背景放射性肺損傷（radiation-induced lung injury,RILI）常發(fā)生在肺癌,乳腺癌等胸部腫瘤患者放療后。嚴重放射性肺炎患者死亡率約為50%。天然藥物,生物試劑等能減少肺內自由基、穩(wěn)定DNA結構,已被用于預防和治療RILI。然而,它們具有半衰期短,易降解的特點,副作用多。目前,雖然肺移植是治療放射性肺纖維化最有效的干預措施,但由于缺乏可用的捐贈肺和移植并發(fā)癥多等,臨床應用較少。越來越多研究表明,間充質干細胞外泌體miRNAs是重要的細胞外通訊器,具有介導再生和免疫調節(jié)作用,能減少受損組織的炎癥和纖維化。目的為了研究人臍帶間充質干細胞（hUCMSCs）外泌體運輸miR-340減輕放射肺損傷的作用機制,進一步明確miRNA修飾的間充質干細胞外泌體（MEX）在治療RILI中的抗炎能力,為其成為一種安全,有效的無細胞治療方案奠定基礎。方法首先利用生物信息學Target Scan,miRanda數(shù)據(jù)庫預測miR-340與TLR4基因3-’UTR序列結合的可能性,用雙熒光素酶實驗檢測miR-340與TLR4的3-’UTR結合的能力,用RT-PCR和Western blot實... 

【文章來源】：新鄉(xiāng)醫(yī)學院河南省

【文章頁數(shù)】：76 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

miR-340調控TLR4的基因結合序列及實驗原理

新鄉(xiāng)醫(yī)學院碩士學位論文18圖2.miR-340以TLR4的3"-UTR為靶向抑制TLR4及其下游靶蛋白的磷酸化水平Figure2.miR-340targetedthe3"-UTRofTLR4toinhibitsTLR4expressionanditsdownstreamtargetproteinphosphorylation4.討論大量研究表明，TLR4/NF-κB是常見的炎癥信號通路，在治療肺癌，乳腺癌，胸腺癌等胸部腫瘤時，放療可以激活TLR4/NF-κB信號通路，進而激活炎癥細胞釋放TGF-β，TNF-α，IL-1β，IL-6，IFN-γ等炎癥因子，引起肺部炎癥反應。為探究放療對肺損傷的具體激活機制，我們通過對RAW264.7細胞和293T細胞進行熒光素酶實驗和Westernblot實驗得出miR-340以TLR4的3"-UTR為靶向，抑制TLR4的表達及其下游靶蛋白的磷酸化水平（P-P65），這一結果不僅驗證了我們的猜測，也為我們后續(xù)第三部分研究MEX-miR-340對RILI治療機制做了理論基矗有利于我們

新鄉(xiāng)醫(yī)學院碩士學位論文26圖3.鑒定未分化的hUCMSCs和成脂、成骨、成軟骨潛能Figure3.IdentifytheundifferentiatedhUCMSCsandtheirLipogenic,osteogenicandchondrogenicpotential圖4.流式細胞術分析hUCMSCs表面標志物的表型Figure4.PhenotypeanalysisofhUCMSCssurfacemarkersbyflowcytometry3.2hUCMSCs外泌體的特性透射電鏡觀察hUCMSCs外泌體的主要形態(tài)為圓形囊泡大小主要在30~100m之

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Mesenchymal stem cells-derived exosomal microRNAs contribute to wound inflammation[J]. Dongdong Ti,Haojie Hao,Xiaobing Fu,Weidong Han.  Science China（Life Sciences）. 2016(12)
[2]Challenges in animal modelling of mesenchymal stromal cell therapy for inflammatory bowel disease[J]. Raghavan Chinnadurai,Spencer Ng,Vijayakumar Velu,Jacques Galipeau.  World Journal of Gastroenterology. 2015(16)
[3]放射性肺損傷防護的研究進展[J]. 毛艷,劉文其.  腫瘤. 2012(05)



本文編號：3476825