【摘要】：目的研究大鼠腦、肝臟組織3種RNA相對表達(dá)量與死亡時(shí)間的關(guān)系,比較兩組織用于死亡時(shí)間推斷的適用性。方法將48只Wistar大鼠隨機(jī)分為6組,斷頸處死,分別于死后0、24、48、72、120、168 h取大鼠腦皮質(zhì)及肝右外葉。提取腦、肝組織總RNA,采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,RT-qPCR)技術(shù)檢測兩組織中miR(腦特異性miR-124、肝特異性miR-122)及甘油醛-3-磷酸脫氫酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)、β-肌動蛋白(β-actin)mRNA的循環(huán)閾值(cyclic threshold,Ct)。用Best Keeper程序篩選內(nèi)參,對目的RNA的Ct值進(jìn)行2~(-ΔΔC)t轉(zhuǎn)換,用SPSS及Graph Pad軟件對其進(jìn)行單因素方差分析,并對ΔCt值進(jìn)行曲線回歸分析。結(jié)果 miR-124和miR-122分別為腦、肝組織的內(nèi)參。腦組織GAPDH、β-actin mRNA的相對表達(dá)量在死后72 h內(nèi)逐漸增加,并于死后72 h達(dá)到峰值,之后逐漸下降(P0.05);而肝GAPDH、β-actin mRNA的相對表達(dá)量從死后48 h開始逐漸下降(P0.05)。所有分子的最適回歸模型均為三次模型,且肝組織的相關(guān)系數(shù)r大于腦組織。結(jié)論大鼠腦、肝組織中GAPDH、β-actin mRNA的相對表達(dá)量與死亡時(shí)間具有相關(guān)性,肝組織比腦組織更適用于死亡時(shí)間推斷。
[Abstract]:Objective to study the relationship between the relative expression of three kinds of RNA in rat brain and liver and the time of death, and to compare the applicability of the two tissues in predicting the time of death. Methods 48 Wistar rats were randomly divided into 6 groups. The cerebral cortex and right lateral lobe of liver were taken at 0 h, 24 h, 48 h and 721 20168 h after death. Total RNA, was extracted from brain and liver tissue by real-time fluorescence quantitative PCR (real-time fluorescence quantitative PCR,RT-qPCR) to detect miR (brain-specific miR-124, liver-specific miR-122), glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH) and 尾-actin (尾-actin) mRNA) circulation threshold (cyclic threshold,Ct) in the two tissues. The internal parameters were screened by Best Keeper program, the KT value of the target RNA was transformed by 2 ~ (- 螖 C) t), the one-factor variance analysis was carried out by SPSS and Graph Pad software, and the curve regression analysis of 螖 C _ t value was carried out. Results miR-124 and miR-122 were internal parameters of brain and liver, respectively. The relative expression of GAPDH, 尾-actin mRNA in brain tissue increased gradually within 72 hours after death, reached the peak at 72 hours after death, and then decreased gradually (P 0.05), while the relative expression of GAPDH, 尾-actin mRNA in liver began to decrease gradually from 48 hours after death (P 0.05). The optimal regression model of all molecules was cubic model, and the correlation coefficient of liver tissue was higher than that of brain tissue. Conclusion the relative expression of GAPDH, 尾-actin mRNA in rat brain and liver tissue is correlated with the time of death, and the relative expression of 尾-actin mRNA in liver tissue is more suitable for the inference of death time than in brain tissue.
【作者單位】： 青海大學(xué)醫(yī)學(xué)院;青海省公安廳刑事技術(shù)研究管理中心;
【分類號】：D919

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本文編號：2507479