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不同鉑類對CNE-2細胞株放射增敏的體外比較實驗研究

發(fā)布時間:2019-10-12 00:35
【摘要】:目的:應用細胞克隆形成法,初步比較不同鉑類順鉑、卡鉑、奧沙利鉑、奈達鉑對人鼻咽癌低分化細胞株CNE-2的放射增敏效果以及其差異性。方法:培養(yǎng)鼻咽癌低分化細胞株CNE-2。將指數(shù)生長期的細胞按5×10~3個/孔細胞密度接種到96孔板,用WST-1法進行順鉑、卡鉑、奧沙利鉑、奈達鉑的細胞毒性檢測,計算得出各自IC10、IC50值。將IC10作為放射增敏的工作濃度。培養(yǎng)CNE-2細胞至指數(shù)生長期,并進行消化、重懸、計數(shù),根據(jù)不同的射線劑量梯度,在培養(yǎng)皿中加入相應的細胞總數(shù)細胞懸液。實驗分為正常對照組、單純照射組、單純藥物組、藥物+照射組,其中藥物+照射組分為四個亞組:順鉑+照射組、卡鉑+照射組、奧沙利鉑+照射組、奈達鉑+照射組。每組設三個培養(yǎng)皿。在射線照射前1天分別加入工作濃度IC10的順鉑、卡鉑、奧沙利鉑、奈達鉑,各組分別給予0、0.5、1、2、3、4、6、8、10Gy照射劑量梯度照射。采用醫(yī)用直線加速器,照射條件為6MV X線照射,劑量率為:412.31cGy/min,SSD為100cm,PDD為97.232%,照射野大小為30×30cm。接受照射后4小時,棄去原培養(yǎng)基,加入等量新的培養(yǎng)基在37℃、0.5%CO_2恒溫孵育箱中培養(yǎng)14d,記錄不同處理對CNE-2細胞的殺傷作用,應用計數(shù)克隆形成方法,計算細胞存活分數(shù),克隆形成率,應用單擊多靶數(shù)學模型進行曲線擬合作圖(GraphPad Prism5.0軟件)。計算N、D_0、Dq、SER_(D0)、SER_(Dq)、SER_(SF2),比較單純照射組和藥物+照射組之間,以及各個藥物+照射亞組之間的放射增敏作用的強弱。結果:順鉑、卡鉑、奧沙利鉑、奈達鉑對CNE-2細胞的IC50分別為0.28ug/ml、1.43ug/ml、18.78ug/ml;IC10分別為1.94ug/ml、7.906ug/ml、1.486ug/ml、1.3833ug/ml。CNE-2細胞的克隆形成率為72%。單純照射組的N值為2.305,D_0值為1.478Gy,Dq值為1.234Gy;順鉑+照射組的N值為2.547,D_0值為1.011Gy, Dq值為0.945Gy,SER_(D0)、SER_(Dq)、SER_(SF2)分別為1.462、1.306、1.579;卡鉑+照射組的N值為2.263,D_0值0.994Gy, Dq值為0.812Gy,SER_(D0)、SER_(Dq)、SER_(SF2)分別為1.487、1.521、1.796;奧沙利鉑+照射組的N值為2.257,D_0值為0.969Gy,Dq值為0.789Gy,,SER_(D0)、SER_(Dq)、SER_(SF2)分別為1.524、1.563、1.884;奈達鉑+照射組的N值為2.098,D_0值為0.954Gy,Dq值為0.707Gy,SER_(D0)、SER_(Dq)、SER_(SF2)分別為1.549、1.746、2.070。結論:研究結果顯示,順鉑、卡鉑、奧沙利鉑、奈達鉑在IC10低濃度下對鼻咽癌CNE-2細胞株均具有放射增敏作用。放射增敏由強到弱為奈達鉑,奧沙利鉑,卡鉑,順鉑。
【學位授予單位】:瀘州醫(yī)學院
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2012
【分類號】:R730.55

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