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抗人共刺激分子B7-2單克隆抗體的免疫放射分析試劑盒的研制及應(yīng)用研究

發(fā)布時間:2021-05-20 08:25
  目的建立穩(wěn)定的單克隆抗體6C8的125I標(biāo)記方法;固相抗體6A5包被試管法;人血清中可溶性B7-2分子的免疫放射檢測方法學(xué)的建立并初步探討其臨床意義。方法應(yīng)用氯胺T法125I標(biāo)記單克隆抗體6C8及標(biāo)記抗體的純化;紙層析法檢測標(biāo)記率和放化純;活化管技術(shù);采用物理吸附法和多聚賴氨酸活化管化學(xué)連接方法對單克隆抗體在聚苯乙烯試管上的固定方法進(jìn)行了研究;用標(biāo)準(zhǔn)原來檢測標(biāo)記抗體和包被抗體的活性;加入不同的血清體積和0.1%吐溫80、反應(yīng)不同的時間摸索最佳反應(yīng)條件;雙抗體法分離技術(shù);建立可溶性B7-2分子的免疫放射分析法。結(jié)果經(jīng)過反復(fù)的實驗分析,建立了標(biāo)記抗體6C8的最佳實驗條件:Na125I 7.4MBq、氯胺-T 20μg、抗體6C8 6μg、Na2S2O5100μg、反應(yīng)時間30秒、總體積為200~300μl;最佳固相包被條件:聚苯乙烯試管經(jīng)γ射線照射12h后,用0.2mol/L PH 7.4磷酸鹽緩沖液400μl稀釋抗體,選擇抗體6A5的濃度為5mg/L,4℃冰箱中放置24小時,吸出抗體溶液,0.2mol/L PH 7.4磷酸鹽緩沖液洗5次。加入500μl/管的3%的BSA封閉液,封閉時間選... 

【文章來源】:蘇州大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】:50 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
中文提要
Abstract
研究背景
第一部分 建立穩(wěn)定的單克隆抗體 6C8 的 ~(125)I 標(biāo)記方法
    1 材料與方法
    2 結(jié)果
    3 討論
    參考文獻(xiàn)
第二部分 固相抗體6A5 包被試管法及人血清中可溶性 B7-2 分子的免疫放射檢測方法學(xué)的建立及其臨床意義
    1 材料與方法
    2 結(jié)果
    3 方法學(xué)的研究
    4 討論
    5 應(yīng)用
    參考文獻(xiàn)
綜述
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致謝



本文編號:3197441

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