肌腱細胞微環(huán)境對大鼠骨髓間充質干細胞增殖和腱/韌帶相關基因表達影響的實驗研究
發(fā)布時間:2021-05-18 02:48
腱/韌帶是堅韌的結締組織,它們通過其結構、力學性質和外形的變化以響應外力的刺激,在運動中起著重要作用,但活動范圍超過極限或拉扯過劇,腱/韌帶常常會受到損傷甚至斷裂,嚴重影響人們的健康。腱/韌帶損傷的治療目前仍然是整形外科中具有挑戰(zhàn)性的問題,比如如何加快治療速度、提高治療質量直至完全治愈等等,都是臨床上亟待解決的難題。骨髓間充質干細胞(Mesenchymal stem cells, MSCs)是一類具有增殖和多向分化潛能的特殊細胞。在特定條件下,MSCs在體外可增殖并分化為成骨細胞、軟骨細胞、脂肪細胞和肌肉細胞等。這種增殖能力和分化可塑性為臨床上腱/韌帶損傷組織的修復帶來了希望,使腱/韌帶創(chuàng)傷的治療甚至組織工程化成為可能。MSCs的自我更新和分化行為高度依賴于其所處的特殊局部微環(huán)境。已有研究證明各種理化因素刺激或特殊細胞微環(huán)境對MSCs的增殖、分化等生物學行為起著重要的調節(jié)作用,但MSCs在腱/韌帶細胞微環(huán)境下的增殖、分化行為特征及其相關規(guī)律人們還不清楚,有關這方面的研究不僅具有重要的理論意義,而且具有潛在的應用價值。為此,本實驗采用Transwell system建立大鼠MSCs與大鼠...
【文章來源】:重慶大學重慶市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數】:58 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
1 緒論
1.1 問題的提出
1.2 國內外研究的現狀
1.2.1 肌腱的損傷與修復
1.2.2 微環(huán)境對MSCs 增殖和分化的影響
1.3 本文研究的目的、意義以及主要內容
1.3.1 本文研究目的及意義
1.3.2 本文研究的主要內容
2 細胞的分離培養(yǎng)
2.1 引言
2.2 實驗材料
2.2.1 實驗動物
2.2.2 主要儀器設備
2.2.3 主要實驗試劑
2.2.4 主要實驗試劑的配制
2.3 實驗方法
2.3.1 MSCs 的分離培養(yǎng)
2.3.2 MSCs 的鑒定
2.3.3 大鼠肌腱細胞分離培養(yǎng)
2.4 實驗結果
2.4.1 MSCs 的形態(tài)學觀察
2.4.2 MSCs 表面相關抗原的表達
2.4.3 MSCs 細胞周期測定
2.4.4 大鼠肌腱細胞的形態(tài)學觀察
2.5 分析討論
2.5.1 MSCs 的分離培養(yǎng)
2.5.2 MSCs 的鑒定
2.5.3 肌腱成纖維細胞的分離培養(yǎng)
2.6 本章小結
3 肌腱細胞微環(huán)境對MSCS 增殖的影響
3.1 引言
3.2 實驗材料和方法
3.2.1 實驗材料
3.2.2 實驗方法
3.3 實驗結果
3.3.1 MSCs 的生長曲線
3.3.2 肌腱細胞微環(huán)境下MSCs 的生長、形態(tài)
3.3.3 肌腱細胞微環(huán)境對MSCs 增殖的影響
3.4 分析討論
3.4.1 體外培養(yǎng)MSCs 的生長特點
3.4.2 MSCs 在肌腱細胞微環(huán)境下生長、增殖的變化
3.4.3 肌腱細胞微環(huán)境對c-fos 基因表達變化的影響
3.5 本章小結
4 肌腱細胞微環(huán)境對MSCS 腱/韌帶相關基因表達的影響
4.1 引言
