Cu 2+ 、PSA及苯硫酚熒光探針的設(shè)計(jì)合成與應(yīng)用研究
發(fā)布時(shí)間:2021-01-20 18:43
背景銅離子廣泛存在于自然界及生命體中,它的衡量存在對(duì)自然的可持續(xù)發(fā)展和生命健康的維持發(fā)揮著重要的作用。苯硫酚被用作染料、醫(yī)藥、農(nóng)藥、阻聚劑、抗氧劑等精細(xì)化工的中間體,又因其極毒特性而被關(guān)注。前列腺特異性抗原具有極高的組織器官特異性和種屬特異性,是目前診斷前列腺癌的首選標(biāo)志物,也被用于法醫(yī)學(xué)精斑確證。熒光檢測(cè)法因具有高選擇性、低檢測(cè)限、低毒副作用以及可實(shí)現(xiàn)原位、實(shí)時(shí)、可視化智能化分析的特點(diǎn)而被廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)、醫(yī)學(xué)、環(huán)境科學(xué)等多學(xué)科領(lǐng)域中離子、分子乃至生物大分子的檢測(cè)。因而銅離子、苯硫酚以及前列腺特異性抗原熒光探針的設(shè)計(jì)合成具有重要意義。目的設(shè)計(jì)合成高選擇性、低檢測(cè)限和特異性高的可視化銅離子、苯硫酚以及系列前列腺特異性抗原熒光探針,并應(yīng)用于細(xì)胞熒光成像實(shí)驗(yàn)以及精液檢材熒光成像實(shí)驗(yàn),研究相應(yīng)探針的實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。方法1.設(shè)計(jì)合成銅離子熒光探針L1、L2;設(shè)計(jì)合成苯硫酚熒光探針L3;設(shè)計(jì)合成前列腺特異性抗原熒光探針1~7,通過(guò)質(zhì)譜、核磁、高效液相色譜法等對(duì)探針進(jìn)行結(jié)構(gòu)及純度表征。2.采用紫外-可見(jiàn)光譜法和熒光光譜法測(cè)量相應(yīng)探針對(duì)銅離子、苯硫酚以及前列腺特異性抗原的響應(yīng)。3.培育HepG-2細(xì)...
【文章來(lái)源】:新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院河南省
【文章頁(yè)數(shù)】:80 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
圖1.3?(a)突光探針Ll(l〇nmol/L)對(duì)銅離子的紫外-可見(jiàn)光譜滴定圖;(b)焚光探針Ll(10pmol/L)??對(duì)各種金屬離子的紫外-可見(jiàn)吸收光譜響應(yīng)圖??
(a)?(b)??圖1.3?(a)突光探針Ll(l〇nmol/L)對(duì)銅離子的紫外-可見(jiàn)光譜滴定圖;(b)焚光探針Ll(10pmol/L)??對(duì)各種金屬離子的紫外-可見(jiàn)吸收光譜響應(yīng)圖??為探宄熒光探針L1與Cu2+的結(jié)合比,進(jìn)行了等物質(zhì)的量連續(xù)變化法(Job’s?Plot)??實(shí)驗(yàn)(圖1.4)。在CH3CN:HEPES?(3:2,v/v,pH?=?7.4)混合體系中,固定熒光探針LI??與Cu2+總濃度為0.1?mM。分別測(cè)定熒光探針L1與Cu2+的濃度比分別為0:10,?1:9,?2:8,??3:7,?4:6,?5:5,?6:4,?7:3,?8:2,?9:1,?10:0時(shí),在人=480?run處的紫外-可見(jiàn)光譜吸光度。測(cè)得??Cu2+與熒光探針L1在摩爾比為0?.66處出現(xiàn)最大吸收值,即當(dāng)Ll:L(Cu2+:)?=?1:2時(shí)吸??光度最高。Job’s?Plot曲線表明熒光探針L1與Cu2+的結(jié)合比為1:2。??0.35?^?V??0.30-?/?\??S?0?25?;?X?\??運(yùn)?0.20?-?/?\??卜:/?\??<?°'10:?/?\??〇-°5:?/?\??0_00-■/?\??i?|?I?I?1?I?1?I?1?I?1?I?1?I?1?I?1?|?1?|?I?|????0.0?0.1?0.2?0.3?0.4?0.5?0.6?0.7?0.8?0.9?1.0??L1/L1+CU2"??圖1.4熒光探針L1的Job’s?Plot曲線圖??接著
光強(qiáng)度隨著Cu2+的加入呈現(xiàn)逐漸降低,大約加入4倍量銅離子時(shí)能使熒光探針L1的??焚光幾乎完全萍滅,焚光萍滅效率可達(dá)98.73%。通過(guò)Benesi-Hildebrand?(B-H)方程[52]??進(jìn)一步計(jì)算了熒光滴定的結(jié)合常數(shù),結(jié)合常數(shù)為1.91xl〇9M-2?(R2?=?0.994)(圖1.6)。??結(jié)合紫外-可見(jiàn)光譜和熒光光譜數(shù)據(jù)分析,表明熒光探針L1對(duì)銅離子有很好的響應(yīng),??L1和Cu2+反應(yīng)后的生成物Ll-Cu2+結(jié)構(gòu)穩(wěn)定。通過(guò)熒光的方法計(jì)算探針對(duì)銅的檢測(cè)限,??當(dāng)熒光探針L1的濃度為luM時(shí),對(duì)銅離子的最低檢測(cè)限為6pM(0.384ppm),熒??光探針L1的熒光強(qiáng)度和銅離子的濃度在0?30?的范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系,L1??可被視為一款熒光“開(kāi)-關(guān)”型銅離子熒光探針。??450?500?550?600?650?700??Wavelength?(nm)??圖1.5熒光探針L1對(duì)銅離子的熒光滴定實(shí)驗(yàn)(插圖:探針對(duì)銅離子的熒光滴定曲線,激發(fā)439?nm,??發(fā)射483?nm)??16??
