【摘要】：目的:研究大鼠急性一氧化碳中毒(Acute carbon monoxide poisoning,ACMP)后HO-1及c-fos在呼吸系統(tǒng)、神經系統(tǒng)及循環(huán)系統(tǒng)各主要器官中的表達規(guī)律,探索其在法醫(yī)學中的應用價值。方法:SD健康雄性大鼠50只,隨機分為實驗對照組(n=10)及急性一氧化碳中毒組(n=40),急性一氧化碳中毒組采用改進的Thom SR法制作大鼠急性一氧化碳中毒模型。急性一氧化碳中毒組是向染毒缸內注入濃度為99%的高純一氧化碳氣體,通過一氧化碳氣體檢測管控制染毒缸內一氧化碳氣體的濃度,使其在3000ppm-4000ppm之間,再將清醒大鼠放入染毒缸內,使大鼠吸入一氧化碳氣體30-40分鐘。分別于中毒后3h、6h、12h和24h麻醉處死大鼠。實驗對照組直接將大鼠放入染毒缸內30-40分鐘,不通入一氧化碳氣體。應用蘇木素-伊紅染色法觀察心、腦、肺組織的病理形態(tài)損傷情況,采用SABC免疫組織化學法及Western-Blot檢測技術觀察HO-1、c-fos蛋白的表達情況,通過對檢測結果的統(tǒng)計分析,探討急性一氧化碳中毒中HO-1以及c-fos蛋白在心、腦、肺組織中的含量變化規(guī)律及其敏感性。結果:1、光鏡下HE染色結果顯示:與實驗對照組相比,急性一氧化碳中毒各組腦組織呈缺氧性改變,腦組織疏松水腫,微血管及毛細血管擴張、充血,炎細胞浸潤,神經纖維腫脹。肺組織與實驗對照組相比肺泡壁變薄,肺泡腔擴張,可見有少許斷裂,支氣管各層炎性細胞浸潤,肺泡腔內可見大量紅細胞。心肌纖維未見明顯異常。2、免疫組織化學法檢測HO-1、c-fos蛋白表達結果顯示:(1)對比實驗對照組,c-fos蛋白在一氧化碳中毒各組肺組織中均有大量陽性細胞,主要表達肺泡上皮細胞、肺泡壁淋巴細胞及血管內皮細胞,于3h達高峰(p0.05),并呈時間相關性表達;在腦組織中主要表達于神經細胞核中,3h即可見陽性細胞表達,12h達到高峰(p0.05),并呈時間相關性表達。心肌中主要表達于心肌細胞核,呈棕黃色顆粒,于6h達高峰(P0.05),且與時間呈相關性。(2)HO-1蛋白在肺組織中呈下降趨勢(P0.05),一氧化碳中毒各組與實驗對照組相比皆有統(tǒng)計學意義,主要表達于肺泡壁、支氣管壁細胞以及淋巴細胞,中性粒細胞以及巨噬細胞中也有陽性的表達。HO-1在腦組織中呈上升趨勢,一氧化碳中毒各組與實驗對照組進行比較得出P0.05,其主要圍繞神經細胞胞核表達,胞核中亦可觀察到少量陽性表達顆粒。HO-1在心肌細胞中表達不明顯,少量陽性細胞,與實驗對照組相比無統(tǒng)計學差異(P0.05)。3、Western-Blot檢測結果顯示:(1)c-fos蛋白在一氧化碳中毒組肺組織中相比實驗對照組表達為上升趨勢(P0.05),3h大量表達并至高峰(P0.05),6h略為下降后12h再次升高(P005),24h下降(P0.05)呈“雙峰趨勢”。心肌和腦組織中c-fos蛋白的表達趨勢與肺組織大致相似皆呈“雙峰趨勢”,只是峰值時間有所推遲,心肌為6h升至高峰(P0.05),腦組織高峰出現(xiàn)在12h(P0.05)。(2)HO-1隨一氧化碳中毒后時間的延長在肺組織中表達量呈明顯下降趨勢(P0.05),實驗對照組與一氧化碳中毒各組相比P0.05。在腦組織中呈上升趨勢(P0.05),實驗對照組與一氧化碳中毒各組相比P0.05。心肌內HO-1表達較少,各組間表達變化無統(tǒng)計學差異(P0.05)。結論:本實驗在建立大鼠急性一氧化碳中毒模型的基礎上,以正常為對照組,將中毒組按不同存活時間分3h組、6h組、12h組和24h組,觀察心、腦、肺在各組中病理形態(tài)的變化,探討HO-1及c-fos蛋白的表達趨勢。1、相比實驗對照組,一氧化碳中毒組中腦和肺的變化較大,呈急性缺氧性改變,心肌細胞未發(fā)現(xiàn)明顯異常,說明在急性一氧化碳中毒的早期腦及肺組織受中毒影響較大,易發(fā)生病理改變。2、與實驗對照組相比,c-fos蛋白在心、腦、肺組織內表達變化趨勢相似,即皆呈“雙峰趨勢”,但其表達時相及峰值不同,說明各器官在一氧化碳中毒時反應及應激狀態(tài)的啟動時間有所差別。HO-1在肺的表達趨勢與在其他類型缺氧肺組織內的表達不一致,呈現(xiàn)出下降趨勢,說明HO-1在肺組織的表達可能受到外源性一氧化碳氣體的抑制,相反,HO-1在腦組織內呈上升趨勢,這為急性一氧化碳中毒早期肺損傷及一氧化碳中毒遲發(fā)性腦病的預防及治療提供了新的思路,并且在一氧化碳中毒的法醫(yī)學鑒定及時間推斷也有著重要的意義。
【學位授予單位】：皖南醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：D919.1
【圖文】：

