背景放射性肺損傷（radiation-induced lung injury,RILI）常發(fā)生在肺癌,乳腺癌等胸部腫瘤患者放療后。嚴(yán)重放射性肺炎患者死亡率約為50%。天然藥物,生物試劑等能減少肺內(nèi)自由基、穩(wěn)定DNA結(jié)構(gòu),已被用于預(yù)防和治療RILI。然而,它們具有半衰期短,易降解的特點(diǎn),副作用多。目前,雖然肺移植是治療放射性肺纖維化最有效的干預(yù)措施,但由于缺乏可用的捐贈肺和移植并發(fā)癥多等,臨床應(yīng)用較少。越來越多研究表明,間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體miRNAs是重要的細(xì)胞外通訊器,具有介導(dǎo)再生和免疫調(diào)節(jié)作用,能減少受損組織的炎癥和纖維化。目的為了研究人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞（hUCMSCs）外泌體運(yùn)輸miR-340減輕放射肺損傷的作用機(jī)制,進(jìn)一步明確miRNA修飾的間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體（MEX）在治療RILI中的抗炎能力,為其成為一種安全,有效的無細(xì)胞治療方案奠定基礎(chǔ)。方法首先利用生物信息學(xué)Target Scan,miRanda數(shù)據(jù)庫預(yù)測miR-340與TLR4基因3-’UTR序列結(jié)合的可能性,用雙熒光素酶實(shí)驗(yàn)檢測miR-340與TLR4的3-’UTR結(jié)合的能力,用RT-PCR和Western blot實(shí)... 

【文章來源】：新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院河南省

【文章頁數(shù)】：76 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

miR-340調(diào)控TLR4的基因結(jié)合序列及實(shí)驗(yàn)原理

新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文18圖2.miR-340以TLR4的3"-UTR為靶向抑制TLR4及其下游靶蛋白的磷酸化水平Figure2.miR-340targetedthe3"-UTRofTLR4toinhibitsTLR4expressionanditsdownstreamtargetproteinphosphorylation4.討論大量研究表明，TLR4/NF-κB是常見的炎癥信號通路，在治療肺癌，乳腺癌，胸腺癌等胸部腫瘤時，放療可以激活TLR4/NF-κB信號通路，進(jìn)而激活炎癥細(xì)胞釋放TGF-β，TNF-α，IL-1β，IL-6，IFN-γ等炎癥因子，引起肺部炎癥反應(yīng)。為探究放療對肺損傷的具體激活機(jī)制，我們通過對RAW264.7細(xì)胞和293T細(xì)胞進(jìn)行熒光素酶實(shí)驗(yàn)和Westernblot實(shí)驗(yàn)得出miR-340以TLR4的3"-UTR為靶向，抑制TLR4的表達(dá)及其下游靶蛋白的磷酸化水平（P-P65），這一結(jié)果不僅驗(yàn)證了我們的猜測，也為我們后續(xù)第三部分研究MEX-miR-340對RILI治療機(jī)制做了理論基矗有利于我們

新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文26圖3.鑒定未分化的hUCMSCs和成脂、成骨、成軟骨潛能Figure3.IdentifytheundifferentiatedhUCMSCsandtheirLipogenic,osteogenicandchondrogenicpotential圖4.流式細(xì)胞術(shù)分析hUCMSCs表面標(biāo)志物的表型Figure4.PhenotypeanalysisofhUCMSCssurfacemarkersbyflowcytometry3.2hUCMSCs外泌體的特性透射電鏡觀察hUCMSCs外泌體的主要形態(tài)為圓形囊泡大小主要在30~100m之

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3476825