發(fā)布時(shí)間：2019-04-23 10:04

【摘要】：目的 為了對(duì)犯罪現(xiàn)場(chǎng)體液斑跡同時(shí)進(jìn)行組織來(lái)源和個(gè)體識(shí)別的鑒定，建立一種準(zhǔn)確、靈敏、快速的新方法。本文從基因表達(dá)的組織特異性入手，篩選出包括外周血、月經(jīng)血、精液、陰道分泌物、唾液在內(nèi)的常見(jiàn)體液特異性的mRNA標(biāo)識(shí)，通過(guò)RNA判斷體液來(lái)源以及DNA進(jìn)行個(gè)體識(shí)別。 方法 根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求，分別收集外周血、月經(jīng)血、精液、陰道分泌物、唾液樣本；比較并確立同時(shí)提取RNA和DNA的方法；選取了用于體液組織來(lái)源識(shí)別的7對(duì)引物,擴(kuò)增產(chǎn)物在300bp以下，片段長(zhǎng)度相似則采用不同熒光標(biāo)記用以區(qū)分，統(tǒng)一了擴(kuò)增條件，使7對(duì)引物可以在相同參數(shù)下擴(kuò)增，用毛細(xì)管凝膠電泳法對(duì)RNA逆轉(zhuǎn)錄擴(kuò)增產(chǎn)物和DNA擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行檢驗(yàn)；應(yīng)用所建立的方法分別通過(guò)對(duì)外周血、月經(jīng)血、精液、唾液、陰道分泌物進(jìn)行驗(yàn)證。 結(jié)果 1確定采用TRIzol法進(jìn)行RNA和DNA的同時(shí)提取。 2根據(jù)目標(biāo)樣本的序列，篩選多對(duì)引物，探索優(yōu)化擴(kuò)增體系，使擴(kuò)增條件能夠同時(shí)滿足多對(duì)引物的需要。 3對(duì)外周血、月經(jīng)血、精液、陰道分泌物、唾液樣本進(jìn)行驗(yàn)證，均得到可靠結(jié)果。 4五種體液除了均表達(dá)管家基因18S、GAPDH外，外周血表達(dá)SPTB；月經(jīng)血表達(dá)MMP-7、SPTB、HBD-1；精液表達(dá)PRM-2；陰道分泌物表達(dá)HBD-1；唾液表達(dá)STATH。 結(jié)論 1本課題所建立的是一種對(duì)體液判別有效、實(shí)用的方法。 2根據(jù)RNA在不同類型、功能的細(xì)胞或組織中的表達(dá)模式存在差異，，確立通過(guò)檢測(cè)RNA表達(dá)水平來(lái)進(jìn)行體液組織來(lái)源鑒別的方法。提取RNA進(jìn)行組織來(lái)源鑒定的同時(shí)進(jìn)行DNA個(gè)體識(shí)別的檢驗(yàn)。 3采用RNA作為研究目標(biāo)進(jìn)行體液識(shí)別的標(biāo)識(shí)，為此研究領(lǐng)域提供了一個(gè)新的思路。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號(hào)】：D919

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2463371