4.2 實驗材料和方法
4.2.1 實驗材料
4.2.2 實驗方法
4.3 實驗結果
4.3.1 MSCs 在肌腱細胞微環(huán)境下表型的變化
4.3.2 MSCs 腱/韌帶相關基因表達的變化
4.3.3 大鼠肌腱細胞腱/韌帶相關基因的表達
4.4 分析討論
4.4.1 肌腱細胞微環(huán)境對MSCs 分化的誘導
4.4.2 肌腱成纖維細胞相關基因的表達
4.5 本章小結
5 結論與展望
5.1 主要結論
5.2 后續(xù)研究工作展望
致謝
參考文獻
附錄
【參考文獻】:
期刊論文
[1]不同濃度重組人骨形成蛋白2和堿性成纖維生長因子對犬骨髓基質細胞的生物學作用[J]. 王磊,黃遠亮,潘可風,張秀麗. 中國組織工程研究與臨床康復. 2007(46)
[2]施萬細胞對共培養(yǎng)的神經干細胞增殖與分化的影響[J]. 劉鐘,曾水林,李鳳飛,姜宇,朱建寶. 中國醫(yī)藥導報. 2007(25)
[3]與韌帶成纖維細胞間接共培養(yǎng)對大鼠骨髓間充質干細胞膠原蛋白和韌粘素-C表達的影響[J]. 張蕾,陳槐卿,Nguyen.Tran. 生物醫(yī)學工程學雜志. 2007(04)
[4]癌干細胞研究進展[J]. 李錦軍,顧健人. 生命科學. 2006(04)
[5]阻滯ERK1/2通路對大鼠彌漫性腦損傷組織c-fos基因表達的影響[J]. 李金星,趙海梅,李玉,王翀,趙甲山,朱賢立. 華中科技大學學報(醫(yī)學版). 2006(03)
[6]MAPK/ERK信號通路與學習記憶功能[J]. 劉輝,董兆君. 國際神經病學神經外科學雜志. 2005(05)
[7]軟骨細胞與骨髓基質細胞共培養(yǎng)體外構建軟骨的初步研究[J]. 苗春雷,周廣東,劉天一,王曉云,崔磊,劉偉,唐勝建,曹誼林. 上海第二醫(yī)科大學學報. 2004(04)
[8]皮膚成纖維細胞構建組織工程化肌腱的初步研究[J]. 陳兵,丁小邦,劉方軍,崔磊,劉偉,商慶新,曹誼林. 中華醫(yī)學雜志. 2002(16)
[9]骨髓間充質干細胞的分離與培養(yǎng)[J]. 艾國平,粟永萍,閆國和,冉新澤,劉曉宏,羅成基,程天民. 第三軍醫(yī)大學學報. 2001(05)
[10]人骨髓間充質干細胞分離與培養(yǎng)方法的建立[J]. 劉曉丹,郭子寬,李秀森,張雙喜,毛寧. 軍事醫(yī)學科學院院刊. 2000(04)
本文編號:3192964
【文章來源】:重慶大學重慶市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數】:58 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
1 緒論
1.1 問題的提出
1.2 國內外研究的現狀
1.2.1 肌腱的損傷與修復
1.2.2 微環(huán)境對MSCs 增殖和分化的影響
1.3 本文研究的目的、意義以及主要內容
1.3.1 本文研究目的及意義
1.3.2 本文研究的主要內容
2 細胞的分離培養(yǎng)
2.1 引言
2.2 實驗材料
2.2.1 實驗動物
2.2.2 主要儀器設備
2.2.3 主要實驗試劑
2.2.4 主要實驗試劑的配制
2.3 實驗方法
2.3.1 MSCs 的分離培養(yǎng)
2.3.2 MSCs 的鑒定
2.3.3 大鼠肌腱細胞分離培養(yǎng)
2.4 實驗結果
2.4.1 MSCs 的形態(tài)學觀察
2.4.2 MSCs 表面相關抗原的表達
2.4.3 MSCs 細胞周期測定
