【摘要】：目的：研究SD大鼠皮膚急性β射線損傷后局部創(chuàng)面內(nèi)不同時期表皮干細胞表面標記物β1整合素和p63表達的動態(tài)變化，探討急性β射線皮膚損傷創(chuàng)面難愈合的機制，為臨床治療提供一定的理論依據(jù)。 方法：正常2～3月齡SD大鼠102只，雌雄不限，體重（200±20）g，隨機分為3組。照射組（實驗組）：n=48，以直線加速器產(chǎn)生6MeV高能電子束單次照射大鼠臀部裸露皮膚，照射直徑為3cm，總吸收劑量35Gy，建立急性深Ⅱ度β射線皮膚損傷動物模型；燙傷組（陽性對照組）：n=48，選用直徑為2.5cm裝滿熱水的試管置于溫度設定為91℃的電熱恒溫水浴鍋內(nèi)，將大鼠裸露的臀部輕按在試管口并與水面緊密接觸，致傷時間為8s，建立皮膚深Ⅱ度熱力燙傷動物模型，作為普通燙傷對照；正常組（陰性對照組）：n=6，正常大鼠。取正常大鼠臀部皮膚組織及不同時間點（建立模型后的第1、3、7、14、21、28、35天）創(chuàng)面皮膚組織，采用組織病理切片技術、免疫組織化學法（SP法）及圖像分析方法檢測不同時相點表皮干細胞表面標記物β1整合素和p63的表達情況。 結果：1、大體觀察：照射組：大鼠于照射后3～5天臀部皮膚開始出現(xiàn)干性脫皮，受照局部出現(xiàn)充血性紅斑；照射后7～14天，紅斑顏色逐漸加深，形成與照射面積大小一致的皮膚壞死區(qū)，局部腫脹，大鼠易激惹；照射后14～21天，壞死的皮膚脫落后形成干燥創(chuàng)面，創(chuàng)緣紅腫；照射后21～28天，創(chuàng)面周圍漸有新生上皮長入，但生長緩慢；照射28~35天后，創(chuàng)面逐漸收縮，新生表皮區(qū)毛發(fā)生長緩慢。燙傷組：燙傷后即刻創(chuàng)面皮膚變白，光澤差，輕度腫脹，無水皰形成；燙傷3天后創(chuàng)面呈灰白色，邊界清晰，無滲出；燙傷5～7天后創(chuàng)面干燥，開始結痂；燙傷9～14天后痂皮顏色加深，創(chuàng)面收縮，創(chuàng)緣無紅腫及滲出；燙傷21天后痂皮脫落，創(chuàng)面微濕，逐漸縮�。粻C傷后28天左右，創(chuàng)面基本愈合，有稀疏毛發(fā)生長。2、組織病理變化：照射組：照射后1～7天，表皮細胞及毛囊上皮腫脹，細胞數(shù)量減少，真皮及皮下組織出現(xiàn)充血性血管反應，膠原纖維排列紊亂；照射后14天表皮脫落消失，基底層破壞，真皮層受累，部分毛囊及皮脂腺破壞，血管擴張、充血，內(nèi)皮細胞腫脹、脫落；照射后21～28天壞死組織層下膠原纖維變性、溶解、斷裂、排列紊亂，可見成纖維細胞松散聚集形成的細胞團塊，有畸形成纖維細胞，新生毛細血管數(shù)量較少，炎癥細胞數(shù)量不多，肉芽組織增生不良；照射后35天表皮未完全覆蓋創(chuàng)面，可見少量新生血管，膠原排列紊亂。燙傷組：燙傷后1～3天，表皮及大部分真皮組織凝固性壞死，膠原纖維融合成片，血管內(nèi)皮細胞腫脹，創(chuàng)面有炎性細胞浸潤，大部分毛囊、皮脂腺和汗腺被破壞，結構不清；燙傷后7天壞死組織與生活組織部分分離，散在肉芽組織形成；燙傷后14天肉芽組織生長活躍，，同時表皮細胞增殖移行；燙傷后21天壞死組織脫落，可見大量新生表皮組織；燙傷后28～35天創(chuàng)面完全由表皮覆蓋，有毛囊和皮脂腺長出。3、免疫組化：顯示β1整合素和p63陽性細胞的表達：同一組織標本連續(xù)切片中基因物質(zhì)p63陽性細胞的IOD均高于同時相點β1整合素陽性細胞的IOD，二者的變化規(guī)律一致。與正常對照組相比，照射組和燙傷組大鼠從造模后第1天起β1整合素和p63陽性細胞IOD值開始升高。燙傷組在傷后1～21天β1整合素和p63陽性細胞IOD與正常組比較均有統(tǒng)計學意義（P0.05），在傷后14～21天陽性細胞IOD達高峰，之后隨創(chuàng)面逐漸愈合而漸降低，燙傷后28～35天創(chuàng)面完全愈合后IOD值與正常組相比無統(tǒng)計學意義（P0.05）；照射組在照射后1～7天β1整合素和p63陽性細胞IOD增加不明顯，與正常組比較差異無統(tǒng)計學意義（P0.05），照射后14～35天皮膚壞死區(qū)形成，創(chuàng)面出現(xiàn)后，陽性細胞表達增強，IOD值與正常組比較差異有統(tǒng)計學意義（P0.05）；與燙傷組相比，照射組β1整合素和p63陽性細胞持續(xù)低表達，IOD值增加緩慢，在造模后第1、3、7、14、21天5個時間點兩組比較均有統(tǒng)計學差異（P0.05）。 結論：1、以直線加速器產(chǎn)生6MeV高能電子束單次照射大鼠臀部皮膚，總吸收劑量35Gy，成功建立深Ⅱ度急性β射線皮膚損傷動物模型。2、局部皮膚受到一次大劑量β射線外照射后引起的急性損傷創(chuàng)面，與深Ⅱ度燙傷組大鼠相比，愈合過程中，表皮干細胞增殖、分化延遲，不能形成明顯高峰，可能是急性β射線皮膚損傷創(chuàng)面遷延反復、經(jīng)久不愈的原因之一。
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【學位授予單位】：南華大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2012
【分類號】：R818

【參考文獻】

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本文編號：2359705