發(fā)布時間：2018-11-09 10:54

【摘要】：目的： 放射性治療(radioactive therapy,RT)是肺癌、乳腺癌、食管癌等胸部腫瘤患者最主要的治療手段之一。肺是人體中輻射較為敏感的器官,放射治療可使靠近腫瘤周圍的肺組織受到超過其生物效應(yīng)閾值的放射線劑量而導(dǎo)致不同程度的細(xì)胞損傷。放射性肺損傷(radio-pulmonary lesion,RPI)是胸部腫瘤放射治療最為常見并發(fā)癥之一,臨床上通常有兩種表現(xiàn)形式,早期急性放射性肺炎和后期放射性肺纖維化[1]。放射性肺損傷限制了腫瘤的放療劑量,也使放療效果大大降低,其發(fā)病機(jī)制尚不清楚,且缺乏有效的預(yù)測指標(biāo),已成為有效治療胸部腫瘤的一大難題。一旦發(fā)生放射性肺損傷,目前臨床上最常用的治療方法是使用腎上腺皮質(zhì)激素聯(lián)合抗生素[2]。雖然大劑量激素可暫時有效緩解癥狀,抑制肺纖維化的發(fā)展,但容易產(chǎn)生諸多并發(fā)癥。放射性肺損傷嚴(yán)格意義上來講是無菌性炎癥[3],其一旦發(fā)生往往不可逆轉(zhuǎn),因此預(yù)防比治療更重要。近年研究表明放射性肺損傷的發(fā)生發(fā)展是一個有多種細(xì)胞參與,多種細(xì)胞因子和炎癥介質(zhì)相互作用發(fā)生的復(fù)雜生物分子過程[4]。由于其病理機(jī)制的多環(huán)節(jié)及復(fù)雜性,單一環(huán)節(jié)或靶向的干預(yù)效果尚不理想,臨床上仍然缺乏防治放射性肺損傷的特異有效藥物。阿米福叮(amifostine,AMSF)是目前公認(rèn)的世界上唯一比較成熟應(yīng)用于臨床的放射性肺損傷防護(hù)劑[5][6]。遺憾的是,阿米福叮價格昂貴,很少患者能夠負(fù)擔(dān),而且可能存在較大毒副作用，臨床上難以廣泛應(yīng)用。因此,尋找更為高效、低毒、經(jīng)濟(jì)的放射性肺損傷防護(hù)劑就顯得愈加重要了。中醫(yī)藥是我國的傳統(tǒng)瑰寶,中藥具有整體調(diào)節(jié),多成分與多環(huán)節(jié)的作用特點(diǎn),對病理復(fù)雜的疾病可發(fā)揮綜合優(yōu)勢,研究及實(shí)踐證明中醫(yī)藥在放射性肺損傷具有良好作用與發(fā)展前景。大量的臨床研究表明，中醫(yī)藥防治放射性肺炎及肺纖維化療效確切,能有效改善患者的臨床癥狀,提高生活質(zhì)量,降低死亡率,因此探討中醫(yī)藥防治放射性肺損傷具有十分重要的現(xiàn)實(shí)意義。百令膠囊(Bailing Capsule,BC)是人工培養(yǎng)的冬蟲夏草菌絲,經(jīng)生物工程方法制成的中藥制劑,它與天然蟲草的化學(xué)組成與功效基本一致,幾十年來的研究已經(jīng)證實(shí),百令膠囊在調(diào)節(jié)機(jī)體免疫、抗腫瘤、抗輻射等方面發(fā)揮了一定的作用,研究證實(shí),百令膠囊能顯著降低纖維化的重要細(xì)胞因子轉(zhuǎn)化生長因子β(transforming growth factor-β,TGF-β),對改善腎臟及肝臟纖維化方面有一定療效。目前尚未發(fā)現(xiàn)百令膠囊防治放射性肺損傷的作用機(jī)制研究的報(bào)道。本課題分兩部分,第一部分為觀察百令膠囊防治放射性肺損傷大鼠模型的基礎(chǔ)研究。首先復(fù)制放射性肺損傷的大鼠模型,以促炎癥反應(yīng)細(xì)胞因子和促纖維化細(xì)胞因子為切入點(diǎn),從放射性肺炎及肺纖維化的基礎(chǔ)證候著手,以百令膠囊作為養(yǎng)陰清肺的基本藥方,觀察百令膠囊對大鼠肺系數(shù)、肺組織病理形態(tài)的影響；對大鼠肺組織超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase, SOD)活性、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量的影響；對大鼠肺組織基質(zhì)金屬蛋白酶(Matrix Metalloproteinase-2,MMP-2)及其組織抑制劑(Tissue Inhibitor of Matrix Metalloproteinases-2,TIMP-2)蛋白質(zhì)表達(dá)的影響；尤其是對大鼠血漿促炎癥反應(yīng)細(xì)胞因子腫瘤壞死因子a (tumor necrosis factor α,TNF-α)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)及促纖維化細(xì)胞因子TGF-β1的影響。