【摘要】：目的：探討補(bǔ)充氫水對大強(qiáng)度和力竭運(yùn)動大鼠海馬氧化應(yīng)激損傷的保護(hù)作用及其可能機(jī)制,為開發(fā)新型抗氧化補(bǔ)劑提供實驗依據(jù)。 研究方法：選取8周齡SD雄性大鼠56只,體重180-220g。隨機(jī)分為力竭運(yùn)動+氫水組(A組)、力竭運(yùn)動+VE組(B組)、力竭運(yùn)動組(C組)、大強(qiáng)度運(yùn)動+氫水組(D組)、大強(qiáng)度運(yùn)動+VE(E組)、大強(qiáng)度運(yùn)動組(F組)及安靜組(J組),每組8只。其中J組大鼠不做運(yùn)動,安靜飼養(yǎng),不進(jìn)行灌胃,自由飲食。A組、B組、C組、D組、E組和F組大鼠先進(jìn)行1wk的適應(yīng)性運(yùn)動,起始速度為10m/min,運(yùn)動10min后,遞增至15m/min,共運(yùn)動20min。之后,A組、B組和C組大鼠進(jìn)行力竭運(yùn)動,方案為：前3wk:15m/min×5min→20m/min×5min→25m/min×50min,第4wk:15m/min×5min→20m/min×5min→25m/min×50min→30m/min×5min→35m/min直至力竭。記錄大鼠力竭運(yùn)動時間。D組、E組和F組大鼠進(jìn)行4周大強(qiáng)度運(yùn)動,運(yùn)動方案為：15m/min×5min→20m/min×5min→25m/min×50min;A組和D組大鼠每次運(yùn)動前30min灌胃氫水,劑量為4m1,B組和E組大鼠每次運(yùn)動前30min灌胃VE溶液,劑量4ml(20mg),C組和F組大鼠每次運(yùn)動前30min灌胃純水4m1。J組大鼠自由飲水。4wk運(yùn)動結(jié)束后,各組大鼠均在術(shù)次運(yùn)動結(jié)束24h后,進(jìn)行灌注固定取材,取大鼠海馬組織,電鏡制樣,觀察大鼠海馬超微組織結(jié)構(gòu)變化情況；另取大鼠血液和海馬組織,測定血漿Hb、血清SDH和CK和海馬組織抗氧化相關(guān)指標(biāo)MDA.SOD和T-AOC,Western-Blot檢測海馬組織自噬相關(guān)蛋白mTOR、pmTOR和LC3B的表達(dá)。 結(jié)果： 1大強(qiáng)度運(yùn)動大鼠海馬神經(jīng)元結(jié)構(gòu)發(fā)生水腫,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和線粒體峭腫脹、結(jié)構(gòu)不清晰；大強(qiáng)度運(yùn)動補(bǔ)充VE組大鼠海馬區(qū)神經(jīng)元結(jié)構(gòu)水腫減輕,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和線粒體腫脹程度減輕；與大強(qiáng)度運(yùn)動組和補(bǔ)充VE組比較,大強(qiáng)度運(yùn)動補(bǔ)充氫水組大鼠海馬神經(jīng)元結(jié)構(gòu)水腫、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和線粒體腫脹程度明顯減輕,超微結(jié)構(gòu)趨于正常。 2力竭運(yùn)動大鼠海馬神經(jīng)元結(jié)構(gòu)水腫嚴(yán)重,細(xì)胞通透性改變,核內(nèi)出現(xiàn)亮區(qū),內(nèi)質(zhì)網(wǎng)嚴(yán)重腫脹擴(kuò)張,線粒體嵴不清晰,細(xì)胞器減少；與力竭運(yùn)動大鼠比較,力竭運(yùn)動補(bǔ)充VE組,大鼠海馬神經(jīng)元的線粒體峭紊亂程度減輕；力竭運(yùn)動補(bǔ)充氫水組大鼠海馬神經(jīng)元結(jié)構(gòu)水腫、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和線粒體腫脹程度明顯減輕,超微結(jié)構(gòu)未恢復(fù)到正常水平。 3大強(qiáng)度運(yùn)動可使大鼠血漿Hb、血清SDH和CK顯著升高(p0.01)。與大強(qiáng)度運(yùn)動組比較,大強(qiáng)度運(yùn)動補(bǔ)充VE組大鼠血漿Hb、血清SDH和CK降低,但無顯著性變化；與大強(qiáng)度運(yùn)動組比較,大強(qiáng)度運(yùn)動補(bǔ)充氫水組大鼠血漿Hb、血清SDH和CK顯著降低(p0.05)；與大強(qiáng)度運(yùn)動補(bǔ)充VE組比較,大強(qiáng)度運(yùn)動補(bǔ)充氫水組血漿Hb、血清SDH有所降低,但無顯著性變化,血清CK顯著降低(p0.01)。 4力竭運(yùn)動可使大鼠血漿Hb、血清SDH和CK顯著升高p0.01)。