出現(xiàn)聚集現(xiàn)象，部分出現(xiàn)抽搐，甚至角弓反張。活動減少但能對外來的刺激做出反應，耳廓和尾尖出現(xiàn)櫻桃紅色。30-40 分鐘時，出現(xiàn)昏迷狀態(tài)，大小便失禁，四肢癱軟無力，對外來的刺激基本無反應。結束后將大鼠拿出染毒缸，放置通風處直至恢復意識。將中毒死亡的大鼠解剖發(fā)現(xiàn)，內臟充血明顯，并有散在的出血點，血液呈櫻桃紅色且粘稠易凝固。實驗對照組大鼠，放入染毒缸內活動無異常，呼吸心跳均勻，內臟、血液均未發(fā)現(xiàn)明顯異常。2 HE 染色觀察大鼠急性一氧化碳中毒后各組織細胞的形態(tài)改變2.1 肺實驗對照組大鼠肺組織肺泡壁結構清晰完整、排列規(guī)則，肺間隔未見異常、肺動脈無增厚，肺間質無水腫增厚，肺泡腔內未見炎細胞及血細胞浸潤（見圖 1）。中毒各組與實驗對照組相比肺泡壁變薄，肺泡腔擴張，可見有少許斷裂，支氣管各層炎性細胞浸潤，肺泡腔內可見大量紅細胞（見圖 2，3，4，5）。

實驗對照組（HE×400）

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 祝河忠;陳佳娟;童學影;梁慧;;過氧化物酶體增生物激活受體激活物對ox-LDL誘導內皮細胞c-fos表達的影響[J];醫(yī)學信息;2018年20期

2 王躍春,王子棟,何斯純,柏志全,王力軍;Alzheimer病模型大鼠腦組織c-fos基因的表達[J];神經解剖學雜志;2002年02期

3 王躍春,王子棟,周麗麗;Alzheimer病模型大鼠類P3及其c-fos基因表達[J];中國老年學雜志;2003年04期

4 王昭金,萬選才;大鼠同種異體甲狀旁腺腦室內移植后膠質細胞的c-fos表達[J];神經解剖學雜志;1998年01期

5 張婷卓;王金海;趙敏;鮑英存;鄢琦;張振昶;杜小正;姜華;田亮;袁博;李興蘭;;頭穴透刺對局灶性腦缺血大鼠海馬CA1區(qū)P-CaMKⅡ、c-fos表達的影響[J];中國中醫(yī)藥科技;2018年06期

6 周孝道;;鞘內注射右美托咪定對剖宮產大鼠脾c-fos表達的影響[J];中國臨床藥理學雜志;2018年14期

7 賀新奇;邱會卿;韓雅茹;彭軍路;;肥大細胞浸潤及原癌基因c-fos表達可引起下肢靜脈曲張[J];基因組學與應用生物學;2018年10期

8 徐玉英;游言文;任秀花;郭艷樺;;鞘內注射丹參酮ⅡA對坐骨神經慢性壓迫大鼠脊髓背角c-fos表達的影響[J];解剖學研究;2015年06期

9 陳良為,管振龍,張文斌;大鼠面部和胃腸道傷害性傳入信息在延髓內的匯聚──c-fos表達研究[J];神經科學;1997年03期

10 杜艷;趙利華;吳海標;王進聲;姚平;;艾炷灸對D-半乳糖衰老小鼠大腦皮層細胞周期蛋白依賴性激酶抑制因子、視網膜母細胞瘤抑制蛋白及c-fos的影響[J];針刺研究;2010年04期

相關博士學位論文 前1條

1 何峰;中央杏仁核對胃運動的調控作用及其在束縛—浸水應激反應中的活動特征[D];山東師范大學;2016年

相關碩士學位論文 前3條

1 黃衛(wèi)巍;大鼠急性一氧化碳中毒后HO-1、c-fos表達的研究[D];皖南醫(yī)學院;2019年

2 葛萬文;Neuronostatin對小鼠痛覺的影響及其可能機制的研究[D];蘭州大學;2011年

3 許蓬娟;損毀大鼠下丘腦腹內側核對應激引起的腦干c-Fos表達及胃酸分泌的影響[D];山東師范大學;2010年

本文編號：2737047