目的研究人臍帶間充質(zhì)干細胞條件培養(yǎng)基（human umbilical cord mesenchymal stem cells conditioned medium,hUC-MSCs-CM）和自噬抑制劑3-MA對接受10Gy輻射后小膠質(zhì)細胞自噬和凋亡以及炎癥反應(yīng)的影響,為放射性腦損傷的防治提供新思路。方法1采用酶消化法分離培養(yǎng)hUC-MSCs,倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài),流式細胞儀鑒定細胞表型。選取對數(shù)期生長良好的第3～4代hUC-MSCs用無血清的IMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)48h,收集上清制備hUC-MSCs-CM備用。2采用6MV-XRay直線加速器10Gy照射BV2小膠質(zhì)細胞建立輻射細胞模型,hUC-MSCs-CM和3-MA進行干預(yù)。3實驗共分5組:A空白對照組（Control組）;B單純接受10Gy電離輻射組（RT組）;C 10Gy+hUC-MSCs-CM共刺激組（MSCs組）;D10Gy+3-MA共刺激組（3-MA組）;E 10Gy+3-MA+hUC-MSCs-CM共刺激組（MSCs+3-MA組）。4 CCK-8法檢測各實驗組BV2小膠質(zhì)細胞增殖情況;采用Annexin V/PI雙染色法... 

【文章來源】：華北理工大學(xué)河北省

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
引言
第1章 實驗研究
    1.1 材料與方法
        1.1.1 實驗材料
        1.1.2 實驗試劑
        1.1.3 主要儀器設(shè)備型號及產(chǎn)地
        1.1.4 細胞培養(yǎng)耗材
        1.1.5 緩沖試劑的配置方
        1.1.6 實驗分組及處理
        1.1.7 實驗方法
        1.1.8 統(tǒng)計學(xué)分析
    1.2 實驗結(jié)果
        1.2.1 h UC-MSCs的形態(tài)特征
        1.2.2 h U-MSCs表面抗原表達的流式鑒定
        1.2.3 輻射與3-MA對BV2細胞增殖的影響
        1.2.4 MSCs-CM和3-MA對輻射BV2 細胞增殖的影響
        1.2.5 MSCs-CM和3-MA對輻射BV2 細胞凋亡的影響
        1.2.6 各組BV2 細胞TUNEL染色的比較
        1.2.7 各組BV2 細胞Cleavedcaspase-3 蛋白的表達
        1.2.8 MSCs-CM和3-MA對輻射BV2 細胞Beclin1的m RNA和蛋白表達的影響
        1.2.9 MSCs-CM和3-MA對輻射BV2 細胞LC3 蛋白表達的影響
        1.2.10 MSCs-CM和3-MA對輻射BV2 細胞TNF-α、IL-1β分泌水平的影響
    1.3 討論
    1.4 結(jié)論
參考文獻
結(jié)論
第2章 綜述 放射性損傷和認知障礙研究進展
    2.1 腦放射治療對認知功能的影響
    2.2 放射性認知障礙的發(fā)病機制
        2.2.1 顱腦照射對神經(jīng)干細胞、神經(jīng)發(fā)生以及神經(jīng)可塑性的影響
        2.2.2 顱腦照射誘發(fā)氧化應(yīng)激與線粒體功能障礙
        2.2.3 顱腦照射誘發(fā)炎癥反應(yīng)
    2.3 結(jié)論和展望
    參考文獻
致謝
在學(xué)期間研究成果


【參考文獻】：
期刊論文
[1]臍帶間充質(zhì)干細胞對小膠質(zhì)細胞增殖及活化的影響[J]. 王娜,陳乃耀.  山東大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2016(10)



本文編號：3164023