一、研究背景間充質(zhì)干細(xì)胞（Mesenchymal stem cell,MSC）可以從多種組織器官分離得到,包括骨髓、皮膚、血管、脂肪甚至是多能間質(zhì)干細(xì)胞異質(zhì)群體。MSC在高強(qiáng)度的電離輻照下仍能保持其干細(xì)胞特性。MSC已被廣泛用來治療放射性缺血或機(jī)械性損傷的動物模型,臨床上也開始運(yùn)用MSC對放射引起的軟組織病變和意外暴露輻射進(jìn)行治療。動物研究和早期臨床試驗(yàn)表明MSC主要通過分化為功能性實(shí)質(zhì)細(xì)胞和為其他細(xì)胞生存提供有利微環(huán)境在組織再生中起作用^[1-3]。目前大部分研究主要集中在骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（Bone marrow mesenchymal stem cell,BMSC）,但是BMSC的增殖分化潛能隨年齡增大而下降,而且BMSC自體移植依賴患者自身的狀態(tài),導(dǎo)致應(yīng)用受限。UCMSC（Umbilical cord mesenchymal stem cell,UCMSC）來源充足,倫理爭議較少,無免疫排斥問題,可以大規(guī)模生產(chǎn),是細(xì)胞移植的理想種子。二、研究目的1.建立急性放射損傷樹鼩模型。2.評價(jià)和分析同種異體UCMSC移植治療急性放射損傷樹鼩模型的療效與機(jī)制。三、研究方法... 

【文章來源】：中國人民解放軍陸軍軍醫(yī)大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

樹鼩照射設(shè)備及裝置

圖 1 樹鼩 UCMSC 分離培養(yǎng)A:剪碎的臍帶組織；B:P3 代貼壁生長的 UCMSC（100×）；C: P3 代 UCMSC 生長3.2 樹鼩 UCMSC 的鑒定流式結(jié)果顯示樹鼩 UCMSC 表面標(biāo)記 CD105、CD90、CD34、CD31 陽為：98.7%、96.3%、0.185%、0.043%,說明樹鼩 UCMSC 是一群具有特征標(biāo)細(xì)胞(圖 2A)。樹鼩 UCMSC 體外成骨誘導(dǎo)后用茜素紅染色，可見大量橘紅色鈣結(jié)節(jié)；樹鼩UCMSC體外成脂誘導(dǎo)后用油紅O染色，可見明顯紅染顆粒；樹鼩體外成軟骨誘導(dǎo)后經(jīng)阿利新藍(lán)染色，鑒定有軟骨基質(zhì)蛋白多糖生成（圖 2B）光定量 PCR 檢測結(jié)果提示（圖 2C）誘導(dǎo)分化后的 UCMSC 成骨基因（Runx2OCN），成脂基因（LPL、PPARγ2），成軟骨基因（Sox6 、Col2a1）的 mR明顯高于對照組，對照組為同代未誘導(dǎo)的樹鼩 UCMSC。

圖 1 樹鼩 UCMSC 分離培養(yǎng)A:剪碎的臍帶組織；B:P3 代貼壁生長的 UCMSC（100×）；C: P3 代 UCMSC 生長曲線3.2 樹鼩 UCMSC 的鑒定流式結(jié)果顯示樹鼩 UCMSC 表面標(biāo)記 CD105、CD90、CD34、CD31 陽性率分別為：98.7%、96.3%、0.185%、0.043%,說明樹鼩 UCMSC 是一群具有特征標(biāo)志的均一細(xì)胞(圖 2A)。樹鼩 UCMSC 體外成骨誘導(dǎo)后用茜素紅染色，可見大量橘紅色的鈣鹽和鈣結(jié)節(jié)；樹鼩UCMSC體外成脂誘導(dǎo)后用油紅O染色，可見明顯紅染顆粒；樹鼩UCMSC體外成軟骨誘導(dǎo)后經(jīng)阿利新藍(lán)染色，鑒定有軟骨基質(zhì)蛋白多糖生成（圖 2B）。實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 檢測結(jié)果提示（圖 2C）誘導(dǎo)分化后的 UCMSC 成骨基因（Runx2、ALPI、OCN），成脂基因（LPL、PPARγ2），成軟骨基因（Sox6 、Col2a1）的 mRNA 表達(dá)明顯高于對照組，對照組為同代未誘導(dǎo)的樹鼩 UCMSC。


本文編號：3333060