2.4.4 大鼠肌腱細胞的形態(tài)學觀察
2.5 分析討論
2.5.1 MSCs 的分離培養(yǎng)
2.5.2 MSCs 的鑒定
2.5.3 肌腱成纖維細胞的分離培養(yǎng)
2.6 本章小結
3 肌腱細胞微環(huán)境對MSCS 增殖的影響
3.1 引言
3.2 實驗材料和方法
3.2.1 實驗材料
3.2.2 實驗方法
3.3 實驗結果
3.3.1 MSCs 的生長曲線
3.3.2 肌腱細胞微環(huán)境下MSCs 的生長、形態(tài)
3.3.3 肌腱細胞微環(huán)境對MSCs 增殖的影響
3.4 分析討論
3.4.1 體外培養(yǎng)MSCs 的生長特點
3.4.2 MSCs 在肌腱細胞微環(huán)境下生長、增殖的變化
3.4.3 肌腱細胞微環(huán)境對c-fos 基因表達變化的影響
3.5 本章小結
4 肌腱細胞微環(huán)境對MSCS 腱/韌帶相關基因表達的影響
4.1 引言
4.2 實驗材料和方法
4.2.1 實驗材料
4.2.2 實驗方法
4.3 實驗結果
4.3.1 MSCs 在肌腱細胞微環(huán)境下表型的變化
4.3.2 MSCs 腱/韌帶相關基因表達的變化
4.3.3 大鼠肌腱細胞腱/韌帶相關基因的表達
4.4 分析討論
4.4.1 肌腱細胞微環(huán)境對MSCs 分化的誘導
4.4.2 肌腱成纖維細胞相關基因的表達
4.5 本章小結
5 結論與展望
5.1 主要結論
5.2 后續(xù)研究工作展望
致謝
參考文獻
附錄
【參考文獻】:
期刊論文
[1]不同濃度重組人骨形成蛋白2和堿性成纖維生長因子對犬骨髓基質細胞的生物學作用[J]. 王磊,黃遠亮,潘可風,張秀麗. 中國組織工程研究與臨床康復. 2007(46)
[2]施萬細胞對共培養(yǎng)的神經干細胞增殖與分化的影響[J]. 劉鐘,曾水林,李鳳飛,姜宇,朱建寶. 中國醫(yī)藥導報. 2007(25)
[3]與韌帶成纖維細胞間接共培養(yǎng)對大鼠骨髓間充質干細胞膠原蛋白和韌粘素-C表達的影響[J]. 張蕾,陳槐卿,Nguyen.Tran. 生物醫(yī)學工程學雜志. 2007(04)
[4]癌干細胞研究進展[J]. 李錦軍,顧健人. 生命科學. 2006(04)
[5]阻滯ERK1/2通路對大鼠彌漫性腦損傷組織c-fos基因表達的影響[J]. 李金星,趙海梅,李玉,王翀,趙甲山,朱賢立. 華中科技大學學報(醫(yī)學版). 2006(03)
[6]MAPK/ERK信號通路與學習記憶功能[J]. 劉輝,董兆君. 國際神經病學神經外科學雜志. 2005(05)
[7]軟骨細胞與骨髓基質細胞共培養(yǎng)體外構建軟骨的初步研究[J]. 苗春雷,周廣東,劉天一,王曉云,崔磊,劉偉,唐勝建,曹誼林. 上海第二醫(yī)科大學學報. 2004(04)
[8]皮膚成纖維細胞構建組織工程化肌腱的初步研究[J]. 陳兵,丁小邦,劉方軍,崔磊,劉偉,商慶新,曹誼林. 中華醫(yī)學雜志. 2002(16)
[9]骨髓間充質干細胞的分離與培養(yǎng)[J]. 艾國平,粟永萍,閆國和,冉新澤,劉曉宏,羅成基,程天民. 第三軍醫(yī)大學學報. 2001(05)
[10]人骨髓間充質干細胞分離與培養(yǎng)方法的建立[J]. 劉曉丹,郭子寬,李秀森,張雙喜,毛寧. 軍事醫(yī)學科學院院刊. 2000(04)
本文編號:3192964
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