目的 本課題旨在構(gòu)建一種新的線粒體DNA（mtDNA）16srRNA和ND4基因的熒光標記復(fù)合擴增檢測體系，以期為法醫(yī)學(xué)種屬鑒定提供備選技術(shù)手段。方法 從GeneBank基因數(shù)據(jù)庫中搜索并獲得人和多種動物（包括猴、豬、狗、魚、鼠、豚鼠、兔、馬、鱔魚、蛙、雞、鴨、羊、牛等）的線粒體DNA序列，并利用基因數(shù)據(jù)庫的序列分析軟件，對人與上述動物的線粒體DNA序列進行同源性分析。利用引物設(shè)計軟件（Primer5）對篩選出的兩個mtDNA序列ND4基因和16srRNA基因設(shè)計兩對引物，每對引物中的一條在5’端標記熒光素（6-FAM）。按傳統(tǒng)復(fù)合擴增技術(shù)首先建立復(fù)合擴增體系，然后用ABI PRISM 310基因分析儀對產(chǎn)物進行分析，建立試驗檢測方法。用建立的檢測方法對人及十四種不同的動物DNA進行復(fù)合擴增和檢測，并對30例實驗室存放5-15年的陳舊人血痕進行檢測。結(jié)果本研究成功建立了mtDNAl6srRNA和ND4基因的熒光標記復(fù)合擴增體系。ABI PRISM 310基因分析儀對擴增產(chǎn)物進行檢測時，人類DNA擴增產(chǎn)物出 

【文章來源】：四川大學(xué)四川省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

一人和動物的16SrRNA和NL礴基因復(fù)合擴增的銀染結(jié)果

四川大學(xué)碩士論文(掛魚塾田力圖2一1AB1310分析儀對女性DNA擴增產(chǎn)物的分析，紅色為ROX為吞R叼隨標記的16叮RNA和ND吟數(shù)據(jù)為各片段和內(nèi)標的保留時間、的相對位置�；驍U增產(chǎn)物，檢出兩個籃色峰。內(nèi)標，藍色圖中的表內(nèi)由內(nèi)標定義的片段大小、峰高、峰面積和數(shù)據(jù)圖2一2AB3I10分析儀對男性DNA擴增產(chǎn)物的分析。紅色為ROX內(nèi)標。藍色為吞E叼功標記的16srRNA和N刃吟基因，檢出兩個籃色峰。12-

圖中的表內(nèi)由內(nèi)標定義的片段大小、峰高、峰面積和數(shù)據(jù)圖2一2AB3I10分析儀對男性DNA擴增產(chǎn)物的分析。紅色為ROX內(nèi)標。藍色為吞E叼功標記的16srRNA和N刃吟基因，檢出兩個籃色峰。12-

【參考文獻】：
期刊論文
[1]法醫(yī)骨組織學(xué)研究[J]. 張繼宗,譚祖鑫.  刑事技術(shù). 2004(04)
[2]人和動物SON基因3’非編碼區(qū)的PCR測序分析[J]. 邵武,姜先華,于蛟,趙賀群.  中國法醫(yī)學(xué)雜志. 2003(02)
[3]骨骼種屬鑒定的組織學(xué)研究[J]. 張繼宗.  法醫(yī)學(xué)雜志. 2001(03)



本文編號：2985583