目的：用分子生物學(xué)和細胞生物學(xué)方法，從細胞水平和分子水平深入研究肺纖維化的發(fā)生機制，研究肺泡巨噬細胞、成纖維細胞、Ⅳ型膠原和明膠酶B在放射性肺損傷中的關(guān)系，進而闡明肺組織重建的機理及其與肺纖維化發(fā)生之間的聯(lián)系。 方法：用一定劑量的⁶⁰Coγ射線照射C57小鼠和Wistar大鼠。將C57小鼠分為2組：照射組（n=9）和對照組（n=9）。分別于照后1、2、4w活殺取其肺組織提取總RNA。將Wistar大鼠分為對照組和照射后7d組，用0.9％的生理鹽水灌洗肺臟，用差速貼壁法分離肺泡巨噬細胞，并用臺盼藍排斥試驗鑒定其存活率＞95％，然后用分離好的巨噬細胞制備肺泡巨噬細胞條件培養(yǎng)液（Condition Medium of Alveolar Macrophage，CMAM），用于下一步試驗。MTT法檢測CMAM對人肺成纖維細胞（Human Lung Fibroblast，HLF）的促增殖作用，于不同的條件培養(yǎng)液培養(yǎng)HLF 6h、12h、24h、48h、72h后檢測HLF的增殖情況。用CMAM大量培養(yǎng)HLF，于培養(yǎng)后的不同時間點提取總蛋白，分別用Western Blot和... 

【文章來源】：延邊大學(xué)吉林省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：42 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
Sheet for Abbreviation
Chinese Abstract
Abstract
1. Intruduction
2. Material and Methods
    2.1 Animals
    2.2 Isolation and Culture of Rat Alveolar Macrophages (AM)
    2.3 Preparation of Conditional Medium of Alveolar Macrophage
    2.4 Human Lung Fibroblasts (HLF) Culture
    2.5 Cell Proliferation Assay
    2.6 Western Blot Determineation
    2.7 Analysis of MMP-9 by Zymography
    2.8 RNA Extraction and RT-PCR
    2.9 Statistics Analysis
3. Results
    3.1 Effect of CMAM on HLF Proliferation
    3.2 Effect of CMAM on Synthesis of Collagen Ⅳ in HLF
    3.3 Effect of CMAM on Collagen Ⅵ Excreting and MMP-9 Synthesis by HLF
    3.4 Expression of Collagen Ⅳ MMP-9 and TIMP-1 Genes in Mice after Irradiation by ~(60)Co-γ Ray
4. Discussion
5. Concluding Remarks
6. Legends for Figures
7. Acknowledgements
8. References
9. Reviews
10. References



本文編號：3310565