【目的】探討小鼠間充質(zhì)干細(xì)胞在中劑量Χ射線照射后的損傷情況、相應(yīng)機(jī)制以及Wnt信號(hào)通路在放射后衰老細(xì)胞中的表達(dá)�！痉椒ā啃∈箝g充質(zhì)干細(xì)胞C3H10T1/2行3.5GyΧ射線照射,于照射后各時(shí)間點(diǎn)行Hoechst33258染色和Annexin V/FITC染色檢測(cè)細(xì)胞凋亡,流式測(cè)細(xì)胞周期,行SA-β-gal染色檢測(cè)細(xì)胞衰老。采用Realtime PCR技術(shù)檢測(cè)Fas及其配體FasL,p53及其下游組分p21^WAF1基因的表達(dá),免疫熒光法檢測(cè)細(xì)胞Fas蛋白的表達(dá)。Realtime PCR技術(shù)檢測(cè)衰老細(xì)胞中經(jīng)典Wnt信號(hào)通路中Wnt3a,非經(jīng)典Wnt信號(hào)通路中Wnt5a及與Wnt信號(hào)存在串話的shh信號(hào)表達(dá)�！窘Y(jié)果】Hoechst33258染色和Annexin V/FITC染色顯示細(xì)胞在照射后3h開始出現(xiàn)凋亡,至12h達(dá)高峰,此后凋亡率逐漸下降。Fas、FasL mRNA在照射后3h開始增高,12h達(dá)到高峰,照射后一周恢復(fù)正常。同樣,免疫熒光染色顯示照射后Fas蛋白表達(dá)增加,于照射后6h熒光強(qiáng)度開始增加,至12h呈強(qiáng)陽(yáng)性反應(yīng),至24h基本恢復(fù)正常。放射后72hSA-β-... 

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

哺乳動(dòng)物中兩種類型細(xì)胞衰老

小鼠和人類細(xì)胞中參與細(xì)胞衰老的信號(hào)通路

圖 3 .經(jīng)典 Wnt 信號(hào)通路參與細(xì)胞衰老過(guò)程Wnt 家族是一類分泌型糖蛋白，在胚胎發(fā)育的多個(gè)階段起重要作用。許多研究表明 Wnt 信號(hào)通路對(duì)干細(xì)胞的自我更新和擴(kuò)增具有重要的支持作用 。Wnt 信號(hào)通路包括經(jīng)典 Wnt 信號(hào)通路和非經(jīng)典 Wnt 信號(hào)通路。目前為止，在哺乳動(dòng)物至少有 19 種 Wnt蛋白，其中 Wnt1、2、3、3a、8、8b 屬經(jīng)典 Wnts，Wnt5、5a、5b、6、7a、11 屬非經(jīng)典 Wnts。在間充質(zhì)干細(xì)胞表達(dá)多個(gè) Wnt 配體如 Wnt2、4、5a、11、16 等。經(jīng)典 Wnt信號(hào)主要促進(jìn)間充質(zhì)干細(xì)胞增殖和保持其處于未分化狀態(tài)，而非經(jīng)典 Wnt 通路則在調(diào)節(jié)和促進(jìn) MSC 向成骨和成軟骨等多向分化方面發(fā)揮重要作用,可與經(jīng)典 Wnt 通路相互競(jìng)爭(zhēng)抑制【12】。以往許多研究表明 Wnt 信號(hào)的激活可延緩細(xì)胞衰老，對(duì)某些衰老相關(guān)的疾病如老年癡呆癥、糖尿病、早衰綜合癥、腫瘤和骨質(zhì)疏松病等的研究也表明，激活的 Wnt 通路可減緩細(xì)胞的衰老。但是，近年來(lái)許多研究顯示 Wnt 信號(hào)的持續(xù)活化會(huì)導(dǎo)致干細(xì)胞的衰老。LIU 等【13】通過(guò)對(duì) Klotho 衰老小鼠模型研究發(fā)現(xiàn)：Wnt 通路的持

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]放射損傷對(duì)小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨潛能及造血干細(xì)胞龕位的影響[J]. 馬杰,史明霞,李炳宗,李靜,房佰俊,孫慧,趙春華.  西安交通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2009(03)
[2]輻射導(dǎo)致小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞衰老的機(jī)制研究[J]. 張可杰,朱艷,孫漢英,黃麗芳,付勁蓉,劉文勵(lì).  中華醫(yī)學(xué)雜志. 2006(48)
[3]造血干細(xì)胞聯(lián)合骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植實(shí)驗(yàn)效果觀察[J]. 汪萍,呼瑩,姜學(xué)英,馬冠杰,宋永平,趙春華.  鄭州大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2006(05)



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