急性運動對小鼠骨骼肌核蛋白Nrf2-ARE結合活性的影響
本文選題:Nrf-ARE結合活性 + 核蛋白; 參考:《中國運動醫(yī)學雜志》2015年07期
【摘要】:目的:通過一次性不同時間的急性運動,探討小鼠骨骼肌中核因子E2相關因子2(Nrf2)與抗氧化反應元件(ARE)結合活性隨運動時間的變化。方法:將C57BL/6J野生小鼠,根據(jù)運動時間隨機分為三組,分別是安靜對照組(0h組)、1小時運動組(1h組)和6小時運動組(6h組);采取坡度為5%,速度為20m/min的跑臺運動,運動結束后3小時取兩側骨骼肌。酶聯(lián)免疫法(ELISA)測定骨骼肌細胞核中的Nrf2-ARE結合活性,Western Blot法測定骨骼肌核蛋白中Nrf2含量,實時熒光定量PCR測超氧化物歧化酶1(SOD1)、超氧化物歧化酶2(SOD2)、谷胱甘肽還原酶(GR)、γ谷氨酰半胱氨酸連接酶(GCLm)、谷胱甘肽過氧化物酶(Gpx1)和血紅素加氧酶(HO-1)等基因的m RNA表達水平。結果:(1)Nrf2的結合活性1 h組與0 h組相比基本無變化,6 h組與0 h組相比顯著性增加(P0.05);(2)核蛋白Nrf2的相對含量1 h組與0 h組相比基本無變化,6 h組與0 h組相比有增加的趨勢但無顯著性;(3)隨著運動時間的增加,小鼠骨骼肌中GCLm、SOD1、SOD2、HO-1 m RNA相對表達量逐漸增高;Gpx1 m RNA相對表達量有增加的趨勢但是無顯著性;GR m RNA相對表達量無明顯變化;與安靜對照組相比,6 h組GCLm(P0.01)、SOD1(P0.01)、SOD2(P0.05)、HO-1(P0.01)m RNA相對表達量非常顯著性或顯著性增加。結論:(1)骨骼肌核蛋白Nrf2-ARE結合活性與運動時間呈正相關;(2)一次6小時長時間急性運動促進骨骼肌中Nrf2蛋白的核轉位,顯著增加核蛋白Nrf2-ARE的結合活性以及抗氧化酶GCLm、SOD1、SOD2、HO-1、Gpx1基因的m RNA水平。
[Abstract]:Aim: to investigate the effect of exercise time on the binding activity of nuclear factor E2 related factor 2nrf2 to antioxidation response element (ARE) in skeletal muscle of mice by acute exercise at different time. Methods: the wild C57BL/6J mice were randomly divided into three groups according to their exercise time. They were divided into three groups: the quiet control group (0 h) and the 6-hour exercise group (1 h) and the 6-hour exercise group (6 h). The skeletal muscles of both sides were taken 3 hours after exercise. Enzyme linked immunosorbent assay (Elisa) for the determination of Nrf2-ARE binding activity in skeletal muscle nuclei. Western Blot assay was used to determine the content of Nrf2 in skeletal muscle nuclear protein. The expression levels of m RNA of superoxide dismutase (1), superoxide dismutase (2), glutathione reductase (GRN), 緯 glutamyl cysteine ligase (GCLm1), glutathione peroxidase (Gpx1) and heme oxygenase (HO-1) were measured by real-time fluorescence quantitative PCR. Results compared with 0 h group, the binding activity of Nrf2 in the 1 h group was significantly higher than that in 0 h group. The relative content of nuclear protein Nrf2 in the 1 h group was significantly higher than that in the 0 h group (P 0. 05) the relative content of nucleoprotein Nrf2 in the 1 h group was almost unchanged compared with the 0 h group and the 0 h group was significantly higher than that in the 0 h group and the 6 h group was significantly higher than the 0 h group. The increasing trend is not significant with the increase of exercise time, The relative expression of HO-1 m RNA in skeletal muscle of mice was gradually increased, but there was no significant change in the relative expression of gr m RNA. Compared with the quiet control group, the relative expression of RNA in the 6 h group was significantly or significantly higher than that in the control group. Conclusion (1) Nrf2-ARE binding activity of skeletal muscle nuclear protein is positively correlated with exercise time. (2) Acute exercise for 6 hours can promote the nuclear translocation of Nrf2 protein in skeletal muscle. The binding activity of nucleoprotein Nrf2-ARE and the level of m RNA of antioxidation enzyme GCLm1 / SOD2 / HO-1Gpx1 gene were significantly increased.
【作者單位】: 北京體育大學運動人體科學學院;
【基金】:國家自然科學基金(31471134) 國家體育總局科研課題(2014B010)
【分類號】:R87
【參考文獻】
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