【摘要】：目的研究X射線輻照后GC1小鼠精原細胞凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)細胞定位的變化。方法 GC1細胞分別給予0、3、6、9 Gy X射線輻照,溴脫氧尿苷(Brd U)摻入實驗檢測輻照對細胞增殖速率的影響;輻照后48 h,4',6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色觀察細胞核凝集情況,免疫熒光細胞化學(xué)染色檢測胞質(zhì)及胞核中AIF蛋白定位的變化,Western blot法分析細胞總蛋白、胞質(zhì)蛋白及核提取物中AIF蛋白的水平。結(jié)果隨著輻照劑量的增加,GC1細胞增殖速率顯著減慢,細胞活性降低。6 Gy X射線輻照后全細胞提取物中AIF蛋白總量變化不大,但細胞核提取物中AIF顯著增多,即AIF出現(xiàn)核轉(zhuǎn)位的現(xiàn)象。結(jié)論 X射線輻照能夠誘導(dǎo)小鼠精原細胞發(fā)生凋亡,該過程中伴有AIF入核的現(xiàn)象。
[Abstract]:Objective to study the localization of spermatogonial apoptosis-inducing factor (AIF) in GC1 mice after X-ray irradiation. Methods GC1 cells were irradiated with X ray for 0 ~ 3X ~ (69) Gy, respectively. The effect of irradiation on cell proliferation was detected by bromodeoxyuridine (Brd U) incorporation assay, and the nuclear agglutination was observed by 48 h ~ (48 h) after irradiation with 6-diamidine-2-phenylindole (DAPI) staining. The changes of AIF protein localization in cytoplasm and nucleus were detected by immunofluorescence cytochemical staining. The levels of AIF protein in total cellular protein, cytoplasmic protein and nuclear extract were analyzed by, Western blot method. Results with the increase of irradiation dose, the proliferation rate of GC1 cells decreased significantly, and the cell activity decreased. The total AIF protein content in the whole cell extract was not changed after X ray irradiation for 6 Gy, but the AIF in the nuclear extract increased significantly. This is the phenomenon of nuclear translocation in AIF. Conclusion X-ray irradiation can induce apoptosis of spermatogonial cells in mice, which is accompanied by the phenomenon of AIF entry into the nucleus.
【作者單位】： 寧夏醫(yī)科大學(xué)生育力保持教育部重點實驗室;寧夏醫(yī)科大學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)系;寧夏醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院腫瘤醫(yī)院;寧夏醫(yī)科大學(xué)生理學(xué)系;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81460478) 寧夏教育廳優(yōu)青項目(NGY2015095)
【分類號】：R818

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本文編號：2284354