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]基于多肽均相裂解電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)前列腺特異性抗原[J]. 李哲建,張靜,樊雪梅,王書(shū)民,曹寶月,周春生. 分析測(cè)試學(xué)報(bào). 2018(09)
[2]某銅礦區(qū)水土環(huán)境重金屬污染及其農(nóng)作物效應(yīng)[J]. 毛香菊,卞孝東,肖芳,郭俊剛,程新濤,王威. 礦產(chǎn)保護(hù)與利用. 2018(05)
[3]苯硫酚熒光探針研究進(jìn)展[J]. 葛文奇,圣迎迎,喬亞?wèn)|,曹忠,姚志軼,吳海臣. 化學(xué)傳感器. 2017(01)
[4]前列腺特異性抗原對(duì)前列腺癌診斷價(jià)值的探討[J]. 王煒,李傳剛,劉輝,楊玻. 中國(guó)醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2016(01)
[5]共振能量轉(zhuǎn)移技術(shù)在生命科學(xué)中的應(yīng)用研究新進(jìn)展[J]. 張順超,沈國(guó)勵(lì),李合松. 分析科學(xué)學(xué)報(bào). 2015(04)
[6]中國(guó)近海和河口環(huán)境銅污染的狀況[J]. 潘科,朱艾嘉,徐志斌,王文雄. 生態(tài)毒理學(xué)報(bào). 2014(04)
[7]前列腺特異性抗原篩查與前列腺癌[J]. 楊華旺,姚慶祥,劉春雨. 醫(yī)學(xué)綜述. 2012(03)
[8]熒光化學(xué)傳感器研究中的光化學(xué)與光物理問(wèn)題[J]. 吳世康. 化學(xué)進(jìn)展. 2004(02)
[9]p30的分離純化、抗血清制備及其法醫(yī)學(xué)應(yīng)用[J]. 侯一平,吳梅筠. 醫(yī)學(xué)研究通訊. 1991(09)
博士論文
[1]基于光致電子轉(zhuǎn)移(PET)機(jī)理設(shè)計(jì)環(huán)境敏感粘度熒光探針[D]. 吳志勇.大連理工大學(xué) 2013
[2]幾種新型熒光分子探針的合成及性能研究[D]. 顧崢.湖南大學(xué) 2010
碩士論文
[1]人血清白蛋白熒光探針的研發(fā)與生物學(xué)應(yīng)用[D]. 王一儒.大連醫(yī)科大學(xué) 2016
本文編號(hào):2989571
【文章來(lái)源】:新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院河南省
【文章頁(yè)數(shù)】:80 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
圖1.3?(a)突光探針Ll(l〇nmol/L)對(duì)銅離子的紫外-可見(jiàn)光譜滴定圖;(b)焚光探針Ll(10pmol/L)??對(duì)各種金屬離子的紫外-可見(jiàn)吸收光譜響應(yīng)圖??