與力竭運(yùn)動大鼠比較,力竭運(yùn)動補(bǔ)充VE組大鼠血漿Hb、血清SDH和CK降低,但無顯著性差異；與力竭運(yùn)動大鼠比較,力竭運(yùn)動補(bǔ)充氫水組大鼠血漿Hb、血清SDH和CK顯著降低p0.05)；與力竭運(yùn)動補(bǔ)充VE組比較,力竭運(yùn)動補(bǔ)充氫水組大鼠血清CK和SDH有所降低,但無顯著性變化,血漿Hb顯著降低(p0.01)。 5補(bǔ)充氫水組大鼠力竭時間與力竭對照組比較顯著延長(p0.05),與VE補(bǔ)充組比較其力竭時間延長,但無顯著性差異。 6大強(qiáng)度運(yùn)動可使大鼠海馬SOD、MDA和T-AOC顯著高于安靜對照組(p0.05)；與大強(qiáng)度運(yùn)動比較,大強(qiáng)度運(yùn)動補(bǔ)充VE組大鼠海馬SOD和T-AOC有升高趨勢,MDA有降低趨勢,但無顯著性差異；與大強(qiáng)度運(yùn)動組比較,大強(qiáng)度運(yùn)動補(bǔ)充氫水組大鼠海馬組織SOD和T-AOC顯著升高(p0.01,p0.05),MDA顯著降低(p0.05)；與大強(qiáng)度運(yùn)動補(bǔ)充VE組比較,大強(qiáng)度運(yùn)動補(bǔ)充氫水組大鼠SOD,顯著升高(P0.05),T-AOC有升高趨勢,MDA有降低趨勢,但無顯著性差異。 7力竭運(yùn)動大鼠海馬SOD、MDA和T-AOC顯著高于安靜對照組(p0.05,p0.01)；與力竭運(yùn)動大鼠比較,力竭運(yùn)動補(bǔ)充VE組大鼠海馬組織SOD和T-AOC有升高趨勢,MDA有降低趨勢,但均無顯著性差異；與力竭運(yùn)動大鼠比較,力竭運(yùn)動補(bǔ)充氫水組大鼠海馬組織SOD和T-AOC顯著升高(p0.05,p0.01),MDA顯著降低(p0.05)；與補(bǔ)充VE組比較,力竭運(yùn)動補(bǔ)充氫水組大鼠T-AOC顯著升高p0.05),SOD有升高趨勢,MDA有降低趨勢,但均無顯著性差異。 8大強(qiáng)度運(yùn)動大鼠海馬組織mTOR、pmTOR和LC3B表達(dá)顯著高于安靜對照組(p0.01),大強(qiáng)度運(yùn)動補(bǔ)充VE組大鼠海馬組織pmTOR、mTOR和LC3B蛋白表達(dá)高于大強(qiáng)度運(yùn)動大鼠,但無顯著性差異；大強(qiáng)度運(yùn)動補(bǔ)充氫水組大鼠海馬組織mTOR和pmTOR蛋白表達(dá)高于大強(qiáng)度運(yùn)動大鼠,但無顯著性差異,LC3B蛋白表達(dá)顯著高于大強(qiáng)度運(yùn)動組(p0.05)。 9力竭運(yùn)動大鼠海馬組織mTOR和LC3B蛋白表達(dá)顯著高于安靜對照組p0.01),pmTOR蛋白表達(dá)顯著高于安靜對照組(p0.05)；與力竭運(yùn)動大鼠比較,力竭運(yùn)動補(bǔ)充VE組大鼠海馬組織mTOR、pmTOR和LC3B蛋白表達(dá)升高,但無顯著性差異；力竭運(yùn)動補(bǔ)充氫水組大鼠海馬組織mTOR、LC3B和pmTOR蛋白表達(dá)顯著高于力竭運(yùn)動組p0.05)；力竭運(yùn)動補(bǔ)充氫水組mTOR和pmTOR蛋白表達(dá)顯著高于補(bǔ)充VE組p0.05),LC3B蛋白表達(dá)有升高趨勢。 結(jié)論： 1補(bǔ)充氫水可有效降低大強(qiáng)度和力竭運(yùn)動對海馬神經(jīng)元造成的超微組織結(jié)構(gòu)損傷,降低線粒體腫脹程度,保護(hù)細(xì)胞膜和線粒體的結(jié)構(gòu)完整性。 2補(bǔ)充氫水可顯著降低大強(qiáng)度和力竭運(yùn)動大鼠血漿Hb含量,血清CK和SDH活性；氫水可以顯著降低大強(qiáng)度運(yùn)動組海馬組織MDA含量,顯著提高海馬組織SOD活性及總抗氧化能力；使力竭運(yùn)動大鼠海馬組織SOD顯著升高,MDA含量顯著降低,T-AOC水平極其顯著升高；有效降低海馬組織氧化應(yīng)激損傷。提高機(jī)體抗氧化能力：延長大鼠力竭運(yùn)動時間,提高機(jī)體運(yùn)動能力。 3補(bǔ)充氫水可顯著提高大強(qiáng)度和力竭運(yùn)動大鼠海馬組織mTOR和pmTOR蛋白表達(dá),降低自噬蛋白LC3B的表達(dá),抑制細(xì)胞的自噬現(xiàn)象,保護(hù)線粒體功能。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：陜西師范大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號】：G804.2

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2256877