第二部分為觀察百令膠囊對胸部腫瘤患者放射性肺損傷的臨床研究。通過觀察胸部腫瘤患者的放射性肺炎發(fā)生率、臨床癥狀積分、生活質(zhì)量及血漿TGF-β1水平以評價百令膠囊對放射性肺損傷的防治效果,為進(jìn)一步尋找防治放射性肺損傷相關(guān)靶點(diǎn),探求其可能的作用機(jī)制并為臨床使用提供確切可行的科學(xué)依據(jù)。如果能夠證實(shí)百令膠囊確實(shí)具有放射性肺損傷防護(hù)劑之功效,那么對開發(fā)適合我國國情的輻射防護(hù)劑將具有重要意義,對腫瘤放射治療學(xué)的發(fā)展乃至核工業(yè)的發(fā)展,都將起到積極的推動作用。 方法： 第一部分(基礎(chǔ)研究)：將141只6周齡清潔級雄性SD大鼠,隨機(jī)分為正常對照組(對照組)、單純放射模型組(模型組)、百令膠囊預(yù)防組(百令預(yù)防組)、百令膠囊治療組(百令治療組)、地塞米松治療組(地塞米松組),其中正常對照組21只,其它各組均為30只。各組均給予X射線全胸單次照射20Gy,正常對照組除外。百令膠囊用生理鹽水溶解成一定濃度混懸液。正常對照組、模型組于造模后第二天起予等容積的生理鹽水灌胃,百令治療組灌服百令膠囊混懸液,地塞米松組予灌服地塞米松混懸液,每日1次。百令預(yù)防組則于照射前2周起開始灌服百令膠囊混懸液。每組分別于2、4、6周不同時間點(diǎn)隨機(jī)處死大鼠,正常對照組每組7只,其它各組均為10只,腹腔注射10%水合氯醛溶液麻醉大鼠,心臟采血5ml,置肝素抗凝管,4℃3000r/min離心10min,分離血漿,置-20℃冰箱保存待用。采集大鼠肺組織,稱重,計(jì)算肺系數(shù)的變化；HE染色、Masson染色光鏡下觀察大鼠肺組織病理形態(tài)學(xué)變化,采用黃嘌呤氧化酶法測定SOD活性,采用硫代巴比妥酸化學(xué)比色法測定MDA含量,ELISA法檢測大鼠血漿TNF-α、IL-6及TGF-β1含量的變化,免疫組化法觀察大鼠肺組織MMP-2,TIMP-2蛋白表達(dá)的變化。 第二部分(臨床研究)：觀察了從2012年1月至2012年8月來源于贛南醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院腫瘤科接受胸部腫瘤放射治療的患者,共觀察38例,隨機(jī)分為兩組,百令膠囊組(19例)：放射同時服用百令膠囊,從放療第一天開始服用,按500mg/kg,口服,分3次/日,連續(xù)服至放療結(jié)束后一個月。對照組(19例)：單純放療。觀察放射性肺炎發(fā)生率、中醫(yī)臨床癥狀積分評定、生活質(zhì)量及TGF-β1水平等指標(biāo)。 結(jié)果： 第一部分(基礎(chǔ)研究)： (1)在照射后1周至4周各組呈現(xiàn)急性炎癥反應(yīng),其中10Gy、15Gy、20Gy組大鼠全部存活,25Gy組大鼠在照射后2周內(nèi)相繼死亡。結(jié)合觀察大鼠的一般狀態(tài),以20Gy最為典型,提示能在較短時間內(nèi)成功復(fù)制大鼠放射性肺損傷模型最佳照射劑量為20Gy,為今后研究中醫(yī)藥防治放射性肺損傷的作用機(jī)制及防治藥物的篩選最佳照射劑量提供了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。 (2)百令膠囊可顯著降低放射性肺炎大鼠肺系數(shù)(P0.01)。其中百令預(yù)防組作用優(yōu)于百令治療組。百令預(yù)防組、百令治療組、地塞米松組各組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。肺組織病理學(xué)形態(tài)觀察表明,第2、4、6周,百令預(yù)防組、百令治療組與模型組比較,肺泡充血、滲出、出血及炎性細(xì)胞侵潤等方面程度較輕；百令治療組、百令預(yù)防組與地塞米松組比較,炎性程度明顯較輕；第2周地塞米松組肺泡隔充血,出血與模型組比較無差別,但炎性細(xì)胞浸潤相對較輕,4、6周差別不明顯。 (3)百令預(yù)防組、百令治療組、地塞米松組2、4、6周大鼠肺組織中SOD活性均高于模型組(P0.01),MDA含量均低于模型組(P0.01)。