(a)?(b)??圖1.3?(a)突光探針Ll(l〇nmol/L)對(duì)銅離子的紫外-可見(jiàn)光譜滴定圖;(b)焚光探針Ll(10pmol/L)??對(duì)各種金屬離子的紫外-可見(jiàn)吸收光譜響應(yīng)圖??為探宄熒光探針L1與Cu2+的結(jié)合比,進(jìn)行了等物質(zhì)的量連續(xù)變化法(Job’s?Plot)??實(shí)驗(yàn)(圖1.4)。在CH3CN:HEPES?(3:2,v/v,pH?=?7.4)混合體系中,固定熒光探針LI??與Cu2+總濃度為0.1?mM。分別測(cè)定熒光探針L1與Cu2+的濃度比分別為0:10,?1:9,?2:8,??3:7,?4:6,?5:5,?6:4,?7:3,?8:2,?9:1,?10:0時(shí),在人=480?run處的紫外-可見(jiàn)光譜吸光度。測(cè)得??Cu2+與熒光探針L1在摩爾比為0?.66處出現(xiàn)最大吸收值,即當(dāng)Ll:L(Cu2+:)?=?1:2時(shí)吸??光度最高。Job’s?Plot曲線表明熒光探針L1與Cu2+的結(jié)合比為1:2。??0.35?^?V??0.30-?/?\??S?0?25?;?X?\??運(yùn)?0.20?-?/?\??卜:/?\??<?°'10:?/?\??〇-°5:?/?\??0_00-■/?\??i?|?I?I?1?I?1?I?1?I?1?I?1?I?1?I?1?|?1?|?I?|????0.0?0.1?0.2?0.3?0.4?0.5?0.6?0.7?0.8?0.9?1.0??L1/L1+CU2"??圖1.4熒光探針L1的Job’s?Plot曲線圖??接著
光強(qiáng)度隨著Cu2+的加入呈現(xiàn)逐漸降低,大約加入4倍量銅離子時(shí)能使熒光探針L1的??焚光幾乎完全萍滅,焚光萍滅效率可達(dá)98.73%。通過(guò)Benesi-Hildebrand?(B-H)方程[52]??進(jìn)一步計(jì)算了熒光滴定的結(jié)合常數(shù),結(jié)合常數(shù)為1.91xl〇9M-2?(R2?=?0.994)(圖1.6)。??結(jié)合紫外-可見(jiàn)光譜和熒光光譜數(shù)據(jù)分析,表明熒光探針L1對(duì)銅離子有很好的響應(yīng),??L1和Cu2+反應(yīng)后的生成物Ll-Cu2+結(jié)構(gòu)穩(wěn)定。通過(guò)熒光的方法計(jì)算探針對(duì)銅的檢測(cè)限,??當(dāng)熒光探針L1的濃度為luM時(shí),對(duì)銅離子的最低檢測(cè)限為6pM(0.384ppm),熒??光探針L1的熒光強(qiáng)度和銅離子的濃度在0?30?的范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系,L1??可被視為一款熒光“開(kāi)-關(guān)”型銅離子熒光探針。??450?500?550?600?650?700??Wavelength?(nm)??圖1.5熒光探針L1對(duì)銅離子的熒光滴定實(shí)驗(yàn)(插圖:探針對(duì)銅離子的熒光滴定曲線,激發(fā)439?nm,??發(fā)射483?nm)??16??
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]基于多肽均相裂解電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)前列腺特異性抗原[J]. 李哲建,張靜,樊雪梅,王書(shū)民,曹寶月,周春生. 分析測(cè)試學(xué)報(bào). 2018(09)
[2]某銅礦區(qū)水土環(huán)境重金屬污染及其農(nóng)作物效應(yīng)[J]. 毛香菊,卞孝東,肖芳,郭俊剛,程新濤,王威. 礦產(chǎn)保護(hù)與利用. 2018(05)
[3]苯硫酚熒光探針研究進(jìn)展[J]. 葛文奇,圣迎迎,喬亞?wèn)|,曹忠,姚志軼,吳海臣. 化學(xué)傳感器. 2017(01)
[4]前列腺特異性抗原對(duì)前列腺癌診斷價(jià)值的探討[J]. 王煒,李傳剛,劉輝,楊玻. 中國(guó)醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2016(01)
[5]共振能量轉(zhuǎn)移技術(shù)在生命科學(xué)中的應(yīng)用研究新進(jìn)展[J]. 張順超,沈國(guó)勵(lì),李合松. 分析科學(xué)學(xué)報(bào). 2015(04)
[6]中國(guó)近海和河口環(huán)境銅污染的狀況[J]. 潘科,朱艾嘉,徐志斌,王文雄. 生態(tài)毒理學(xué)報(bào). 2014(04)
[7]前列腺特異性抗原篩查與前列腺癌[J]. 楊華旺,姚慶祥,劉春雨. 醫(yī)學(xué)綜述. 2012(03)
[8]熒光化學(xué)傳感器研究中的光化學(xué)與光物理問(wèn)題[J]. 吳世康. 化學(xué)進(jìn)展. 2004(02)
[9]p30的分離純化、抗血清制備及其法醫(yī)學(xué)應(yīng)用[J]. 侯一平,吳梅筠. 醫(yī)學(xué)研究通訊. 1991(09)
博士論文
[1]基于光致電子轉(zhuǎn)移(PET)機(jī)理設(shè)計(jì)環(huán)境敏感粘度熒光探針[D]. 吳志勇.大連理工大學(xué) 2013
[2]幾種新型熒光分子探針的合成及性能研究[D]. 顧崢.湖南大學(xué) 2010
碩士論文
[1]人血清白蛋白熒光探針的研發(fā)與生物學(xué)應(yīng)用[D]. 王一儒.大連醫(yī)科大學(xué) 2016
本文編號(hào):2989571
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