發(fā)布時(shí)間：2020-11-15 06:12

　　 目的:流行病學(xué)研究表明:氡與皮膚癌等皮膚相關(guān)疾病的發(fā)生具有相關(guān)性。但氡對(duì)于皮膚組織影響及機(jī)理尚未見報(bào)道。本研究旨在研究氡對(duì)于皮膚組織和細(xì)胞的影響及分子網(wǎng)絡(luò)變化。方法:通過(guò)建立染氡小鼠及皮膚成纖維細(xì)胞(WS1)模型,探究染氡對(duì)于皮膚組織及WS1細(xì)胞的影響,篩選皮膚組織差異蛋白和mi RNA,并通過(guò)體外實(shí)驗(yàn)研究差異蛋白對(duì)皮膚細(xì)胞WS1生物學(xué)功能影響。(1)利用多功能生態(tài)氡室和多功能生態(tài)細(xì)胞氣體染毒裝置建立氡染毒小鼠(BALB/c和C57小鼠)模型和細(xì)胞染氡模型。通過(guò)對(duì)不同染氡劑量小鼠皮膚組織的HE染色、β-半乳糖苷酶染色、Masson染色,觀察小鼠皮膚組織損傷變化。通過(guò)對(duì)染氡細(xì)胞WS1的形態(tài)學(xué)觀察、MTT檢測(cè)、凋亡檢測(cè)、細(xì)胞周期檢測(cè)和細(xì)胞核染色,觀察皮膚細(xì)胞染氡后的變化;(2)收集染氡小鼠模型的皮膚組織蛋白,通過(guò)同位素標(biāo)記相對(duì)和絕對(duì)定量(i TRAQ)技術(shù)和HPLC/MS技術(shù),對(duì)對(duì)照組/染氡皮膚組織進(jìn)行分析。通過(guò)數(shù)據(jù)庫(kù)搜索,對(duì)差異蛋白進(jìn)行生物信息學(xué)分析;(3)采用mi RNA芯片篩選對(duì)照組/染氡皮膚組織中差異表達(dá)的mi RNA。(4)研究mi RNA對(duì)脂肪酸合成酶(FASN)的表達(dá)調(diào)控;(5)研究表達(dá)FASN對(duì)皮膚細(xì)胞生物功能的影響。結(jié)果:(1)染氡能夠引起小鼠皮膚組織的損傷,包括角質(zhì)層變薄和缺損、皮膚組織的衰老以及皮膚組織內(nèi)線粒體的腫脹形態(tài)變化;(2)染氡能夠抑制皮膚細(xì)胞WS1的增殖,增加細(xì)胞凋亡率,使細(xì)胞核形態(tài)發(fā)生變化,產(chǎn)生固縮和破碎;(3)通過(guò)蛋白組學(xué),篩選出了3496個(gè)差異蛋白,其中上調(diào)超過(guò)1.8倍的45個(gè),下調(diào)低于0.83的83個(gè)。篩選可能參與染氡對(duì)小鼠皮膚組織影響的上調(diào)蛋白:脂肪酸合成酶FASN;(4)通過(guò)mi RNA分析和靶基因預(yù)測(cè),篩選出了57個(gè)差異mi RNA和5907個(gè)下游靶基因。通過(guò)Target Scan數(shù)據(jù)庫(kù)篩選出下調(diào)mi R206-3p和mi R378a-3p;(5)通過(guò)生物信息學(xué)分析建立了染氡后差異蛋白質(zhì)和mi RNA的相互作用網(wǎng)絡(luò)。差異表達(dá)的mi R206-3p和mi R378a-3p能調(diào)控脂肪酸合成酶(FASN)的表達(dá)。過(guò)表達(dá)FASN對(duì)皮膚細(xì)胞WS1增殖產(chǎn)生了抑制,引起了細(xì)胞周期S期的阻滯,同時(shí)還增加了細(xì)胞凋亡率和破壞了細(xì)胞核形態(tài)。結(jié)論:氡能夠引起皮膚組織和細(xì)胞的變化甚至損傷,影響其生物學(xué)功能;氡能引起的皮膚組織一系列的蛋白質(zhì)和mi RNA差異變化;差異表達(dá)的mi R206-3p和mi R378a-3p能調(diào)控FASN的表達(dá);過(guò)表達(dá)差異蛋白FASN能夠影響皮膚細(xì)胞增殖,增加凋亡等。
【學(xué)位單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：R818
【部分圖文】：

miRNA加工過(guò)程

將 transwell 培養(yǎng)皿置于細(xì)胞氣體染毒裝置染毒，見圖 2。對(duì)細(xì)胞直接染毒，膜下方通過(guò)培養(yǎng)基保持細(xì)胞濕潤(rùn)。氧氣濃mL/min，染毒時(shí)間為 30min，暴露氡濃度為 20000Bq/m3。1 代（記作 HR-1）。收集細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)，進(jìn)行下一代染毒。

同劑量的氡染毒后，小鼠皮膚組織真皮組織及毛囊等皮膚附屬結(jié)構(gòu)依然清晰。但隨著染氡劑量的增加，皮膚組織表皮逐漸變現(xiàn)了明顯的腫脹，在 120WLM 的 BALB/c 小鼠皮膚組中，甚至失（圖 1.1.1 箭頭所示）。同樣的角質(zhì)層變薄的現(xiàn)象也出現(xiàn)在了
【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前4條

1 苗超,仲恒高,孫靜,聶繼華,蘇世標(biāo),童建;氡及其子體對(duì)小鼠血液和骨髓細(xì)胞的影響[J];中國(guó)血液流變學(xué)雜志;2005年02期

2 李冰燕,童建;氡及其子體對(duì)大鼠靶器官損傷的研究[J];衛(wèi)生毒理學(xué)雜志;2004年03期

3 李冰燕,童建;氡及其子體對(duì)大鼠免疫器官的影響[J];中華放射醫(yī)學(xué)與防護(hù)雜志;2004年03期

4 ;Mitochondrial microsatellite instability in gastric cancer and its precancerous lesions[J];World Journal of Gastroenterology;2004年06期

本文編號(hào)：2884438