其中,百令預(yù)防組SOD活性高于百令治療組、地塞米松治療組(P0.01)。百令治療組高于地塞米松組(P0.05)。：百令預(yù)防組MDA含量低于百令治療組、地塞米松治療組(P0.01),百令治療組低于地塞米松組(P0.05)。 (4)百令預(yù)防組、百令治療組、地塞米松組2、4、6周大鼠血漿中TNF-α、IL-6及TGF-β1低于模型組(P0.01或P0.05)。其中,百令預(yù)防組TNF-α、IL-6及TGF-β1低于百令治療組、地塞米松組(P0.01),百令治療組TNF-α、IL-6及TGF-β1低于地塞米松組(P0.01)。 (5)百令預(yù)防組2、4、6周各時間點(diǎn)大鼠肺組織中MMP-2表達(dá)均低于模型組(P0.01)；百令治療組均低于模型組(2周P0.01；4、6周P0.05)。地塞米松治療組各時間點(diǎn)與模型組比較差異不明顯(P0.05)。百令預(yù)防組大鼠肺組織中MMP-2表達(dá)2、4周明顯低于百令治療組(2周P0.05,4周P0.01),6周差異不顯著(P0.05)。百令預(yù)防組各時間點(diǎn)與地塞米松治療組比較均有顯著差異(2、4周P0.01,6周P0.05)。百令治療組大鼠MMP-2的表達(dá)2周低于地塞米松治療組(P0.05),但4、6周差異不明顯(P0.05)。百令預(yù)防組大鼠肺組織中TIMP-2表達(dá)量明顯低于模型組(2周P0.05,4、6周P0.01)。百令預(yù)防組與模型組比較TIMP-2表達(dá)2、4周下降不顯著(P0.05)、第6周差異顯著(P0.05)。地塞米松治療組各時間點(diǎn)與模型組比較均無顯著差異(P0.05)。百令預(yù)防組2周與百令治療組比較差異不明顯(P0.05),4、6周百令預(yù)防組明顯低于百令治療組(4周P0.05,6周P0.01)。百令預(yù)防組2周與地塞米松治療組比較無明顯差異((P0.05),4、6周明顯低于地塞米松治療組組(P0.01)。百令治療組4周與地塞米松治療組比較無明顯差異(P0.05),6周百令治療組低于地塞米松治療組(P0.05)。 第二部分(臨床研究)： (1)在放射性肺炎發(fā)生率方面,胸部腫瘤放療患者放療結(jié)束6周后,百令組放射性肺炎的總發(fā)生率顯著低于對照組(P0.05)。 (2)在中醫(yī)臨床癥狀積分評定方面,百令組治療咳嗽、咳痰、痰中帶血、胸悶氣短、胸痛和五心煩熱等癥狀方面,在治療后3周和6周后較第1周顯著改善,(P0.05)；百令組在放射后第3周相與對照組比較,在咳嗽、咳痰、痰中帶血、胸悶氣短、胸痛較其有顯著改善(P0.05)；在放射后第6周相與對照組比較,在咳嗽、咳痰、痰中帶血、胸悶氣短較其有顯著改善(P0.01)。 (3)在生活質(zhì)量評定方面,百令組在生活質(zhì)量的改善、穩(wěn)定方面均高于對照組,生活質(zhì)量降低低于對照組,百令組有效率高于對照組,差異有顯著性(P0.05)。 (4)在放療患者血漿TGF-β1水平比較方面,百令組胸部放療患者血漿TGF-β1水平顯著低于對照組,(P0.01),放療6周時血漿TGF-β1水平顯著低于對照組,(P0.01)。 結(jié)論： 第一部分(基礎(chǔ)研究)： (1)本實(shí)驗(yàn)提示制作肺損傷模型最佳照射劑量為20Gy。 (2)百令膠囊對放射性肺損傷大鼠有一定的防治效果。其防治作用可能通過以下途徑實(shí)現(xiàn)：a、增強(qiáng)大鼠肺組織SOD的活性,減少M(fèi)DA含量；b、抑制血漿促炎癥因子IL-6、TNF-α及和促纖維化細(xì)胞因子TGF-β1的釋放；c、降低放射性肺損傷大鼠肺組織MMP-2、 TIMP-2蛋白質(zhì)表達(dá),調(diào)節(jié)MMP-2/TIMP-2的平衡。百令膠囊能從不同程度上抑制或減輕肺泡的炎性反應(yīng),并能抑制肺纖維化的進(jìn)程,從多途徑有效保護(hù)肺組織從而減輕損傷,且預(yù)防優(yōu)于治療,防治效果優(yōu)于地塞米松,未發(fā)現(xiàn)任何副作用。 第二部分(臨床研究)： 百令膠囊對胸部腫瘤患者放射性肺損傷有一定的防治效果。其防治作用主要表現(xiàn)以下方面：a、百令組能降低胸部腫瘤患者放射性肺炎發(fā)生率；b、降低TGF-β1水平；c、降低中醫(yī)臨床癥狀積分評定；d、改善生活質(zhì)量。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R730.55;R285

