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5-氮雜胞苷上調(diào)miR-27b-5p表達(dá)對模擬失重下血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的影響

發(fā)布時間:2021-05-07 09:23
  目的探究5-氮雜胞苷(5-azacytidine, 5-AZA)對模擬失重效應(yīng)下血管內(nèi)皮細(xì)胞miR-27b-5p表達(dá)及細(xì)胞凋亡的影響。方法體外培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(human umbilical vein endothelial cells, HUVECs),利用MTT試劑盒檢測不同濃度5-AZA(0.1μmol/L、1μmol/L、5μmol/L、10μmol/L、50μmol/L和100μmol/L)對HUVECs的毒性作用。采用qRT-PCR技術(shù)觀察模擬失重環(huán)境下miR-27b-5p表達(dá)的時程變化及5-AZA藥物處理對miR-27b-5p表達(dá)的影響;Western blot檢測凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2、Bax和Cleaved Caspase-3的表達(dá),觀察5-AZA在回轉(zhuǎn)模擬失重效應(yīng)下對HUVECs凋亡的影響。結(jié)果 5-AZA對HUVECs的細(xì)胞毒性呈濃度依賴性。與對照組相比,0.1μmol/L、1μmol/L、5μmol/L和10μmol/L組的細(xì)胞存活率無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,50μmol/L 5-AZA組和100μmol/L5-AZA組的細(xì)胞存活率顯著降低(P<0.05)。因此,... 

【文章來源】:心臟雜志. 2020,32(03)

【文章頁數(shù)】:5 頁

【文章目錄】:
1 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        1.2.2 MTT法檢測5-AZA對HUVECs的毒性作用
        1.2.3 回轉(zhuǎn)模擬失重效應(yīng)
        1.2.4 RNA提取及qRT-PCR檢測miR-27b-5p的表達(dá)
        1.2.5 Western blot檢測凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)水平
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
2 結(jié)果
    2.1 5-AZA對HUVECs的細(xì)胞毒性作用
    2.2 模擬失重效應(yīng)對HUVECs中miR-27b-5p表達(dá)的影響
    2.3 5-AZA藥物處理HUVECs后對模擬失重效應(yīng)下miR-27b-5p表達(dá)的影響
    2.4 5-AZA對模擬失重效應(yīng)下HUVECs凋亡的影響
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本文編號:3173152

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