖有不同程度的變化，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。由此說明，依據(jù)傳統(tǒng)的數(shù)據(jù)處理方法，無法滿足生前損傷和死后損傷的鑒別。2.2 自噬相關(guān)蛋白BECN1和LC3-2/LC3-1值數(shù)據(jù)中心化

本研究用BECN1和LC3-2/LC3-1值兩個(gè)變量建立了有監(jiān)督的OPLS-DA以區(qū)分生前損傷和死后損傷（圖3）。用3個(gè)指標(biāo)（BECN1、p62相對表達(dá)量及LC3-2/LC3-1值）在所有樣本中的數(shù)值建立區(qū)分生前損傷和死后損傷的OPLS-DA模型（圖3A），提取出兩個(gè)主成分（圖3B），其Rx2=0.563、Ry2=0.439、Q2=0.366。200次響應(yīng)排序檢驗(yàn)（圖3C）以檢測模型是否發(fā)生了過擬合，如圖3C所示，回歸線與Y軸的交點(diǎn)在0以上，而擬合線與Y軸的焦點(diǎn)在0以下，并且兩直線相交于第一象限，表明模型未發(fā)生過擬合。圖3 大鼠骨骼肌生前損傷和死后損傷的OPLS-DA模型

【參考文獻(xiàn)】：
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