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 黃鶯;葉燕青;孫潔民;;肺纖維化形成過程中大鼠肺成纖維細(xì)胞分泌TGF-β mRNA及HGF mRNA對肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞的影響[J];重慶醫(yī)學(xué);2010年19期

2 蔡紅兵,羅榮城;放射性肺損傷的中醫(yī)藥防治方法探討[J];第一軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2003年09期

3 房麗;王紅陽;劉衛(wèi)東;王慧;;不同劑量地塞米松防治放射性肺損傷臨床療效觀察[J];廣東醫(yī)學(xué);2009年10期

4 陳軍,王明智;治療放射性肺炎的潤肺通絡(luò)法[J];江南大學(xué)學(xué)報(bào);2002年04期

5 王亞平,李伯祥;川芎嗪防治腎間質(zhì)纖維化作用的實(shí)驗(yàn)研究[J];中國中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志;2002年02期

6 張海;王炳勝;劉秀芳;李鳳玉;雒書鵬;李宏偉;石軍;;每周重復(fù)照射建立大鼠放射性肺損傷模型的評價[J];臨床軍醫(yī)雜志;2009年03期

7 張偉;姜良鐸;張曉梅;魯香鳳;吳建軍;鄧媛;;肺纖方對博萊霉素致肺間質(zhì)纖維化大鼠肺系數(shù)與肺組織病理的影響[J];北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào);2008年08期

8 唐求,王鵬,胡紹;放射性肺炎的發(fā)生機(jī)制及其應(yīng)對[J];臨床肺科雜志;2005年05期

9 吳金平;;清燥救肺湯治療放射性肺炎臨床觀察[J];遼寧中醫(yī)雜志;2006年11期

10 尹強(qiáng),黃英昌,陳玉,牟玲;生脈注射液減輕放射性肺損傷的臨床觀察[J];腫瘤防治雜志;2002年05期

，

本文編號：2320190