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肌腱細(xì)胞微環(huán)境對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖和腱/韌帶相關(guān)基因表達(dá)影響的實(shí)驗(yàn)研究

發(fā)布時(shí)間:2021-05-18 02:48
  腱/韌帶是堅(jiān)韌的結(jié)締組織,它們通過(guò)其結(jié)構(gòu)、力學(xué)性質(zhì)和外形的變化以響應(yīng)外力的刺激,在運(yùn)動(dòng)中起著重要作用,但活動(dòng)范圍超過(guò)極限或拉扯過(guò)劇,腱/韌帶常常會(huì)受到損傷甚至斷裂,嚴(yán)重影響人們的健康。腱/韌帶損傷的治療目前仍然是整形外科中具有挑戰(zhàn)性的問(wèn)題,比如如何加快治療速度、提高治療質(zhì)量直至完全治愈等等,都是臨床上亟待解決的難題。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(Mesenchymal stem cells, MSCs)是一類具有增殖和多向分化潛能的特殊細(xì)胞。在特定條件下,MSCs在體外可增殖并分化為成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞和肌肉細(xì)胞等。這種增殖能力和分化可塑性為臨床上腱/韌帶損傷組織的修復(fù)帶來(lái)了希望,使腱/韌帶創(chuàng)傷的治療甚至組織工程化成為可能。MSCs的自我更新和分化行為高度依賴于其所處的特殊局部微環(huán)境。已有研究證明各種理化因素刺激或特殊細(xì)胞微環(huán)境對(duì)MSCs的增殖、分化等生物學(xué)行為起著重要的調(diào)節(jié)作用,但MSCs在腱/韌帶細(xì)胞微環(huán)境下的增殖、分化行為特征及其相關(guān)規(guī)律人們還不清楚,有關(guān)這方面的研究不僅具有重要的理論意義,而且具有潛在的應(yīng)用價(jià)值。為此,本實(shí)驗(yàn)采用Transwell system建立大鼠MSCs與大鼠... 

【文章來(lái)源】:重慶大學(xué)重慶市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】:58 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
1 緒論
    1.1 問(wèn)題的提出
    1.2 國(guó)內(nèi)外研究的現(xiàn)狀
        1.2.1 肌腱的損傷與修復(fù)
        1.2.2 微環(huán)境對(duì)MSCs 增殖和分化的影響
    1.3 本文研究的目的、意義以及主要內(nèi)容
        1.3.1 本文研究目的及意義
        1.3.2 本文研究的主要內(nèi)容
2 細(xì)胞的分離培養(yǎng)
    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗(yàn)材料
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2.2.2 主要儀器設(shè)備
        2.2.3 主要實(shí)驗(yàn)試劑
        2.2.4 主要實(shí)驗(yàn)試劑的配制
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 MSCs 的分離培養(yǎng)
        2.3.2 MSCs 的鑒定
        2.3.3 大鼠肌腱細(xì)胞分離培養(yǎng)
    2.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.4.1 MSCs 的形態(tài)學(xué)觀察
        2.4.2 MSCs 表面相關(guān)抗原的表達(dá)
        2.4.3 MSCs 細(xì)胞周期測(cè)定
        2.4.4 大鼠肌腱細(xì)胞的形態(tài)學(xué)觀察
    2.5 分析討論
        2.5.1 MSCs 的分離培養(yǎng)
        2.5.2 MSCs 的鑒定
        2.5.3 肌腱成纖維細(xì)胞的分離培養(yǎng)
    2.6 本章小結(jié)
3 肌腱細(xì)胞微環(huán)境對(duì)MSCS 增殖的影響
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)材料和方法
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.2.2 實(shí)驗(yàn)方法
    3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.3.1 MSCs 的生長(zhǎng)曲線
        3.3.2 肌腱細(xì)胞微環(huán)境下MSCs 的生長(zhǎng)、形態(tài)
        3.3.3 肌腱細(xì)胞微環(huán)境對(duì)MSCs 增殖的影響
    3.4 分析討論
        3.4.1 體外培養(yǎng)MSCs 的生長(zhǎng)特點(diǎn)
        3.4.2 MSCs 在肌腱細(xì)胞微環(huán)境下生長(zhǎng)、增殖的變化
        3.4.3 肌腱細(xì)胞微環(huán)境對(duì)c-fos 基因表達(dá)變化的影響
    3.5 本章小結(jié)
4 肌腱細(xì)胞微環(huán)境對(duì)MSCS 腱/韌帶相關(guān)基因表達(dá)的影響
    4.1 引言
    4.2 實(shí)驗(yàn)材料和方法
        4.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        4.2.2 實(shí)驗(yàn)方法
    4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.3.1 MSCs 在肌腱細(xì)胞微環(huán)境下表型的變化
        4.3.2 MSCs 腱/韌帶相關(guān)基因表達(dá)的變化
        4.3.3 大鼠肌腱細(xì)胞腱/韌帶相關(guān)基因的表達(dá)
    4.4 分析討論
        4.4.1 肌腱細(xì)胞微環(huán)境對(duì)MSCs 分化的誘導(dǎo)
        4.4.2 肌腱成纖維細(xì)胞相關(guān)基因的表達(dá)
    4.5 本章小結(jié)
5 結(jié)論與展望
    5.1 主要結(jié)論
    5.2 后續(xù)研究工作展望
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]不同濃度重組人骨形成蛋白2和堿性成纖維生長(zhǎng)因子對(duì)犬骨髓基質(zhì)細(xì)胞的生物學(xué)作用[J]. 王磊,黃遠(yuǎn)亮,潘可風(fēng),張秀麗.  中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù). 2007(46)
[2]施萬(wàn)細(xì)胞對(duì)共培養(yǎng)的神經(jīng)干細(xì)胞增殖與分化的影響[J]. 劉鐘,曾水林,李鳳飛,姜宇,朱建寶.  中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào). 2007(25)
[3]與韌帶成纖維細(xì)胞間接共培養(yǎng)對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞膠原蛋白和韌粘素-C表達(dá)的影響[J]. 張蕾,陳槐卿,Nguyen.Tran.  生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)雜志. 2007(04)
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[5]阻滯ERK1/2通路對(duì)大鼠彌漫性腦損傷組織c-fos基因表達(dá)的影響[J]. 李金星,趙海梅,李玉,王翀,趙甲山,朱賢立.  華中科技大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2006(03)
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[7]軟骨細(xì)胞與骨髓基質(zhì)細(xì)胞共培養(yǎng)體外構(gòu)建軟骨的初步研究[J]. 苗春雷,周廣東,劉天一,王曉云,崔磊,劉偉,唐勝建,曹誼林.  上海第二醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2004(04)
[8]皮膚成纖維細(xì)胞構(gòu)建組織工程化肌腱的初步研究[J]. 陳兵,丁小邦,劉方軍,崔磊,劉偉,商慶新,曹誼林.  中華醫(yī)學(xué)雜志. 2002(16)
[9]骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離與培養(yǎng)[J]. 艾國(guó)平,粟永萍,閆國(guó)和,冉新澤,劉曉宏,羅成基,程天民.  第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2001(05)
[10]人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分離與培養(yǎng)方法的建立[J]. 劉曉丹,郭子寬,李秀森,張雙喜,毛寧.  軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院院刊. 2000(04)



本文編號(hào):3192964

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